Behavior
A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 20 seconds.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Een gedrags testbatterij voor de herhaalde beoordeling van motorische vaardigheden, humeur en cognitie bij muizen
Summary March 2nd, 2019
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Een uitgebreide gedrags testbatterij van motorische vaardigheden, stemming — met inbegrip van sociale interactie, depressie en angst — en cognitie is ontworpen voor de herhaalde beoordeling van neurodegeneratie-gerelateerde gedragsveranderingen bij muizen.
Transcript
Neurodegeneratieve ziekte manifesteert zich vaak met verwoestende gedragssymptomen, zoals cognitieve stoornissen, stemmingsstoornissen, of zelfs motorische disfuncties. Deze studie maakt het mogelijk een gedragsfenotypes nauwkeurig te beoordelen met een hoog niveau van herhaalbaarheid. We ontwerpen een uitgebreide batterij die herhaaldelijk kan worden gebruikt bij gedragsanalyse bij muizen.
Deze test asses motorische functies, sociale interactie, emotionele functie, en cognitieve functie. Door het organiseren van de volgorde en het interval van tests in deze batterij, verhoogden we de testefficiëntie en verminderden we de interferentie tussen tests en de stress op muizen door frequente behandeling. Om te beginnen, schik de gedragstest in de volgorde beschreven in het tekstprotocol.
Voer de open veldtest uit in een niet-transparante, witte, plastic arena. Start de camera-opname, en zet voorzichtig de muis naast het midden van een muur van de arena, met uitzicht op de muur. Neem het gedrag van de muis gedurende 10 minuten op en breng hem terug naar zijn thuiskooi.
Verdeel vervolgens de arena in vier door vier vierkanten op het computerscherm. Tel het aantal keren dat de muis de rasterlijnen in de arena kruist om de motorische functie te beoordelen. Om angst te meten, meet de hoeveelheid tijd die de muis doorbrengt in het centrale gebied van de arena.
Voer de verhoogde plus doolhof test op dezelfde dag. Zodra alle muizen klaar zijn met de open veldtest, plaatst u de muis op de kruising van de open en gesloten armen. Neem het gedrag van de muis gedurende vijf minuten op voordat u de muis terugbreedt naar zijn thuiskooi.
Na twee opeenvolgende dagen van open veldtest, stel je de nieuwe objectherkenningstest in volgens het tekstprotocol. Start de camera en plaats de muis in de arena, met uitzicht op het midden van de muur, om de muis vertrouwd te maken. Neem het gedrag van de muis gedurende 10 minuten op.
Breng de muis vervolgens terug naar zijn thuiskooi. Herhaal de test 24 uur na de vertrouwdheid met één nieuw object. Meet de tijd dat de muis afzonderlijk met een nieuw object en een vertrouwd object werkt.
Bereken vervolgens het geheugen van de muis als de voorkeur aan het nieuwe object. Voor de sociale interactietest gebruikt u een open veldarena met twee transparante kamers met gaten op het oppervlak. Plaats het onderwerp muis in de arena voor een drie minuten objecten exploratie periode om de muis gewend aan de kamers.
Breng vervolgens de onderwerpmuis terug naar zijn thuiskooi en maak de arena schoon. Zet een nieuwe muis in een van de kamers. Vervolgens herintroduceren van het onderwerp muis naar de arena en opnemen voor drie minuten.
Tijdens het bekijken van de video, meet sociale interactie door het meten van de verhouding van de tijd van het onderwerp muis besteedt interactie met de nieuwe muiskamer of de lege kamer. Vervolgens de versnelde rotarod test uit te voeren. Plaats in elke proef de muis op de statische staaf tegenover de muur tegenover de machine.
Gewenning de muizen aan de rotarod door het gedurende drie dagen in de naïeve muizen te trainen vóór het begin van mogelijke symptomen, zodat de muis evenzeer de schaal leert. Stop het apparaat wanneer de muis valt en neem de tijd op die de muis aan de staaf heeft doorgebracht. Herhaal dit proces nog twee keer voordat u de muis terug naar zijn thuiskooi.
Vervolgens zet het water doolhof in het midden van een gedragsruimte, en markeer de positie van het doolhof om ervoor te zorgen dat de positie van het water doolhof constant blijft. Verdeel het doolhof in vier denkbeeldige kwadranten. Hang visuele aanwijzingen op in het midden van elk kwadrant.
Plaats dan een platform in het midden van het vierde kwadrant en markeer de locatie. Vul het doolhof met water, wit gekleurd met melkpoeder, totdat het waterniveau een centimeter hoger is dan het platform. Aan het begin van elke trainingsproef start u de video-opname en zet u de muis voorzichtig in het doolhof.
Blijf uit het zicht van de muis. Breng de muis terug naar zijn thuiskooi wanneer de muis het platform niet binnen 60 seconden kan lokaliseren of als de muis het platform binnen 60 seconden lokaliseert en 10 seconden blijft. Nadat de test voorbij is, stop de video en zet de muis in zijn thuiskooi onder een infraroodlicht.
Ten slotte voeren de sonde fase van het water doolhof test zoals eerder beschreven, zonder het platform. Bereid vervolgens de cilindrische tank voor op de geforceerde zwemtest. Start de video-opname en zet de muis voorzichtig in het water in het midden van de tank.
Neem de muis zes minuten op voordat je de muis terug in zijn thuiskooi zet. Bekijk de video van de geforceerde zwemtest. Meet de immobiliteitstijd in de laatste vijf minuten van de video.
Dit protocol was om gedragsveranderingen bij muizen te bestuderen na blootstelling aan silica nanodeeltjes. De resultaten in de open veldtest en de versnellende rotarodtest toonden aan dat silica nanodeeltjes geen invloed hadden op de motorische of motorische functie bij muizen. Sociale interactie activiteit werd beïnvloed na een maand blootstelling aan silica nanodeeltjes, maar de open veld test, verhoogde plus doolhof test, en de gedwongen zwemtest niet aangegeven enige angst of depressie na een maand van blootstelling.
Een blootstelling van twee maanden aan silica nanodeeltjes resulteerde in angst, zoals blijkt uit de resultaten van de verhoogde plus doolhof test. Cognitieve stoornissen werd ook gedetecteerd in het water doolhof test na twee maanden van blootstelling. Deze batterij is ontworpen voor de uitgebreide gedragsanalyse in neurodegeneratie in de C57 muisstam.
Het is het meest geschikt voor neurodegeneratie-gerelateerde longitudinale studies in toxiciteit van neurotoxine of potentiële risicofactoren, of ontwikkeling van geneesmiddelen, die vaak beschikt over langdurige toediening en herhaalde testen.
Please enter your institutional email to check if you have access to this content
has access to
BackLogin to access JoVE
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
To receive a free trial, please fill out the form below.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You
Thank You
Thank You
CH
DE