A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 2 minutes.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Immunostimulatory एजेंट मूल्यांकन: लसीकावत् ऊतक निष्कर्षण और इंजेक्शन मार्ग-निर्भर वृक्ष सेल सक्रियण
Chapters
Summary September 16th, 2018
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
लसीकावत् वृक्ष कोशिका सक्रियण परीक्षण करने के लिए लसीका ऊतकों के बाद निष्कर्षण के लिए प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं एक immunostimulating nanomaterial के उपचार के बाद वर्णित हैं ।
Transcript
इस प्रक्रिया का समग्र लक्ष्य चूहों से मध्यस्थ लिम्फ नोड को अलग करने में आवश्यक अनूठी तकनीक से परिचित कराना है। यह ऑपरेशन चूहों में छह विभिन्न मार्गों पर इम्यूनोस्टिमुलेंट सामग्री का इंजेक्शन लगाने के बाद किया गया । इस अध्ययन में, हमने नैनो आकार की संरचनाओं को बनाने वाली सामग्री के एक नए वर्ग का उपयोग किया।
सर्फेक्टेंट में हाइड्रोफिलिक हेड ग्रुप और हाइड्रोफोबिक टेल शामिल हैं। वे माइक्रोफेज पृथक्करण के कारण गोलाकार मिसेल या अन्य माध्यमिक संरचना बनाते हैं। हमने इस संपत्ति का उपयोग एक जैव मैक्रोमॉल्यूल्यूल में किया जो डीएनए है।
डीएनए एम्फीफिल, यहां दिखाया गया है, जैसे कि ए, सी, जी, टी जैसे नियमित न्यूक्लियोटाइड्स में हाइड्रोफिलिक ब्लॉक होते हैं जबकि लिपिड संशोधित न्यूरो-सेल न्यूकोबास्टेस हाइड्रोफोबिक इकाइयों के रूप में कार्य करते हैं। संशोधित ओलिगो को बड़े पैमाने पर ऑक्टोग्राम में डीएनए सिंथेसाइज़र द्वारा संश्लेषित किया गया था। इक्वि-मीडिया में एम्फीफिलिक लिपिड डीएनए अनायास नैनो के आकार के गोलाकार मिसेल्स बनाते हैं।
जब मिसेल का गठन होता है, तो डीएनए व्यास में लगभग 10 नैनोमीटर के साथ एक खाली वाहक के रूप में एक-फंसे रहता है । वाहक को प्रतिरक्षा-उत्तेजक से लैस करने के लिए, डीएनए अनुक्रम को टोल-जैसे रिसेप्टर नौ एडजुवेंट अर्थात् eCpG के साथ विस्तारित करना सरल बात है । लिपिड डीएनए और eCpG आधार यहां इसलिए micelle की बाहरी सतह CpG अनुक्रम के साथ अपमानित किया जाता है ।
हम तो इस प्रतिरक्षा उत्तेजक नैनो कण आईएनपी के रूप में नाम । प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के लिए आईएनपी के उचित तरीके का निर्धारण करने के लिए हमने 64 इंजेक्शन मार्गों में चूहों को आईपीएस इंजेक्ट किया और नतीजतन एक उचित लिम्फ नोड ऊतक का विश्लेषण किया गया। अधिक विस्तृत इंजेक्शन अनुदेश के लिए कृपया 2012 में चार्ल्स नदी द्वारा प्रकाशित एक नौकरी लेख ढूंढें।
इस वीडियो का मुख्य लाभ नेत्रहीन दिखा रहा है कि मध्यस्थ लिम्फ नोड कैसे प्राप्त करें। वीडियो स्पष्ट रूप से मध्यस्थ लिम्फ नोड के स्थान से पता चलता है जो बहुत से लोगों को अंगों को अलग करने में कठिनाई मिलती है । सभी प्रयोग शंघाई पब्लिक हेल्थ क्लीनिकल सेंटर, या यूनिवर्सिटी ऑफ उल्सान कॉलेज ऑफ मेडिसिन में इंस्टीट्यूशनल एनिमल केयर एंड यूज कमिटी के दिशा-निर्देशों के तहत किए गए ।
यह हिस्सा अंगों या ऊतकों के विशिष्ट स्थान को दिखाएगा, जो प्रतिरक्षा विश्लेषण के लिए महत्वपूर्ण हैं। तिल्ली और दो लिम्फ नोड्स अलग-थलग पड़ जाएंगे। सबसे पहले, चूहों कार्बन डाइऑक्साइड साँस लेना इच्छामृत्यु द्वारा बलिदान किया गया और संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति के मार्गदर्शन के बाद के रूप में दुख को कम करने के लिए सभी प्रयास किए गए ।
