Bioengineering
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मानव फाइब्रोमस्क्युलर ऊतक कल्पना करने के लिए फॉस्फोटंगस्टिक एसिड तैयारी के साथ माइक्रो एक्स-रे कम्प्यूटेड टॉमोग्राफी का उपयोग
Summary September 5th, 2019
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माइक्रो एक्स-रे गणना टोमोग्राफी क्षतिग्रस्त मानव नमूनों से तीन आयामी जानकारी प्राप्त करने में प्रभावी है, लेकिन नरम ऊतकों को देखने में सीमित सफलता है। फॉस्फोतुंगस्टिक एसिड कंट्रास्ट एजेंट का उपयोग इस समस्या को हल कर सकते हैं। हम मानव नाजुक फाइब्रोमस्क्युलर ऊतकों की जांच करने के लिए इस विपरीत एजेंट लागू किया (ऑर्बिकुलरिस बनाए रखने स्नायु).
Transcript
हम मानव ऑर्बिकुलरिस को बनाए रखने स्नायु, कक्षा क्षेत्र के भीतर एक नाजुक संरचना की गैर-आक्रामक जांच में नरम ऊतक विपरीत को बढ़ाने के लिए फॉस्फोटंगस्टिक एसिड के साथ माइक्रोसीटी को लागू करते हैं। इस प्रोटोकॉल को मानव नरम ऊतकों की गैर-आक्रामक जांच में शोधकर्ताओं की सहायता के लिए अनुकूलित किया गया है और उचित खर्च के साथ प्रदर्शन करना सरल है। नमूनों को प्राप्त करने के लिए, नमूना कटाई के लिए त्वचा पर काटने के क्षेत्र को इंगित करने के लिए पहले एक रंगीन पेंसिल का उपयोग करें।
पुष्टि करें कि चिह्नित रेखा एक औसत दर्जे के परिसर में मध्यस्थता में फैली हुई है, पार्श्व परिसर में, निचली पलक की एक बेहतर सीमा के लिए बेहतर है, और कक्षीय रिम से लाइन के नीचे एक सेंटीमीटर तक हीन है। इसके बाद, चिह्नित रेखा के साथ चेहरे के ऊतकों को काटने के लिए एक ब्लेड का उपयोग करें, यह सुनिश्चित करें कि ब्लेड टिप के लिए हड्डी को छूने के लिए कटौती काफी गहरी है। काटे गए नमूने में त्वचा, चमड़े के नीचे ऊतक, मांसपेशी, वसा और पेरिओस्टियम शामिल होना चाहिए।
संग्रह पर, तुरंत कमरे के तापमान पर पांच से सात दिनों के लिए 10% फॉर्मलिन में नमूना ठीक करें। निर्धारण अवधि के अंत में, तीन पांच से सात मिलीमीटर मोटी टुकड़ों में नमूना टुकड़ा। प्रत्येक नमूने के सुपरोलेटरल साइड को सीना करने के लिए सुई और काले धागे का उपयोग करें ताकि नमूने की दिशा बाद के समय बिंदुओं पर निर्धारित की जा सके।
एक दिन के लिए एक आरोही इथेनॉल एकाग्रता श्रृंखला में नमूने को निर्जलित करें, 70% इथेनॉल समाधान में नमूनों को तब तक छोड़ दें जब तक कि वे धुंधला न हो जाए। माइक्रो कंप्यूटर टोमोग्राफी स्कैनिंग निर्धारित होने से एक सप्ताह पहले, 70% इथेनॉल के 210 मिलीलीटर में 2.1 ग्राम पीटीए जोड़ें और समाधान को 55 से 60 घूर्णन प्रति मिनट पर रखें। प्रत्येक कटा हुआ टुकड़ा के लिए तीन 70-मिलीलीटर प्लास्टिक कंटेनर तैयार करें।
जब डाई शराब के समाधान में भंग हो गई है, तो कंटेनरों को समाधान के साथ भरें। 1% पीटीए के प्रत्येक कंटेनर में एक नमूना रखें, और पांच से सात दिनों के लिए प्रति मिनट ५५ से ६० घूर्णन पर नमूनों हिला । जब धुंधला पूरा हो जाता है, तो स्कैनिंग की तैयारी के लिए नमूनों को एक सप्ताह के लिए ताजा 70% इथेनॉल में स्टोर करें।
