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Un protocollo di stress cronico per indurre comportamenti simili alla depressione nei topi
Chapters
Summary May 15th, 2019
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Questo articolo fornisce un protocollo semplificato e standardizzato per l'induzione del comportamento depressivo in topi cronicamente immobilizzati utilizzando un rimboschimento. Inoltre, vengono spiegati il comportamento e le tecniche fisiologiche per verificare l'induzione della depressione.
Transcript
Inizia impostando la stanza su una luce a 200 lux utilizzando un misuratore lux digitale. Ospitare il mouse in una gabbia separata almeno una settimana prima del test e posizionare il mouse nella sala prove per almeno 30 minuti prima dell'esperimento. Tenere delicatamente la coda del mouse per evitare di tesa il mouse, quindi posizionarlo con cura su una superficie ruvida.
Coprire il trattino con un piccolo asciugamano bianco e quindi posizionare delicatamente il mouse all'apertura del trattino, in modo che il mouse entri volontariamente nel trattenutore. Quindi, posizionare la chiusura per trattenere il mouse il più stretto possibile, facendo attenzione a evitare danni al corpo, come coda, piedi e testicoli. Infine, durante l'esposizione al limitatore, misurare il peso corporeo e l'assunzione di cibo ogni 48 ore.
Prima della prova, abituare i topi alla presenza di due bottiglie da bere, una contenente 0,1 saccarosio molare e l'altra contenente acqua normale per 48 ore. Cambiare le posizioni delle due bottiglie dopo 24 ore per ridurre qualsiasi confusione prodotta da una distorsione laterale. Il terzo giorno privare i topi dell'acqua per 24 ore.
Poi il giorno dell'esperimento esporre i topi a due bottiglie da bere per sei ore. Dopo tre ore, cambiare la posizione delle bottiglie d'acqua. Registrare il volume in millilitri di soluzione di saccarosio e acqua consumata, quindi calcolare l'affinità dell'animale al saccarosio.
Infine, calcolare la preferenza per il saccarosio in percentuale del volume del consumo di saccarosio rispetto al consumo totale di liquidi durante la prova. Inizia portando i topi indotti dallo stress da ritenuta cronica nella sala prove almeno 30 minuti prima di iniziare il test di sospensione della coda. Impostare la luce della stanza in condizioni fioca a 50 lux.
Quindi, posizionare la fotocamera a circa 40 centimetri dal mouse. Sospendere saldamente il mouse dalla barra orizzontale utilizzando del nastro adesivo. Dopo che il mouse è stato posizionato al centro della scatola di sospensione, avviare la registrazione e osservare continuamente le alterazioni comportamentali per sei minuti.
Se il mouse tenta di arrampicarsi sulla coda, usa un bastone o un tappo di salita per impedirlo. Alla fine dell'esperimento spostare il mouse nella gabbia di casa e rimuovere con cura il nastro dalla coda. Infine, utilizza il software di tracciamento video per analizzare il tempo accumulato dei periodi immobili.
I risultati indicano una diminuzione del peso corporeo per il gruppo CIS e una significativa riduzione dell'assunzione di cibo al quarto giorno. Rispetto ai controlli, si è registrato un calo per la preferenza del saccarosio nel gruppo CSI, mentre si è registrato un aumento significativo dei tempi di immobilità e del corticosterone. Inoltre, una glutammina ha integrato la dieta migliora comportamenti depressivi simili, come mostrato per il peso corporeo, l'assunzione di cibo, la preferenza per il saccarosio, l'immobilità e il corticosterone.
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