Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal
Bioengineering

A subscription to JoVE is required to view this content.

Bygging av CRISPR Plasmids og påvisning av Knockout effektivitet i pattedyrceller gjennom en Dual Luciferase Reporter System
 
Click here for the English version

Bygging av CRISPR Plasmids og påvisning av Knockout effektivitet i pattedyrceller gjennom en Dual Luciferase Reporter System

Article DOI: 10.3791/59639-v 05:51 min December 5th, 2020
December 5th, 2020

Chapters

Summary

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the English version.

Her presenterer vi en protokoll som beskriver en strømlinjeformet metode for effektiv generering av plasmider som uttrykker både CRISPR-enzymet og tilhørende enkeltguide RNA (sgRNAs). Samtidig transfection av pattedyrceller med denne sgRNA / CRISPR vektor og en dobbel luciferase reporter vektor som undersøker dobbel-strand pause reparasjon tillater evaluering av knockout effektivitet.

Tags

Bioengineering Utgave 166 CRISPR single guide RNA (sgRNA) Genredigering Dual luciferase reporter system single strand annealing PCR-basert deteksjon
Read Article

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter