Bioengineering
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用利穆鲁布莱巴细胞裂解液 (lal) 法检测纳米配方中的内毒素
Summary January 30th, 2019
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工程纳米材料中内毒素的检测是纳米医学领域面临的重大挑战之一。在这里, 我们提出了一个案例研究, 描述了由三种不同的 lal 格式组成的框架, 以估计纳米颗粒中潜在的内毒素污染。
Transcript
该方法有助于医学界对纳米药物的安全性进行解答。该技术的优点是它是标准的，并用于全球范围内的产品，To nano药物的评估。演示的程序，将是巴里纽恩，在纳米技术特征实验室。
对于校准标准制备，请使用 900 微升的石灰细胞解质或 LAL 级水。和100微升控制标准内毒素，准备尽可能多的中间稀释所需的，使准备校准标准与浓度一个内毒素单位每毫升。然后使用900微升LAL级水，以及100微升的一个内毒素单位每毫升校准标准，准备第二个校准标准，浓度为0.1内毒素单位每毫升。
然后重复连续十倍稀释，以准备两个较低的校准标准。获得总共四个校准标准，范围从每毫升0001到一个内毒素单位。为了准备每毫升05内毒素单位质量控制，将每毫升控制标准内毒素溶液中一个内毒素单元的50微升与950微升的LAL级水相结合。
接下来在软件中选择仪器设置，然后创建模板。选择收集数据，并在常规选项卡中输入测试 ID 和数据组。在硬件选项卡下，选择仪器类型和 LAL 方法，并验证屏幕上是否显示序列号、系统 ID 和串行端口信息。
单击"确定"两次以确认仪器的选择和与仪器的通信，然后以与样品测试相同的顺序输入样本 ID。然后使用默认按钮输入负控制标准曲线，并测试示例。将适当体积的负控制校准标准添加到重复的预标记玻璃管中。
并将适当的 LAL 卷添加到第一次测试中。短暂地旋转，将小瓶放入仪器旋转木马中的适当测试槽中。在装载样品之前，在最大有效稀释范围内对测试纳米材料进行多次稀释，如所证明的。
为了准备每毫升抑制增强控制05内毒素单位，将每毫升控制标准内毒素溶液中一个内毒素单元的25微升与475微升的测试纳米材料在给定的稀释中结合。涡旋后，将适当的创新增强控制装置和未皮的学习样品加载到仪器中。然后等分解解，在特定稀释时将尖峰纳米材料稀释成预标记管。
在涡旋之前，并加载到仪器旋转木马中。要执行Gel-Clot LAL，将控制标准内毒素制备为四个 lambda 的最终浓度，并将 100 微升标准，与 100 微升水相结合，或测试样品，以达到最终浓度控制标准内毒素二 lambda。在每个羊肉稀释中加入100微升的Lysine。
短暂地旋转管子，将管子架放入37摄氏度的水浴中一小时。在孵化结束时，用平滑运动反转管子，并使用加号手动记录结果，用于坚定的血块，减去无血块或松动的血块。在这项具有代表性的分析中，PEGylated脂质体多索鲁比辛在稀释五时干扰了色原LAL，然而这种干扰在高稀释时被克服。
当配方在浊度和色度LAL的稀释液50和500中测试，以及在浊度LAL的稀释5中测试时，尖峰回收率在50%至200%之间。当根据稀释系数调整时，结果在两篇文章中的错觉之间是一致的。此外，结果在三种论文格式之间是一致的。
请记住，每个样品都有自己的稀释范围，每种LAL格式使用其控制标准在多辛和利盐，以及管用于准备稀释，并执行不同的反应，每LAL论文。对于这个程序，其他方法，如可以执行，以回答有关材料的其他问题后，它的发展，这项技术铺平了道路的缝合线和纳米医学领域，探索纳米技术配方药物在人类的医学应用，和临床模型，包括但不限于非人类灵长类动物，兔子，狗和大鼠。不要忘记，使用多辛可能非常危险，在执行此程序时应始终采取佩戴个人防护装备等预防措施。
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