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Deprivazione di sonno cronica nel topo cuccioli per mezzo di Gentle Handling
Chapters
Summary October 11th, 2018
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Descriviamo una tecnica di privazione di sonno conosciuta come manipolazione delicata dove gli investigatori delicatamente prod topi qualsiasi momento viene osservato il comportamento di sonno. Questo metodo è un potente strumento che permette ai ricercatori di studiare gli effetti che la restrizione di sonno cronica nel corso dello sviluppo può avere sul comportamento e sulla fisiologia futuro cervello.
Transcript
Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo del sonno come gli effetti della restrizione cronica del sonno durante lo sviluppo postnatale. Il vantaggio principale di questa tecnica è che è meno stressante di altre tecniche di privazione del sonno e può essere facilmente utilizzato durante lo sviluppo e continuare fino all'età adulta. Inizia assegnando ogni gabbia alla privazione del sonno o al gruppo di controllo.
Assicurarsi che i topi abbiano accesso a cibo e acqua ad libitum e rimuovere qualsiasi cibo, biancheria da letto o oggetti di arricchimento che potrebbero limitare la vista dei topi. Per il gruppo di controllo, rimuovere il sire dalla gabbia dell'allevatore il quinto giorno postnatale e lasciare la diga con i cuccioli fino allo svezzamento. Quindi, spostare i topi assegnati al gruppo di controllo nella stanza di privazione del sonno e pungere delicatamente i topi con un pennello continuamente per 10 minuti al giorno per tutta la durata dell'esperimento.
Dopo 10 minuti, riportare i topi nella stanza di detenzione dell'animale e non disturbarli. Inizia rimuovendo il sire dalla gabbia dell'allevatore il quinto giorno postnatale e lascia la diga con i cuccioli fino allo svezzamento. Spostare quotidianamente i topi assegnati al gruppo di privazione del sonno nella stanza di privazione del sonno durante il ciclo di luce in cui verranno monitorati.
Durante questo periodo, pungere delicatamente il mouse con un pennello se sospettato di dormire fino a quando non viene osservata una risposta. In alternativa, inverti i topi e spingi sulla schiena per interrompere il sonno. Considera un mouse addormentato se si verifica una delle seguenti contrazioni: contrazioni, inattività o se gli occhi sono chiusi.
Considera i topi svegli se si muovono, cercano di capovolgersi dopo essere stati sulla schiena o pulirsi. Se la diga copre i cuccioli durante la privazione del sonno, allontanarla delicatamente dai cuccioli in modo che la vista dei cuccioli sia illimitata. Continuare con il protocollo di privazione del sonno fino all'endpoint dell'esperimento.
Quando il periodo di tre ore di privazione del sonno è completo, metti la biancheria da letto e qualsiasi cibo che potrebbe essere stato rimosso e rimette il coperchio sulla gabbia. Infine, riportare le gabbie nella stanza di detenzione degli animali fino al giorno successivo di privazione del sonno. Dopo un periodo di recupero di un mese, i risultati hanno indicato che nel test di socialità, le femmine con restrizioni di sonno passavano più tempo a fiutare il topo straniero rispetto a controllare le femmine e i maschi con restrizioni di sonno avevano la tendenza a passare più tempo a annusare l'oggetto rispetto ai maschi di controllo.
Inoltre, nella fase di novità sociale dei test, i topi femmine con restrizioni di sonno hanno trascorso una maggiore quantità di tempo a fiutare il nuovo topo rispetto ai controlli femminili. Durante il tentativo di questa procedura, è importante ricordare di prestare attenzione e rispondere prontamente ai comportamenti pre-sonno, specialmente nei topi neonatale in cui il bisogno di sonno è elevato. Seguendo questa procedura, altri metodi come campo aperto, rotarod, elevato più labirinto e test del comportamento sociale possono essere eseguiti al fine di rispondere a domande aggiuntive come gli effetti comportamentali a lungo termine della restrizione cronica del sonno durante lo sviluppo.
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