Please note that all translations are automatically generated.
Vi indføre en murine orthotopic bryst kræft model og radikal mastektomi model med bioluminescens teknologi at kvantificere tumor byrden for at efterligne menneskelige bryst kræft progression.
Denne metode kan hjælpe med at besvare centrale spørgsmål i brystkræft området om, hvordan man efterligner menneskelige brystkræft progression og behandling i en mus model. Den største fordel ved denne mus brystkræft model er, at det har en høj tumorigenesis sats efter ortopisk implantation og en lav lokal gentagelse sats efter mastektomi. Begynd med at bekræfte en manglende reaktion på tå knivspids i en bedøvet kvindelig mus og tape dyrets lemmer til et kirurgisk bord.
Brug sterile vatpinde sterilisere det kirurgiske område med chlorhexidin, jod og 75% ethanol. Og lav et fem millimeter hudsnit midt på den forreste brystvæg. Næste løft højre side af huden støder op til snittet og bruge sterile microdissection saks til at frigøre huden fra brystvæggen.
Inverter huden til at udsætte den rigtige nummer to mammary fedt pad og bruge en en-milliliter insulin sprøjte udstyret med en 28,5-gauge nål til omhyggeligt injicere 20 mikroliter af kræft celle suspension gennem såret i fedt pad. Hold nålen i fedtpuden i fem sekunder for at tillade gelatinøse kræftcelleproteinblandingen at størkne, før nålen fjernes, og lukke snittet med sterile 5-0 ikke-absorberelige suturer. Derefter placere dyret i et rent bur med overvågning, indtil fuld recumbency.
At udføre mastektomi otte dage efter kræft vaccination forberede musen til kirurgi som netop påvist, og gøre en fem-millimeter hud indsnit to millimeter til venstre for det kirurgiske ar fra kræftcelle vaccination. Udvide snittet mod roden af forelimb for at fjerne tumoren, og huden, herunder den kirurgiske ar, og læsionen i kontakt med tumoren, og aksillær lymfeknude bassin, hvor typisk ingen synlige lymfeknuder er til stede på tidspunktet for mastektomi. Luk derefter huddefekter med sterile 5-0 ikke-absorberelige suturer i form af et Y.And returnere dyret til sit bur med overvågning, indtil fuld incumbency.
For lungemetastase kvantificering 21 dage efter inokulering injicere 150 mg / kg D-Luciferin IP 15 minutter før dødshjælp. Og bruge buede Mayo saks til at åbne huden og bughinden i midten af maven. Tryk leveren ned, indtil mellemgulvet kan visualiseres, og skær mellemgulvet og de bilaterale ribben fra caudad til cephalad.
Flip den forreste brystkasse væg til at udsætte lungerne og løfte lungerne for at identificere brystkasse spiserøret, der ligner en ledning, der forbinder lungerne til rygsøjlen. Skær spiserøret med microdissection saks og bruge kraftbiske til at trække de bilaterale lunger og hjerte mod caudad. Skær derefter luftrøret og de store fartøjer til lungeapex på cephalad og placere lungerne i en 10-centimeter petriskål til bioluminescerende billeddannelse.
Brug saksen til at fjerne hjertet fra lungevævet. Begynder på omkring otte dage efter bryst fedt pad kræft celle vaccination bioluminescens i lungerne er dybere og mindre end i den primære læsion afspejler den primære tumor byrde i levende mus. Måling af tumorstørrelsen med calipre gør det muligt at anslå tumorvolumen in situ.
Denne mastektomi model giver også mulighed for seriel metastatisk tumor byrde overvågning uden at skulle aflive dyrene. Tumor byrde af lungemetastaser kan også kvantificeres ved ex vivo imaging, men begrænsningen er, at musene skal aflives. Musens overlevelse efter kirurgisk behandling kan også overvåges som et overførbart klinisk endepunkt.
Efter sin udvikling denne teknik banede vejen for forskere inden for brystkræft til at udforske ikke kun nye udvikling af lægemidler, men også brystkræft forskning i almindelighed.
