Journal
/
Genetics
/
Edição do genoma em linhas de células de mamíferos usando CRISPR-Cas
JoVE Journal
Genetics
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Genetics
Genome Editing in Mammalian Cell Lines using CRISPR-Cas

Edição do genoma em linhas de células de mamíferos usando CRISPR-Cas

DOI:
10.3791/59086-v

•

07:56 min

•

April 11, 2019

•

, , ,
1Genome Institute of Singapore,Agency for Science Technology and Research, 2School of Chemical and Biomedical Engineering,Nanyang Technological University

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:18Cell Passaging
  • 01:08Cell Transfection
  • 01:47Transfected Cell Fluorescence Activated Cell Sorting (FACS)
  • 02:32Individual Clone Expansion and Editing Efficiency Evaluation
  • 06:09Results: Representative Gene Editing Efficiency Analyses
  • 07:24Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

CRISPR-Cas é uma tecnologia poderosa para projetar os genomas complexos de plantas e animais. Aqui, detalhamos um protocolo eficiente editar o genoma humano usando diferentes endonucleases de Cas. Destacamos importantes considerações e parâmetros de projeto para otimizar a eficiência de edição.

Tags

CRISPR-Cas9Genome EditingMammalian Cell LinesKnock-outKnock-inCell PassagingTrypsin-EDTATransfectionFACSFluorescent MarkerCell Culture MediumGenomic DNA Extraction

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Determinação do genoma de sincronismo Replication Mammalian por DNA Medição conteúdo

Mapeando as Interações RNA-ARN Globalmente Usando Psoraleno Biotinilado

Imunoprecipitação de cromatina (ChIP) em linhas de células T de mouse

Maior genoma edição com Cas9 Ribonucleoprotein em diversas células e organismos

Dissecação do Enhancer função usando interferência Multiplex Enhancer CRISPR-baseado em linhas de células

Mediada por CRISPR genoma edição do patógeno humano fungo Candida albicans

Transformação, edição do genoma e fenotipagem do nitrogênio-fixação tropical Cannabaceae Tree Parasponia andersonii

Identificação do receptor de superfície celular usando telas genéticas CRISPR/Cas9 em escala de genoma

Introduzindo mutações pontuais em células-tronco pluripotentes humanas usando edição de genoma contínua

Edição de genoma mediado por CRISPR-Cas9 no Filamentous Ascomycete Huntiella omanensis

Read Article