माइक्रोसीटी स्कैनिंग के लिए, सुखाने को रोकने के लिए पैराफिल्म में नमूनों को लपेटें और स्कैनर ट्रे पर एक नमूना रखें। स्कैनर के स्रोत वोल्टेज को 70 किलोवोल्ट में सेट करें, स्रोत 114 माइक्रोएम्प्स तक, एल्यूमीनियम फिल्टर से 0.5 मिलीमीटर, इमेज पिक्सल का आकार 20 चुकता माइक्रोमीटर, पिक्सल को 2, 240 से 2, 240 तक, 500 मिलीसेकंड के संपर्क में आना और रोटेशन चरण 0.3 डिग्री तक। इसके बाद स्कैनिंग शुरू करें।
स्कैनिंग पूरी होने पर, पुनर्निर्माण सॉफ्टवेयर खोलें और स्कैन की गई फाइलों को लॉन्च करने के लिए कार्रवाई और ओपन डेटासेट का चयन करें। सेटिंग्स टैब का चयन करें और सात और बीम-सख्त सुधार करने के लिए अंगूठी कलाकृतियों में कमी सेट करें। पुनर्निर्माण शुरू करने के लिए, शुरू का चयन करें ।
अंतिम डेटा निर्धारित फ़ोल्डर में संग्रहीत किया जाएगा। पुनर्निर्माण के अंत में, फ़ाइल का आकार बदलने वाले सॉफ्टवेयर को खोलें, और पुनर्निर्मित फ़ाइलों को लॉन्च करने के लिए स्रोत डेटा सेट का चयन करें। डेस्टिनेशन डाटा सेट टैब पर जेपीजी का चयन करें और नो इंटरपोलेशन के क्वालिटी ऑप्शन के साथ 1/2 रीसाइजिंग ऑप्शन चुनें फिर इमेज कंप्रेशन टैब में स्लाइड बार को 100 में एडजस्ट करें और कन्वर्जन शुरू करें।
3D पुनर्निर्माण के लिए, 3D वॉल्यूम रेंडरिंग सॉफ़्टवेयर खोलें, और कार्रवाई और लोड वॉल्यूम डेटा का चयन करें। चमक और विपरीत स्तर को समायोजित करने के लिए, स्थानांतरण समारोह संपादक टैब में हिस्टोग्राम में आकार हस्तांतरण समारोह को संशोधित करें। अगले विकल्प और प्रकाश का चयन करें, और एक यथार्थवादी मॉडलिंग टोन प्राप्त करने के लिए छाया और सतह प्रकाश माउस का चयन करें।
क्लिक करें और खींचें, और सही क्लिक करें और सबसे अच्छा दृश्य खोजने के लिए 3D छवि को स्थानांतरित करने और घुमाने के लिए खींचें, में या वांछित के रूप में ज़ूम करने के लिए स्क्रॉल । अनुभागीय छवियों को देखने के लिए जगह स्लाइड करने के लिए शिफ्ट और खींचें पर क्लिक करें। लाइट आइकन चालू करें और देखने के लिए सबसे अच्छा प्रकाश खोजने के लिए प्रकाश संकेत बार को समायोजित करें, फिर लाइट आइकन को बंद करें और लाइटिंग टैब को बंद करें।
ऑप्शंस टैब में, अंतिम छवि के लिए बॉक्स को छिपाने के लिए शो और क्लिपिंग बॉक्स का चयन करें। फिर, छवि को स्टोर करने के लिए क्रियाओं और सेव इमेज का चयन करें। ओआरएल का यह विस्तृत पुनर्निर्माण माइक्रोसीटी द्वारा पीटीए तैयारी के साथ हासिल किया गया था, जिससे डर्मिस और पेरिओस्टियम के बीच तिरछे विस्तारित एक स्नायु ग्लाऊ फाइब्रोमस्कुलर संरचना के दृश्य की अनुमति मिली।
कोरोनल व्यू में, फाइबर की मात्रा और जटिलता बाद में बढ़ जाती है। क्षैतिज दृश्य में, एक आर्बराइज्ड गठन के साथ एक विस्तृत जाल देखा जाता है। धनु दृश्य में, ओआरएल फाइबर की मोटाई कमतर कम हो जाती है।
कुल मिलाकर, यह बहु-दिशात्मक अवलोकन साबित करता है कि ओआरएल उनके स्थान के आधार पर फाइबर की संख्या और मोटाई में भिन्नता के साथ निरंतर प्लेटों के बहुस्तरीय जाल से बना है। जब धुंधला की अवधि एक नमूने की मात्रा की तुलना में अपर्याप्त है, अंतिम छवि नमूना के केंद्रीय क्षेत्र में एक खाली छेद शामिल हो सकते हैं । पीटीए के बगल में अन्य एजेंटों का उपयोग किया जा सकता है और विभिन्न एजेंटों में विभिन्न गुण या धुंधला विशेषताएं रुचियां हैं।
इसलिए, अपने प्रयोग के अनुसार धुंधला क्षेत्र को अनुकूलित करना उपयोगी है।
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