牛乳腺活检技术

活检，我想大多数人知道，是从感兴趣的器官去除一点组织，在这种情况下，它是乳腺。活检样本是非常有用的，如果你打算做的事情，如基因表达分析，如果你打算做一些事情，如采取一些组织和做一个组织学分析，看看在乳腺的微观水平的结构，也非常有用，以确定像激素作用相关的信号通路，例如， 所以当你做任何类型的乳腺组织取样时， 你需要注意的一个警告是， 你是否采取了真正具有代表性的样本？因为，你可以捕获一个葡萄，这就像一簇葡萄，或者你可以捕获一些个体的肺黄体，真的不代表正常，所以，当你做乳房活检时，希望你收集乳腺组织，这只是一个花哨的词说，负责生产牛奶的功能组织，具有代表性的样本。

乳腺中的大多数感觉神经末梢都与皮肤相关，因此重要的是要认识到并认识到，一旦你做了适当的准备，你准备的地方，你准备的初始切口，麻醉皮肤，然后很少有感觉神经末梢与乳腺组织本身相关的方式，因此动物会感到不适主要与皮肤有关。因此，有各种各样的事情，可以做这种组织，它实际上允许人们收集更多关于动物是如何工作的信息，相比之下，从简单地观察什么喂给动物和牛奶蛋白输出或牛奶成分输出的反应可能获得。所述所有方法都得到弗吉尼亚理工大学动物护理和使用委员会的批准。

在预定的活检前一天，清洗和擦洗动物，特别是尿垫，以去除粪便和脏污物质。评估动物的健康、身体状况和行为。只使用健康的奶牛。

完全挤牛奶的奶牛。将动物移入挤压槽中，最好在挤奶后两小时内将奶体中的牛奶存在降至最低。用头门约束动物。

将绳索吊带放在牛头上，以防止向后和向前移动。将动物的头拉到一边，用快速释放结将绳索系在挤压滑槽上，将头部固定到位。用70%异丙醇拭子清洁注射区域，并在活检前15至20分钟，通过静脉静脉，以每公斤体重1.1至2.2毫克为注射液。

找到壶脉。通过施加在壶槽底部的压力来提升壶脉。检查以确保注射器中没有气泡。

将针头插入凸起的血管，将 0.5 毫升血液抽入注射器两次，然后与内装物混合。如果注射器中未显示血液，则重新定位针头。如果针头位于静脉中，则注射内装物。

轻轻取出针头，用柔和的压力涂抹纱布，防止出血。在活检前约5至10分钟，在胆小血管中静脉注射施用盐酸Xylazine，每公斤体重0.01至0.05毫克，以便有足够的时间进行静种。抬起尾巴，用70%异丙醇拭子清洁注射区域。

检查以确保注射器中没有气泡。将针头插入尾血管，将0.2毫升血液放入注射器中，与内装物混合，以确保针头驻留在血管中。如果针头是留用的，则注射注射器内容物。

轻轻取出针头。将纱布轻轻压在注射部位。手头有一个α二逆转真的很重要，比如托拉佐林，这是因为奶牛对Xylazine的影响很敏感，过量服用Xylazine会导致肺水肿，这对奶牛可能是致命的，所以注意你的奶牛是否有过度作用的迹象，如果发生这种情况，那么可能会给予适当数量的托拉佐林。

我们希望我们的奶牛在手术中站立。太多的木拉辛可能会导致他们坐下。有一个助理绑尾的程序，选择乳房上的活检点位，通常在上部区域，以尽量减少结缔组织的收集，并避免渗透到腺体蓄水池。

观察和触感皮肤，特别注意识别任何大型皮下血管，以避免这些血管在活检期间。从活检地点周围15到15厘米的平方区域剪头发，准备活检区与波维多碘，0.75%可用碘，或氯己丁葡萄糖酸盐磨砂。至少三次替代 70%异丙醇，以清除所有可见和不可见的碎屑。

使用从内到外的方法，在圆周运动中应用无菌磨砂溶液和异丙醇。确保防腐剂磨砂溶液与皮肤保持至少五分钟的接触。使用蝴蝶输液套与18G针沉积6毫升2%利多卡因盐酸皮在切口部位创建一个线块。

不要渗透到更深的组织。让局部麻醉剂扩散三到五分钟，在切口前再次重复磨砂溶液和酒精。在等待时，准备活检仪器。

在提供镇痛时，您想要做的就是使皮肤脱敏。这是因为我们对皮肤和皮下组织有更多的神经内向，在腹皮瘤中，我们真的只是在谈论拉伸受体，这些受体不像皮肤和皮下组织那样感到手术疼痛。事实上，如果你最终把局部麻醉剂通过到肠胃，你可能会增加你的出血的风险，在程序。

