توصيف لتمزق الأغشية البلازمية ملكل بوساطة في نيكروبتوسيس

ويسرت تحديد العناصر الوراثية في نيكروبتوسيس استخدام نماذج حيوانية لاختبار الأثر المترتب على نيكروبتوسيس في علم وظائف الأعضاء والأمراض^1،2،3،،من⁴⁵. خروج المغلوب من RIPK3 أو ملكل في الفئران أثر ضئيل في التوازن الإنمائي والكبار مما يوحي بأن نيكروبتوسيس ليست ضرورية للحياة^3،6. وعلاوة على ذلك، لا تحتوي على أنواع معينة من الجينات أما RIPK3 أو ملكل، ودعم الدور غير الضرورية نيكروبتوسيس في الحيوانات^7،8. من ناحية أخرى، كشفت تتحدى نماذج حيوانية خروج المغلوب مع مختلف الأمراض التي يسببها في المختبر دوراً هاما في نيكروبتوسيس في التهاب والحصانة الفطرية، والعدوى الفيروسية^{9،10، 11 , 12}.

يمكن تنشيط نيكروبتوسيس بعدة طرق بإشارات من خلال أجهزة الاستشعار المختلفة الحصانة الفطرية، كافة التي تؤدي إلى تفعيل RIPK3^1،،من¹³¹⁴. RIPK3 النشطة بدوره فوسفوريلاتيس وينشط ملكل^3،4،5،،من^67،،من^{89،10 ،11،،}من^{1213،14،15،16،،}من¹⁷¹⁸. درس أكثر من غيرها، وربما ينطوي بالطريقة الأكثر تعقيداً، مما يؤدي إلى تنشيط RIPK3 الموت مستقبلات ربط، الذي إلى على أساس التكوين المصب من المجمعات إرسال الإشارات لحمل أما المبرمج أو نيكروبتوسيس¹. نيكروبتوسيس تستتبعه عندما إشارات من خلال RIPK1 هو يفضل ويؤدي إلى إشراك RIPK3^19،20. هو يفضل هذه النتيجة بسهولة على تثبيط الدوائية أو حذف الوراثية caspase 8، مثبط ذاتية المفترضة من نيكروبتوسيس التي تحافظ نيكروبتوسيس في خليج. تربط بين RIPK1 وينشط RIPK3. طريقة أخرى لتنشيط نيكروبتوسيس من خلال عدد القتلى مثل مستقبلات الإشارات TLR3/TLR4، الذي يشارك وينشط RIPK3 عن طريق يحتوي على مجال النقل الدولي البري الذي يحفز محول الانترفيرون-بيتا (تريف)²¹. بعد طريقة أخرى ليموت قبل نيكروبتوسيس بتفعيل استشعار الحمض النووي داي، الذي يشرك مباشرة وينشط RIPK3²².

ملكل بروتين سيتوسوليك تتألف من مجال حزمة (ملحوظة) اللولب الطرفي ن وفي مجال بسيودوكيناسي ج-طرفية (بسكد) مرتبطة ب منطقة تنظيمية قوس³. في الخلايا الطبيعية، تم العثور على ملكل في سيتوسول حيث أنه يعتقد أن يكون في مجمع غير نشطة مع RIPK3¹⁴. تفعيل نيكروبتوسيس مشغلات الفسفرة RIPK3 من ملكل في حلقة التنشيط بسكد، ومواقع إضافية محتملة في ملحوظة وقوس^15،3،23. الفسفرة الحث على تغيير كونفورماشونال في ملكل التي ينتج عنها تفكك من RIPK3¹⁴. الإصدار تغييرات conformational غير مفهومة في القوس من بسكد²⁴. يتوسط القوس، الذي يحتوي على لوالب 2، أوليجوميريزيشن ملكل في تريمير المفترضة من خلال اللولب ج-مبنى رقم²⁵. يمنع اللولب الطرفي ن من القوس المجال NB، هو أمر أساسي لغشاء بيرميبيليزيشن^24،26. بمعزل عن غيرها، المجال NB كافية لحمل permeabilization غشاء البلازما ونيكروبتوسيس^16،،من²⁴²⁷. أعيد نشاط برو-نيكروبتوتيك ملحوظة في الماوس الخلايا الليفية الجنينية قاصرة في ملكل (ملكل^-/- ميفس). ملحوظة: هو مجال ملزم دهن ضلعت تفضيلي diphosphate فوسفاتيديلينوسيتول 4، 5 فسفوليبيد (المرحلة₂). واقترحنا إليه التدرجي لتفعيل ملكل، حيث يسهل أوليجوميريزيشن قوس تجنيد ملكل لغشاء البلازما عن طريق التفاعلات الضعيفة من ملحوظة مع الأقطاب رئيس الفريق₂ النقطة²⁴. في الغشاء، يخضع NB التعرض ينظم موقع إضافية عالية تقارب ملزمة للنقطة₂، الذي هو يخفيها في القوس في ملكل غير نشط. إجمالاً، زعزعة تفاعلات متعددة ملحوظة مع النقطة₂ غشاء البلازما مما يؤدي إلى تمزق به، على الرغم من أن لا يكون تم توضيح الآلية الجزيئية لهذه الأحداث.

نحن هنا لتوضيح الأساليب المحددة المستخدمة لتوصيف وظيفة ملكل كالجلاد نيكروبتوسيس²⁴. على وجه الخصوص، نحن نركز على المجال الأدنى ملكل، وملحوظة وقوس (NBB)، الذي يخضع لتثبيط قوس ويمكن تفعيلها من خلال ثنائي القسري للحث على تمزق الأغشية البلازمية ونيكروبتوسيس. يصف لنا نظامنا التعبير إيندوسيبلي جنبا إلى جنب مع المخدرات التي يسببها فكبب بوساطة ثنائي القسري لتصوير خلية يعيش، والمجهر الإلكتروني للخلايا التي تمر نيكروبتوسيس. بالإضافة إلى ذلك، توضح لنا تحليلنا في المختبر الرنين المغناطيسي لتفاعلات NBB مع فوسفاتيديلينوسيتولس (نقطة).