Stress-förbättrade rädsla lärande, en Robust gnagare modell av posttraumatiskt stressyndrom

Denna metod kan hjälpa till att besvara viktiga frågor inom beteendemässiga neurovetenskap området, såsom hur man bättre förstå underliggande biologiska mekanismer av PTSD. Den största fördelen med denna teknik är det är robust, tillförlitlig, kvantitativ, och kan utföras i flera arter. Börja med att inrätta en uppsättning rädsla konditionering kammare att fungera som sammanhang A, och en andra uppsättning rädsla konditionering kammare att fungera som sammanhang B.Place varje rädsla konditionering kammare inuti ett ljud förmildrande bås för att förhindra intrång av yttre buller.

Placera sedan rutnätsgolv i varje rädsla konditionering kammare för fotchock leverans, med hjälp av ett annat rutnät mönster för varje sammanhang för att skilja golv textur mellan sammanhang. Därefter placerar svart plexiglas triangulära skär i sammanhang B för att skilja den interna layouten för de två sammanhang. Torka av kammarens väggar och dörrar och spraya pannorna under gallergolven med en utspädd rengöringslösning.

Efter att gallergolvet är rengjort, anslut en stötgenerator och scrambler som kan leverera en 1 milliamp eller lägre amplitudstöt till varje gallergolv för fotchocksleverans. Använd slutligen en multimeter för att testa den ström som levereras av chockgeneratorn genom att placera varje sond på en annan stapel i rutnätsgolvet, och bekräfta att den önskade chockamplituden produceras. På dag ett, ställa in sammanhang A med rutnät golv och synligt ljus.

Se till att multimetern är fäst vid olika stänger för att bekräfta önskad stötamplitud. Transportera djur från vivarium till experimentrummet i sina hemburar placerade på en vagn och placera individuellt i de fyra rädsla konditioneringskamrarna. För mus experiment, använd chock generator och scramblers att leverera 10 en sekund, en milliamp fot chocker slumpmässigt presenteras över 60 minuter genom rutnätgolv av kamrarna som innehåller trauma betingade ämnen.

För råtta experiment, använda chockgeneratorn och scramblers att leverera 15 en sekund, en milliamp fot chocker slumpmässigt presenteras över 90 minuter genom gallerstänger av kamrarna som innehåller trauma betingade ämnen. Efter 90 minuter för råttan, eller 60 minuter för musen experiment, returnera alla djur till sina hem burar och snabbt återvända till vivarium. På dag två, inrätta sammanhang A och transportera djur till experimentrummet som gjort på dag ett.

Placera djur i kontext A i åtta minuter, utan chockleverans och videoinspelning av beteendet under hela sessionen. Efter åtta minuter, returnera alla djur till sina hem burar och snabbt återvända till vivarium. På dag tre, ställa in sammanhang B med en annan uppsättning av rutnät golv från de som används i sammanhang A och svart triangulära eller vita böjda plexiglas skär.

Använd infrarött eller nära infrarött ljus om det behövs för att belysa kamrarna, och kontrollera stötamplituden med multimetern. Torka av kamrarna och spraya pannorna under gallergolven med den lösning som inte används i sitt sammanhang A.Next transporterar djur från vivarium till experimentrummet i ett svart plastbadkar och placerar dem individuellt i rädsla konditioneringskammare. Efter en 180 sekunders baslinjeperiod, leverera antingen en enda sekund, en milliamp fot chock för råttor, eller en enda två sekunder, en milliamp fot chock för möss, till alla djur.

Ta sedan bort alla djur 30 sekunder efter chockleverans och återgå omgående till vivariumet. På dag fyra av förfarandet, inrätta sammanhang B som gjort på dag tre. Transportera djur från vivarium till experimentrummet i samma transport som gjort på dag tre.

Placera djur i sammanhang B i åtta minuter utan chockleverans, och videoinspelning frysning under hela sessionen. Slutligen, ta bort alla djur efter åtta minuter och snabbt återvända till vivarium. Resultaten visar att djur i trauma villkoret visade betydligt högre nivåer av frysning i sammanhang A jämfört med inga trauma kontroller, vilket tyder på förvärv av rädsla till trauma sammanhang.

Både trauma och inga trauma djur visade minimal frysning nivåer som inte skiljer sig från varandra. Vidare visade traumadjuren lägre chockreaktivitet jämfört med inga traumakontroller, och traumadjur visade större frysning jämfört med inga traumakontroller, vilket indikerar att exponeringen för den traumatiska stressaren ökade rädslan omedelbart efter den milda stressorn. Efter detta förfarande, andra metoder som förhöjda plus labyrint, öppet fält, och ljus-mörk box kan utföras för att besvara ytterligare frågor som hur trauma påverkar ångest-liknande fenotyper.