Behavior
A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 2 minutes.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Средней мозговой артерии окклюзии техника для стимулирования после инсульта депрессия у крыс
Chapters
Summary May 22nd, 2019
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Здесь мы представляем протокол, чтобы вызвать депрессию после инсульта у крыс путем окзакудинг средней мозговой артерии через внутреннюю сонную артерию. Мы используем Porsolt вынуждены плавать тест и тест сахарозы предпочтение для подтверждения и оценки индуцированных депрессивных настроений.
Transcript
Наш протокол предлагает новый метод окклюзии медиальной мозговой артерии у крыс, чтобы помочь изучить механизм развития после инсульта депрессии и найти более эффективную терапию. Основным преимуществом нашей техники является ее способность уменьшать изменчивость в изменениях веса, отеке мозга и инфаркте, а также минимизировать связанные с процедурой смерти. После подтверждения отсутствия ответа на щепотку хвоста у самца 300-350-граммовой крысы Спраг Доули поместите животное на 37 градусов по Цельсию нагревательной пластины и использовать ректальный зонд для мониторинга температуры тела ядра.
Нанесите мазь на глаза животного и побрите волосы с шеи. Затем дезинфицировать открытые кожи с 70 процентов алкоголя хлоргексидин, и покрыть крысу стерильной хирургической драпировки перед выполнением окклюзии в соответствии со стандартными методами. Чтобы получить неврологический балл тяжести, поместите occluded крысы на плоскую поверхность и позволяют животному свободно передвигаться.
Через минуту осторожно потяните крысу назад за хвост и оклассимите реакцию животного на походку. Чтобы измерить объем инфаркта, сканируйте подготовленные окрашенные ломтики мозга по 1600 на 1600 точек на дюйм и обрежьте и стандартизируйте шкалу для всех изображений. Затем загрузите стандартизированные изображения в соответствующую программу анализа изображений и используйте инструмент отслеживания для измерения области отмеченной бледности шестью последовательными двухмиллиметровыми ломтиками, чтобы определить размер инфаркта в процентах от всего среза мозга.
Через 30-33 дня после операции перенесите животных в закрытую, тихую, светоухозную комнату в отдельных клетках и поместите бутылку, содержащую 100 миллилитров раствора 1% сахарозы, в каждую клетку в течение 24 часов. На следующий день, удалить бутылки, а также пищу и питьевую воду в течение 12 часов. В конце периода лишения поместите одну бутылку, содержащую 100 миллилитров раствора 1% сахарозы и одну бутылку, содержащую 100 миллилитров водопроводной воды в каждую клетку в течение четырех часов.
Затем завещайте объем раствора сахарозы и потребляемой воды, чтобы вычислить сродство к предпочтениям сахарозы для каждого животного. Для принудительного плавания тест Porsolt, от 30 до 33 дней после операции, первое место каждой крысы в вертикальном плексигласа цилиндр, содержащий 80 сантиметров 25 градусов по Цельсию воды в течение 15 минут. В конце периода привыкания, дайте крысе высохнуть в течение 15 минут в нагретом корпусе при 32 градусах по Цельсию, прежде чем вернуть животное в свою домашнюю клетку.
На следующий день верните крысу в цилиндр в течение последних пяти минут, записав пятиминутный тест, позволяющий вычислить общую продолжительность неподвижности в течение этого периода. Гистологический анализ показывает статистически значимый объем инфаркта в процентах от общего объема мозга после MCAO по сравнению с животными в группе фиктивного контроля. Статистически значимый отек мозга также наблюдается у экспериментальных животных по сравнению с группой контроля обмана.
MCAO животные демонстрируют более низкие неврологические показатели по сравнению с фиктивных животных на 50 минут, 24 часов и семь дней после операции. Крысы MCAO также потребляют значительно меньшее количество сахарозы и проявляют более длинную неподвижность во время испытаний принудительного плавания Porsalt по сравнению с фиктивными животными. Это важная модель для поведенческих исследований инсульта и может служить инструментом для оценки будущих методов лечения или предоставления критических доклинических данных об эффективности терапевтических веществ.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.