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Kalibrierung-kostenlose In-vitro- Quantifizierung von Protein Homo-Oligomerisierung mit kommerziellen Instrumentierung und kostenlose Open Source-Helligkeit-Analyse-Software
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JoVE Journal Biochemistry
Calibration-free In Vitro Quantification of Protein Homo-oligomerization Using Commercial Instrumentation and Free, Open Source Brightness Analysis Software
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Kalibrierung-kostenlose In-vitro- Quantifizierung von Protein Homo-Oligomerisierung mit kommerziellen Instrumentierung und kostenlose Open Source-Helligkeit-Analyse-Software

DOI:
10.3791/58157-v

•

08:22 min

•

July 17, 2018

•

, , , , ,
1Cellular Imaging Group, Wellcome Centre Human Genetics,University of Oxford, 2Division of Structural Biology, Wellcome Centre Human Genetics,University of Oxford, 3Dynamic Structural Virology Group,Biocruces Health Research Centre, 4IKERBASQUE,Basque Foundation for Science

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:50FKBP12F36V-mVenus Purification
  • 03:24Preparation of Multiwell Plate Array
  • 04:19Calibration-free Confocal Acquisition
  • 06:26Results: FKBP12 Dimerizes upon Addition of BB Dimerizer Drug
  • 07:23Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Dieses Protokoll beschreibt einen Kalibrierung-freie Ansatz zur Quantifizierung der Protein Homo-Oligomerisierung in Vitro basierend auf Fluoreszenzspektroskopie Fluktuation mit kommerziellen Licht Rasterelektronenmikroskopie. Die richtige Übernahme Einstellungen und Analysemethoden werden angezeigt.

Tags

Protein Homo-oligomerizationIn Vitro QuantificationCalibration-freeConfocal MicroscopyBrightness AnalysisProtein-protein InteractionsDrug ScreeningCancer DrugsSmall-molecule InhibitorsFusion InhibitorsProtein DynamicsCell-cell InteractionsFKBP12His6 TagMVenus TagIMACSize-exclusion Chromatography

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