A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 00:35Site-directed Mutagenesis
- 01:45Transformation and Screening for the Desired Clone
- 02:35pcDNA3.1/GLA and pcDNA3.1/GAA Plasmid Transfection and Treatment of HEK293H
- 04:00Cell Harvest
- 04:43Homogenization by Freezing and Thawing and BCA Assay
- 06:17Enzyme Activity Measurement with Artificial 4-Methylumbeliferyl Substrate
- 08:19Results: Enzyme Activity Measurement Mutagenized 3 α-galactosidase and 3 Acid α-glucosidase
- 09:35Conclusion
Er is een vraag om preklinische testen voor een nieuwe klasse van "Wees" drugs genoemd farmacologische chaperones reproduceerbaar, snel en efficiënt. Voor patiënten die in aanmerking komen, alsmede nieuwe farmacologische chaperone drugs ontwikkelden we een eenvoudige, sterk gestandaardiseerde en veelzijdig cel cultuur gebaseerde bepaling naar het scherm.
Tags
In VitroEnzyme MeasurementPharmacological ChaperoneFabry DiseasePompe DiseasePhenotypic AssessmentAllelic VarianceLysosomal Storage DiseasesPrognostic OutcomesTherapeutic DecisionsSite-directed MutagenesisGLA GeneGAA GenePrimer DesignPCRDpn1E.coliPlasmid PurificationSpectrophotometerHEK293H CellsCell Transfection
