Kütle spektrometresi (IMS) görüntüleme en iyi duruma getirilmiş üç yaygın olarak kullanılan uygulamalarda moleküler özelliklerinin mekansal dağılımı niteleyen: dokusu dilimlerin, pulcuklarının ve mikrobiyal kolonileri1,2,3. Dokusu dilimlerin metabolitleri, hedeflenen ya da belirli bir kitle aralığı içinde hedefsiz bir ev sahibi, biyolojik koşullar bağlamında lokalizasyonu değerlendirmek için kullanılabilir. Ancak, bir sağlıklı doku hastalıklı bir durum, örneğin, bir tümör karşılaştırıldığında moleküler özellikleri arasındaki farklar en önemli ve açık vardır. Bu IMS yaklaşım özellikle hastalık biyolojik tespiti için adapte, ancak, hastalık ilerleme (tümör notlar gibi) farklı aşamalarında doku örnekleri alınıyor kabul töreni için önemli olabilir sinyalleri tanımlaması engellemektedir hastalık. Uzayda bilgi alışverişi birçok biyolojik sistemleri her yerde bulunan bir özelliktir ve dokusu dilimlerin dinamik bu kimyasal aktarma yakalamak değildir. Kimyasal değişimi ve Difüzyon görselleştirme kapasitesine sahip bir mikrobiyal kolonileri Ağar kaplamalar üzerinde yetiştirilen IMS tekniktir; küçük moleküller aracılığıyla ve agar genelinde yaygın edebiliyoruz ve matris yardımlı lazer desorpsiyon/iyonlaşma (MALDI-TOF) kütle spektrometresi4yolu ile yakalanabilir. Bu büyüme Kur ayrı biyolojik varlıklar (kolonileri) arasında değiş tokuş molekülleri tanımlamak için kullanılan ve yön metaboliti üretim öğeleri de belirleyebilirsiniz. Mikrobiyal koloni büyüme için tasarlanan platformu doku explants memeli hücreleri ile yetiştirilen birincil metabolizma keşfetmek için adapte oldu ve IMS dinamik kimyasal değişimi tüp bebek bir memeli sisteminde değerlendirmek için kullanıldı.

Son birkaç yıl içinde yüksek dereceli seröz over kanseri (HGSOC) kez fallopian tüp epitel (FTE) kaynaklanan ve yumurtalık için erken hastalığı geliştirme5,6sırasında, metastaz açık hale gelmiştir 7 , 8. tumorigenic FTE nerede büyük tümör sonunda oluşturmak ve daha fazla metastaz, yumurtalık yayılmasına hücreleri nedeni şu anda belli değil. Önceki araştırma yumurtalık için birincil metastaz yumurtalık proteinlerin rolü üzerinde odaklanmıştır; Ancak, bu son zamanlarda tumorigenic bir doku için sağlıklı bir geçiş hücre metabolizması büyük bozulma sonuçları ve üretim küçük moleküller9,10,11değiştirir kanıtlanmıştır. Bu nedenle, biz olan küçük moleküller FTE yumurtalık arasında değiş tokuş kısmen HGSOC birincil metastaz için sorumlu olabilir.

Bizim yeni geliştirilen IMS işlemi uygulayarak, biz coculture tumorigenic FTE ve sağlıklı yumurtalık dokusu yumurtalık üzerinden norepinefrin üretimini indükler belirledik. Ancak, diğer hücre tipleri veya normal FTE hücreleri bu etkiyi temin değil. Bu yöntem olağanüstü bir avantajı nedir Moleküler üretim ve Satım gerçek moleküller temsil sinyallerin görselleştirildiği, bu yüzden bile bir coculture bir sinyalin kaynağını saptamak mümkündür. Bu analiz homojenize örnekleri, üzerinde bir avantaj nerede bütün mekansal bilgi kaybolur. Modeli sistemimizde açıkça norepinephrine üretimi için yumurtalık atamak başardık. Metastaz ve yumurtalık kanserlerinin chemoresistance norepinefrin bağlantılı ve bu molekül bizim tespiti roman IMS yöntemi biyolojik ilgili molekülleri12,13, ortaya çıkarabilir geçerliliği 14. bu doğrulama IMS bu yeni uygulama coculture ortamlarda küçük moleküller tanıtmakta ve hücre dönüşüm etkisi erken olayları anlamaya çalışıyorsunuz gruplar araştırma özellikle yararlı olabilir teklif izin veriyor ve metastaz. Bu yöntem genel kimlik ve küçük moleküller kayma dağılımını doku ve organları, vitro 3D hücre kültürleri veya ex vivo dokusu tarafından temsil edilen arasında değişim sırasında aydınlatmak için hedeftir.

Protokolümüz hücreler ve dokular arasındaki küçük moleküllü kimyasal iletişimi haritalayabilir ve bunu özellikle yumurtalık kanseri metatezindeki küçük molekülleri keşfetmek için uyguladık. Tekniğimizin en büyük avantajı, küçük molekülleri etiketsiz bir şekilde ölçebilme ve hücrelerin ve dokuların 2Boyutlu uzamsal bütünlüğünü koruyabilme yeteneğidir. Bu teknik bize hedefsiz bir şekilde yumurtalık kanseri metastazküçük moleküllerin katkısını sorgulamak için izin verdi.

Bu daha önce gözden kaçan yeni terapötik hedefler ve yollar ortaya olabilir. Bu metodoloji kolayca agarose ve bir mekansal bileşeni ortaya çıkan hücresel fenotip için önemli olabilir başka bir hastalık yetiştirilebilir diğer kanserler için uzatılabilir. Tüm hücrelerin ve bileşenlerin elde olmasını sağlamak ve kurutma işlemine sabır sağlamak bu protokol için gereklidir.

Acele bir kurutma adımı genellikle düşük kaliteli kütle spektrometresi verilerine yol açabilir. Bu yöntemin görsel gösterimi, agar üzerinde doku veya mikrop kullanan tipik görüntüleme kütle spektrometresi deneylerinden büyük ölçüde saptırDığı için, örnek hazırlama ve kurutma adımlarımızı anlamada yararlıdır. Başlamak için, bir sıcak plaka üzerinde 70 sant