处理活检工具和切口时使用无菌技术。洗手以清除所有可见的污染，并戴上无菌手术手套。按照使用顺序在无菌区安排手术器械。

有一个10号手术刀，无菌纱布，并组装活检仪器和无菌毛巾平衡。程序一，核心活检仪。使用手术手套组装核心活检仪。

将七块无菌片放在无菌窗帘上。将刀片插入第 2 件的坞站系统中。将第三件插入第二件，确保坞站对齐。

将铲刀的最终边缘接合到四片的对接系统中。向前推第四件并观察第四件是否位于第三件旁边。在设备上插入第 5 件。

确保坞站对齐。将第 6 件插入第 2 件的顶部。确保坞站对齐。

将锁定螺钉插入坞站。向前推第三件以盖住锁定螺钉。激活工具，向前推第 4 件并观察工具外部的铲刀。

将四件回拉以将刀片缩回工具中。确保奶牛有足够的静静和活检点有足够的麻醉，捏皮，以确保没有反应。使用数字 10 手术刀，通过皮肤和皮下组织进行两到三厘米的垂直切口。

使用无菌技术将活检仪器连接到无绳钻头。将钻头放在活检工具上，并检查钻头是否牢固地连接到钻头上。在所有程序中，让个人抬起尾部，确保适当的约束。

使用顺时针旋转和低速打开钻头。在工具旋转时，通过切口将整个活检工具推进到操作器中约 7.5 厘米。关闭钻头并手动延长工具的四件，使用顺时针旋转和低速打开钻头，从乳房上拆下包含组织芯的仪器。

使用无菌毛巾立即对伤口施加强压至少 20 分钟。将管插入组织。向前推件以激活工具。

顺时针旋转缓慢。组织样本现在在管内。使用钳子从活检工具上取出组织。

将样品留在一个X磷酸盐缓冲盐水中，并评估组织量。活检后每10分钟服用一次牛的生命体征，至少30分钟。检查活检现场20分钟后有没有出血。

如果有滴血，继续施加压力5至10分钟。在停止所有出血后，使用不锈钢订书针以五毫米间隔关闭切口。在活检区域涂抹气溶胶绷带。

观察动物50分钟后的程序。程序二，针活检仪。按照制造商的说明操作设备。

使用无菌技术从包装上取出活检针。如果发现任何损坏，请丢弃针头。将针头连接到设备。

关闭盖并竖起设备。确保奶牛有足够的静静和活检点有足够的麻醉，捏皮，以确保没有反应。使用编号 10 手术刀，通过皮肤和皮下组织进行一到两厘米的垂直切口。

将活检针插入切口部位，距离皮肤约 10 至 13 厘米。激活活检针设备以收集组织。从 udd 上取下针头。

使用无菌毛巾立即对伤口施加强压至少 20 分钟。从针头上取出组织后，按照前面所述程序关闭切口。整个过程需要大约45分钟完成，每个动物。

血块需要从季度活检中去除。此外，有必要观察牛奶产量和食物摄入量，如果可能的话。在手术之前、期间和之后，始终确保动物的健康和福祉。

记录所有给动物服用的药物。在活检后7至10天内检查牛奶中是否存在血液。在随后的挤奶过程中，从活检区手带血块，确保完全去除牛奶。

观察牛奶产量，如果可能，单个每日进给量，直到手术主食被切除。每天两次监测动物的体温、呼吸和心率以及举止，直到手术主食被切除。每天检查活检部位是否有肿胀、柔情和任何排水迹象，直到手术钉被取出。

如果观察到这些，请咨询兽医。活检后10至14天，根据愈合率，从切口部位取出订书针。如果发现任何局部或全身感染的迹象，请咨询兽医。

所以，一旦进行活检，你中断了血液，因此对组织的营养和氧气供应中断了，因此，如果你不是很快地去除组织核心，并以某种方式停止组织活动，那么在实验室后期可能测量的浓度可能无法真正反映活检时该动物所发生的东西。通常，我们会迅速去除组织，并闪冻结在液氮中，试图保持这种活性。另一件事，一个人可以做的，组织，这实际上是我们做的组织，我们收集的，是一个人可以分离和生长的细胞存在于培养系统中的组织。

在我们的案例中，我们对组织内的上皮细胞感兴趣，因为这些细胞实际上是合成和分泌牛奶成分的细胞，因此，这些细胞从这些组织片段被放置在培养中，实际上，它们今天仍在生长。在手术后10天内，每天观察两次动物。手术期间或术后期间未发生并发症，奶牛的重要参数仍为正常限度。

线性模型显示，在活检前10天，这些动物每天生产23.35公斤牛奶。从活检前的10天到10天后，这些动物的产奶量没有显著变化。牛乳腺活检是一种微创手术，允许动物有一个较短的恢复时间。

因此，这种活检程序可用于许多营养试验和其他类型的试验，我们可以对动物使用重复措施，例如，如果我们有四个时期与四个不同的营养治疗，我们可以轻松地活检这些奶牛四个不同的时间在每个时期结束时，允许可能一个星期的休息时间之间的每个时期，以确保动物恢复正常生产。