واحد--الذين تقطعت بهم السبل الحمض النووي (سدنى) على نطاق واسع واعتبرت كعنصر التعرف جزيئي (مخاطر) بسبب خصائصه الجوهرية للحمض النووي DNA التهجين1،2. يمكن أن يؤدي تطوير النظم الاصطناعية ssDNA للتطبيقات البيولوجية مثل الحمض النووي [ميكروارس]3، أوليجوثيرابيوتيكس، والتشخيص، والاستشعار الجزيئية متكاملة تستند إلى تفاعلات مكملة4،5.
وحتى الآن، جزيئات البوليمر ميكرومتر-مقياس تم بنجاح أثبتت استخدام أجهزة موائع جزيئية. العديد من التقنيات موائع جزيئية قد ثبت أن تكون قوية لإنتاج عالية متجانسة الجزئي المجالات الخرز الصغير على التدفق المستمر في6،البيئة microchannel7.
في دراسة لي et al. وذكر 8، منصة المستندة إلى الحبرية موائع جزيئية لتوليف موائع جزيئية كوبوليميريزابل اليغو-ميكروسفيري وسدنا التضخيم. منهاج موائع جزيئية تتكون من طبقتين PDMS (بولي دايمثيل سيلوكسان): جزء العلوي مع شبكة قناة موائع جزيئية لتوليد ميكروسفيري ومن أسفل جزء مسطح. وهذه تتألف من ثلاثة أنواع من قنوات فلويديك PDMS: 1) تدفق تركز القناة لتوليد الحبرية و 2) قناة السربنتين لخلط الحلين 3) قناة بلمرة متسلسل للتصلب ميكروسفيري. حالما يتم إدخال تدفقين قابلة للامتزاج في قناة فلويديك PDMS واحدة، يمكن أن يجبر التدفقات من خلال هيكل الفوهة الضيقة. سلوك تدفق مثل الهندسة القناة، ومعدل التدفق، واللزوجة تؤثر على حجم ومورفولوجية ميكروسفيري. ولذلك، يمكن تقسيم التيار الرئيسي السائل microscale مونوسفيريس9،10.
هنا، يتم توفيرها بروتوكول بكر ميكروسفيري مفصلة لتضخيم سدنى. أولاً، يتم وصف عملية تصميم الأجهزة المستندة إلى الحبرية موائع جزيئية. ثم، هو شرح الطريقة في بولياكريلاميدي التي يمكن فونكتيوناليزيد الجزئي المجالات الخرز الصغير مع قالب الحمض النووي عشوائية بطريقة متكاملة. وأخيراً، يرد بروتوكول ميكروسفيري-بكر لتضخيم ssDNA.
يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في تقنية الجمع بين نظام microfluidic ومجال التكنولوجيا الحيوية الجزيئية ، مثل الأجهزة microfluidic وطريقة PCR عدم التماثل. المزايا الرئيسية لهذه التقنية هي التوليد الفعال للميكروسفيرات المتجانسة للغاية وإنتاج الحمض النووي الأحادي دون أي خطوات فصل إضافية. الآثار المترتبة على هذه التقنية تمتد نحو التشخيص أو العلاج من الأمراض المختلفة.
لأن توليد الحمض النووي واحد حبلا هو المفتاح لمقايس ap-ta-mo-sis، يمكن استخدامه للكشف والعلاج. على الرغم من أن هذه الطريقة يمكن أن توفر نظرة ثاقبة في نظام microfluidic ثلاثي الأبعاد في MEMS ، فإنه يمكن أيضا أن تطبق على أنظمة أخرى تستخدم للكشف عن الأمراض وعلاجها. عموما، سوف الأفراد الجدد لهذه الطريقة النضال من أجل السيطرة بشكل صحيح السوائل من تدفق في الاتجاه العكسي.
يعد العرض التوضيحي المرئي لهذه الطريقة أمرًا بالغ الأهمية لمراقبة تكوين الغلاف الدقيق في هندسة تركيز التدفق وصلابة النطاقات الصغرية المولدة. أولا، إعداد 20 ملليلتر من السائل PDMS قبل البوليمر عن طريق خلط البوليمر قاعدة وحافز في نسبة 10 إلى واحد. صب 10 ملليلتر من PDMS السائل على قالب سو 8 أعدت على رقاقة السيليكون للجزء العلوي من شبكة microfluidic.
للجزء السفلي شقة، صب نفس حجم PDMS السائل على رقاقة السيليكون دون هيكل العفن. ضع ورقتين من رقائ