अब से चलो अंगों को ढूंढते हैं और उन्हें अलग करते हैं। सबसे पहले, माउस की हथेली पर चार पिन के साथ ऑपरेटिंग डेस्क पर माउस को ठीक से ठीक करें। विच्छेदन क्षेत्र को शराब के साथ स्टरलाइज करें।
बाहरी कवर को माउस पेट के नीचे एक बड़े आकार के कैंची से विच्छेदन करें। अटैचमेंट के दोनों पक्षों को खोलने और ऑपरेटिंग टेबल पर पिन के साथ इसे ठीक करने के लिए संदंश का उपयोग करें। बाएं पैर की ओर नीचे जा रहे पोत के संयोजन को खोजने के द्वारा इंगिनल लिम्फ नोड का स्थान उजागर किया जाता है।
पोत का आकार झुका हुआ वर्णमाला पत्र की तरह दिखता है Y.संदंश के साथ परत को उजागर करें और इसे त्वचा से खींचें। आंतरिक अंगों को बेनकाब करने के लिए छोटे कैंची के साथ पेरिटोनम काटें। संदंश का उपयोग करके आंत को दाईं ओर ले जाएं फिर आकार की तिल्ली में लपेटें, जो पेट के बाईं ओर, ऊपरी बाईं ओर दिखाई देते हैं।
प्रक्रिया के दौरान अतिरिक्त ध्यान देने की आवश्यकता है क्योंकि तिल्ली को बाधित करना आसान है। अंत में इस वीडियो का महत्वपूर्ण बिंदु: मध्यस्थ लिम्फ नोड की कटाई। यह फेफड़ों के ऊपरी हिस्से के नीचे स्थित है, जो इसके छोटे आकार और कुछ हद तक छिपे हुए स्थान के कारण देखना मुश्किल है।
छोटी कैंची और संदंश का उपयोग करके क्षेत्र को सावधानीपूर्वक बेनकाब करें। पसलियों के दोनों किनारों और डायाफ्राम को भी काट लें। छाती के ऊपर कटी हुई पसलियों को क्लिप करें।
प्रक्रिया के दौरान हानिकारक दिल और रक्त वाहिकाओं से बचने के बाद से यह साइट अंधा हो सकता है, पारदर्शी मध्यस्थ लिम्फ नोड खोजने । यदि दुर्घटना से रक्त वाहिका फट जाती है, तो धीरे-धीरे धुंध से रक्त को मिटा दें। फेफड़ों के बाईं ओर पकड़ो और धीरे से फेफड़ों के नीचे देखने के लिए दूसरी तरफ इसे चालू करें।
संदंश का उपयोग कर mediastinal लिम्फ नोड खींचो। मीडियास्टिनल लिम्फ नोड की कटाई के बाद, लिम्फ नोड के आसपास के सभी वसा और रक्त को पूरी तरह से हटाना सुनिश्चित करें क्योंकि अवांछित ऊतक विश्लेषण को प्रभावित कर सकते हैं। अंत में, मीडिया से भरे पेट्री डिश पर सभी अलग अंग ।
इस प्रवाह साइटोमेट्री पर छठी कोशिकाओं को कुल 0.1 गुना 10 का विश्लेषण किया गया था। बल गेटर और आकार गेटर ल्यूकोसाइट आबादी के आधार पर गेट किया गया था और कोशिकाओं को अंधेरे धुंधला द्वारा बाहर रखा गया था। 64 इंजेक्शन मार्गों, तिल्ली, इंजिनियल लिम्फ नोड द्वारा आईएनपी इंजेक्शन के 24 घंटे बाद, और मध्यस्थ लिम्फ नोड को काटा गया और प्रवाह साइटोमेट्री द्वारा डीसी सक्रियण का विश्लेषण किया गया।
प्रवाह साइटोमेट्री डीसी आबादी की रणनीति के आधार पर लाइव ल्यूकोसाइट में CD11C सकारात्मक और वंश नकारात्मक कोशिकाओं के रूप में परिभाषित किया गया था। विशेष रूप से, आईएनपी के इंट्रानासल इंजेक्शन ने नियंत्रण के लिए पीबीएस की तुलना में मीडियास्टिनल लिम्फ नोड में सीडी 40, 80, 86 अभिव्यक्ति में महत्वपूर्ण वृद्धि को बढ़ावा दिया। इसलिए, इस डेटा ने सुझाव दिया कि फेफड़ों में प्रतिरक्षा बढ़ाने के लिए आईएनपी के इंट्रानासल इंजेक्शन को म्यूकोसल एडजुवेंट के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है।
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.
