Neuroscience
A subscription to JoVE is required to view this content.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Evaluatie van halfrond lateralisatie met bilaterale lokale veld potentiële opname in de secundaire motorische cortex van muizen
Chapters
Summary
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
We presenteren in vivo elektrofysiologische opname van het lokale veld potentieel (LFP) in bilaterale secundaire motor cortex (m2) van muizen, die kan worden toegepast om de halfrond lateralisatie te evalueren. De studie onthulde veranderde niveaus van synchronisatie tussen de linker en rechter m2 in APP/PS1 muizen in vergelijking met WT besturingselementen.
Transcript
Deze techniek kan worden gebruikt om een aantal basiseigenschappen van interregionale elektrofysiologie te beoordelen voor hemisfeer lateralisatie, evenals de connectiviteit, directionaliteit en koppeling. Elektrofysiologische meting is een gevoelige en effectieve methode om te evalueren bij de dieren, neuronale activiteiten. Dit protocol biedt een betere manier om prop in de synchronisatie van elektrische signalen.
Het begrip van het onderliggende mechanisme van mogelijke veranderde herseneeneralisatie bij de ziekte van Alzheimer pathogenese, kan nieuwe inzichten bieden in potentiële biomarkers voor de behandeling van Alzheimer. Voorafgaand aan de operatie, bevestig de diepte van de anesthesie van de muis, door het uitvoeren van een staart of teen snuifje met tangen. Plaats vervolgens de muis in het stereotaxic-apparaat en bevestig het hoofd.
Breng zalf op beide ogen om ze vochtig te houden. Scheer vervolgens het hoofd en steriliseer het gebied. Maak een kleine incisie van 12 tot 15 millimeter, in het midden van het geschoren gebied.
Met behulp van tangen, trek voorzichtig de hoofdhuid uit de buurt van de middellijn. Scheid daarna de huid voorzichtig en verwijder het resterende weefsel. Maak de schedel schoon met behulp van met waterstofperoxide gecoate wattenstaafjes.
Boor onder een stereomicroscoop twee kleine gaatjes van één tot 1,5 millimeter radii, zowel aan de linker- als rechterkant van de schedel, zodat de opnamemicro-elektroden in de M2-gebieden kunnen worden geplaatst. Verwijder de dura mater voorzichtig met een wolfraamnaald. Steek vervolgens twee afzonderlijke opnamemicro-elektroden, gevuld met 0,5 molaire natriumchloride, in de gaten, onder een hoek van 60 graden, met behulp van mechanische micromanipulatoren.
Voor LFP-opname, langzaam lager de linker en rechter glazen elektroden naar de M2 coördinaten. Voor kwaliteitscontrole test u de weerstand van elke elektrode met behulp van de differentiële versterker. Stel vervolgens het opnameproces in op 0,1 hertz high pass en 1000 hertz low pass, met 1000 keer versterking.
Verzamel de gedigitaliseerde ruwe LFP-gegevens in stabiele toestand gedurende ten minste 60 seconden, terwijl de muis gelijkmatig ademt bij twee ademhalingen per seconde, onder narcose. Na het opnemen, langzaam verhogen van de elektroden uit de hersenen. Sla de gegevens op en analyseer offline, met de analysesoftware.
Als u crosscorrelatieanalyse wilt uitvoeren, klikt u in de analysesoftware op analyse, vervolgens op een correlatie in golfvorm en importeert u de gegevens. Wijs vervolgens het ene golfvormkanaalsignaal toe als het eerste kanaal en het andere als referentie. Stel de breedte in op twee en verschoven als één.
Stel vervolgens de duur van beide NCP's in op 100 seconden, door de begin- en eindtijd te selecteren. Druk vervolgens op de procesknop om crosscorrelatieanalyse uit te voeren. Klik op bestand, exporteer als en sla vervolgens de crosscorrelatieresultaten op die overeenkomen met de resulterende pop-updiagram in tekstnotatie.
Verwijder daarna de correlatiewaarden bij vertragingen die op nul plus en min 01 seconde zijn uitgekomen en vervolgens de rest van de cross-correlatiegegevens behandelen. Voer de gegevens uit in de analysesoftware om coherentieanalyse uit te voeren. Schik vervolgens de twee LFP-signalen als de eerste en tweede golfvormkanalen en stel de grootte van het blok in op 4096.
Blokgrootte betekent het aantal gegevenspunten dat in de eerste voor echte transformatie wordt gebruikt. Hoe groter de blokgrootte, hoe beter de frequentieresolutie. Verplaats de stippellijnen handmatig, om ervoor te zorgen dat de tijdsauwkeurigheid voor signalen in beide kanalen wordt ingesteld als dezelfde periode.
Druk op de knop Gebied toevoegen om het gebied te laden en coherentieanalyse uit te voeren. Klik daarna op bestand en sla als, om de coherentieresultaten op te slaan die overeenkomen met de resulterende pop-updiagram in tekstnotatie. Om te zien of vroege ziekte van Alzheimer pathologie schaadt de capaciteit van halfrond lateralisatie, extracellulaire LFPs werden opgenomen in de linker en rechter M2 van APP / PS1 muizen en wilde type controles, en hun kruis correlatie werd geanalyseerd.
Bij wilde typemuizen toonden de resultaten aan dat de gemiddelde correlatie tussen de linker- en rechter-VIP's bij positieve tijdvertragingen aanzienlijk verschilde van die bij negatieve vertragingen, wat het bestaan van hemisferische asymmetrieën in de M2-gebieden van de wildtypecontroles impliceert. In vergelijking, de linker en rechter LFPs van APP / PS1 muizen toonde hoger gesynchroniseerd in het tijddomein, wat wijst op een vermindering van de asymmetrie tussen de linker en rechter M2. Gammaschommelingen werden vervolgens gefilterd uit de LPP's en er werd een coherentieanalyse uitgevoerd om de gelijkenis van elektrische signalen in het gammafrequentiebereik te meten. Het resultaat toonde aan dat de gammacoherentie tussen de linker en rechter M2 in APP/PS1 muizen aanzienlijk hoger was dan die in de wild type muizen, wat duidt op een hogere synchronisatie, en dus verminderde lateralisatie tussen de linker en rechter M2 in APP/PS1 muizen.
Urethaan is giftig en kankerverwekkend, dus wees altijd voorzichtig, en volg de veiligheidsvoorschriften bij het hanteren ervan. Het is erg belangrijk om de diepte van anesthesie per uur te testen, om ervoor te zorgen dat stabiele VIP's worden geregistreerd. Het opname- en analyseproces kan worden toegepast op andere hersenbanen, vooral voor laboratoria die geen systemen hebben voor multi-channel opname bij vrij bewegende dieren.
Tags
Neuroscience probleem 149 de ziekte van Alzheimer lateralisatie in vivo elektrofysiologie secundaire motorische cortex lokaal veld potentieel synchronisatieRelated Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.
