Construcción de Plásmidos CRISPR y Detección de Eficiencia Knockout en Células de Mamíferos a través de un Sistema Dual de Reporteros Luciferase

Aquí, presentamos un protocolo que describe un método simplificado para la generación eficiente de plásmidos que expresa tanto la enzima CRISPR como el ARN guía único asociado (sgRNAs). La coexistencia de células de mamíferos con este vector sgRNA/CRISPR y un vector reportero de luciferasa doble que examina la reparación de rotura de doble hebra permite evaluar la eficiencia de la eliminatoria.