أسلوب انسداد الشريان الدماغي الأوسط للحث علي الاكتئاب بعد السكتة الدماغية في الفئران

يقترح بروتوكولنا تقنية جديدة ل انسداد الشريان الدماغي في الفئران للمساعدة في دراسة آلية تطور الاكتئاب بعد السكتة الدماغية وإيجاد علاج أكثر كفاءة. الميزة الرئيسية لتقنيتنا هي قدرتها على الحد من التباين في تغيرات الوزن ، وذمة الدماغ ، وحجم الاحفار ، وتقليل الوفيات المرتبطة بالإجراءات. بعد التأكد من عدم وجود استجابة لقرصة الذيل في الذكور 300 إلى 350 غرام Sprague داولي الفئران، ووضع الحيوان على لوحة التدفئة 37 درجة مئوية واستخدام مسبار المستقيم لرصد درجة حرارة الجسم الأساسية.

ضع مرهم على عيون الحيوان وحلق الشعر من الرقبة. ثم، وتطهير الجلد المكشوف مع 70 في المئة من الكحول الكلورهيكسيدين، وتغطية الفئران مع الستائر الجراحية العقيمة قبل إجراء الانسداد وفقا للتقنيات القياسية. للحصول على درجة الخطورة العصبية، ضع فأرًا مُكدَّسًا على سطح مستوٍ ويسمح للحيوان بالتحرك بحرية.

بعد دقيقة واحدة، سحب بلطف الجرذ إلى الوراء من قبل الذيل والدرجة استجابة مشية الحيوان. لقياس حجم infarct، مسح شرائح الدماغ الملون المعدة في 1، 600 في 1، 600 نقطة لكل قرار بوصة والمحاصيل وتوحيد مقياس لجميع الصور. ثم، تحميل الصور الموحدة في برنامج تحليل الصور المناسبة واستخدام أداة تتبع لقياس منطقة شحوب ملحوظ في ست شرائح متتالية اثنين ملليمتر لتحديد حجم infarct كنسبة مئوية من شريحة الدماغ كله.

30 إلى 33 يوما بعد الجراحة، ونقل الحيوانات إلى غرفة مغلقة وهادئة، والضوء التي تسيطر عليها في أقفاص فردية، ووضع زجاجة تحتوي على 100 ملليلتر من 1٪ محلول السكروز في كل قفص لمدة 24 ساعة. في اليوم التالي، قم بإزالة الزجاجات وكذلك الطعام ومياه الشرب لمدة 12 ساعة. في نهاية فترة الحرمان، ضع زجاجة واحدة تحتوي على 100 ملليلتر من محلول السكروز بنسبة 1٪وزجاجة واحدة تحتوي على 100 ملليلتر من ماء الصنبور في كل قفص لمدة أربع ساعات.

ثم، تسجيل حجم محلول السكروز والمياه المستهلكة للسماح بحساب التقارب لتفضيل السكروز لكل. بالنسبة لاختبار السباحة القسرية الذي يجريه بورسولت، بعد 30 إلى 33 يومًا من الجراحة، ضع أول مكان لكل فأر في أسطوانة زجاج شبكي عمودية تحتوي على 80 سنتيمترًا من 25 درجة مئوية من الماء لمدة 15 دقيقة. في نهاية فترة التعود ، اسمح للجرذ أن يجف لمدة 15 دقيقة في الضميمة الساخنة عند 32 درجة مئوية قبل إعادة الحيوان إلى قفصه المنزلي.

في اليوم التالي، أعد الفأر إلى الأسطوانة لمدة خمس دقائق أخيرة، مسجلاً الاختبار الذي مدته خمس دقائق للسماح بحساب المدة الإجمالية للجمود خلال تلك الفترة. ويكشف التحليل النسيجي عن حجم هام إحصائياً كحفارة كنسبة مئوية من إجمالي حجم الدماغ بعد MCAO بالمقارنة مع الحيوانات في مجموعة التحكم الصورية. كما لوحظت وذمة الدماغ ذات الأهمية الإحصائية في الحيوانات التجريبية مقارنة بمجموعة التحكم الصورية.

تظهر MCAO أداءً عصبيًا أقل مقارنة بالحيوانات التي تعمل بالروك في 50 دقيقة و24 ساعة وسبعة أيام بعد الجراحة. كما تستهلك فئران MCAO كمية أقل بكثير من السكروز وتظهر جمودًا أطول خلال اختبارات السباحة القسرية في بورسالت مقارنة بالحيوانات التي تعمل بالعار. هذا هو نموذج مهم لدراسات السكتة الدماغية السلوكية ويمكن أن تكون بمثابة أداة لتقييم العلاجات في المستقبل أو توفير بيانات قبل الظهر الحرجة حول فعالية المواد العلاجية.