Please note that all translations are automatically generated.
Denna artikel beskriver utvecklingen av en metod för att inducera akut eller kronisk torra ögon sjukdom hos kaniner genom att injicera concanavalin A till alla delar av orbital lacrimal körtel system. Denna metod, överlägsen dem som redan rapporterats, genererar en reproducerbar, stabil modell av torra ögon som lämpar sig för studier av farmakologiska medel.
Vår metod ger den saknade pålitliga djurmodell av torra ögon sjukdom som kan vara akut eller kronisk tack vare vår metod för att injicera alla lacrimal körtlar och upprepa injektioner. Denna teknik levererar tillförlitligt Concanavalin A till sämre lacrimal körtel med hjälp av ultraljud vägledning till körtlar av allmänt variabla storlekar och upp till överlägsen lacrimal körtel gör denna metod en komplett strategi. Denna modell ger en enkel, optimerad, nonsurgical medel för att inducera vattenbrist torr ögon sjukdom.
Det är väl lämpad att studera läkemedelseffekt och sjukdom patofysiologi. Identifiera bakre incisure och utnyttja ultraljud lokalisering kan vara utmanande i början. Ta bort alla päls är avgörande för att stöd i ultraljud lokalisering för båda dessa steg.
Demonstrera förfarandet kommer att Wei Huang, en doktorand från mitt laboratorium. Efter att ha bekräftat mild sedering genom att observera en avslappnad huvudposition med öringsloberna inte längre helt upprätt, använd en micropipette att tillämpa 25 mikroliter av konserveringsmedel-fri lidokain till första ögat och placera en flexibel tråd lock spekulum mellan ögonlocken. Med hjälp av 0,3-forceps, ta tag i nictating membranet vid dess spets och förlänga den över hornhinnan.
Med hjälp av en 26 gauge vass nål, injicera lidokain 1%med 1:100, 000: e epinefrin subkonctivally i basen av nictating membranet. En måttlig bleb bör bildas över membranet. Ta sedan bort speculum och gör en identisk injektion i den vänstra nictating membran.
Efter cirka fem minuter, placera locket speculum tillbaka i medögat och använda 0,3 forceps att dra tillbaka nictating membranet vid dess spets. Med hjälp av Westcott sax, skär nictating membranet av vid basen och ta bort spekulum. Placera sedan aktuell antibiotisk salva på ögat.
För palpebral portionering av den överlägsna lacrimal körtel injektion, efter att ha bekräftat sedering, skjuvning av pälsen i pre-orbital och hårbotten området och använda depilatory grädde för att helt ta bort eventuella kvarvarande päls. Efter två minuter ta bort krämen och applicera 25 mikroliter av 1%konserveringsmedel-fri lidokain till lämpligt öga. Evert det övre ögonlocket och tillämpa milda mediala trycket på den bakre orbital fälgen tills protuberance märkning den palpebral delen av körteln ses.
Använda fintandade tlys och en tuberkulinspruta utrustad med en 27 gauge nål, direkt penetrera körtel via en transconjunctival tillvägagångssätt föra nålen två millimeter i vävnaden och injicera 100 mikroliter av en 500 mikrogram lösning av Concanavalin A eller Con A.Omedelbart efter injektionen, tillämpa mediala trycket på globen för att orsaka omloppsbanor överlägsen lacrimal körtel att sticka ut från den bakre incisure. Med hjälp av slutna böjda tutentar, indrag området tills beniga öppningen i skallen känns och tillämpa ytterligare blygsamt tryck med tuttvingar att lämna en indrag i huden för att fungera som landmärke för nålen placering. Sätt in en tuberkulinspruta utrustad med en 27 gauge nål vinkelrätt mot huden över indrag varumärket ungefär en fjärdedel tum i snittet och omdirigera nålen posteriort och externt mot laterala canthus siktar för mittpunkten mellan injektionsstället och beniga orbital fälg.
När nålens nav har uppnåtts injicerar du långsamt 0,2 milliliter av en 1 000 mikrogram lösning av Con A.For ILG-injektion, visa djuret från sidan för att lokalisera framträdandet av ILG längs den nedre främre delen av omloppsbanan. Använd en kirurgisk märkning penna för att dra en vertikal linje på huden där den ytliga delen av ILG körtel övergångar från sin ytliga viloplats på zygomatic ben till dess mer mediala plats i omloppsbana. Sopa en vertikalt höll ultraljud sond över linjen på huden för att identifiera slutet av zygomatic ben.
Den ILG övergången sker där bilden av körteln ändras från en avgränsad hyperechoic linje till en utan en igenkännlig mediala gränsen. Handstyckets relativa position till den linje som dras på huden när denna förändring observeras kommer att vara injektionsstället. Att placera Con A i en körtel vid en punkt bara mediala till zygomatic arch ben, ställa in önskad injektionsdjup som djupet av zygomatic ben hyperechoic signal plus en millimeter minus den kända längden på nålen.
Stick in nålen ca 12 millimeter i körteln vid injektionsstället innan den långsamt drar sig tillbaka tills längden på den exponerade nålen utanför kroppen är lika med den beräknade skillnaden. Injicera sedan 0,2 milliliter av en 1, 000 mikrogram Con A-lösning och bekräfta framgången med injektionen med ultraljud. ILG bör uppvisa ett karakteristiskt hyperechoic utrymme.
Con A injektioner framkalla en stark inflammatoriska svar i lacrimal körtel kännetecknas av en tät lymfatisk infiltrate som åtföljs av en minskad tårproduktion. Tear lactoferrin nivåer undertrycks vilket resulterar i en komprometterad hornhinnans och konjunktiva epitel och en ökad ros bengal färgning. Injektionen av de tre orbital LG vävnader producerar en konsekvent och enhetlig torra ögon sjukdom tillstånd.
En enda uppsättning Con A injektioner producerar torra ögon sjukdom som varar ungefär en vecka med alla de kliniska parametrarna normalisera av dag 10. Sekventiella Con A injektioner ungefär en veckas mellanrum förlänga varaktigheten av torr ögonsjukdom därefter. Efter ungefär fem uppsättningar injektioner blir torrögats sjukdomstillståndet ofta permanent utan behov av ytterligare injektioner.
Optimalt lokalisera de lacrimal körtel strukturer är viktigast. Förtrogenhet med kranial anatomi och uppmärksamhet på fina detaljer inklusive avlägsnande av päls tillsammans med skicklighet med hjälp av ultraljud alla förbättra resultaten. Eftersom denna enkla teknik kräver användning av vassa föremål, bör undersökningen vidta lämpliga försiktighetsåtgärder för att förhindra nålsticksskador.
