Environment
This content is Open Access.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Manipulasjon av Color mønstre i hopping edderkopper for bruk i Behavioral eksperimenter
Summary May 21st, 2019
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Målet med denne protokollen er å manipulere fargen mønstre av hopping edderkopper og andre svært små Leddyr med maling for å studere spørsmål knyttet til seksuelle valg, seksuelle kannibalisme, predasjon, puppen, eller andre felt av animalsk farge.
Transcript
For å forstå hvordan og hvorfor farger utvikler seg, trenger vi eksperimenter der vi manipulerer dyrefargemønstre. Små dyr er ofte understudert fordi deres farger er vanskelige å manipulere. Den største fordelen med direkte manipulering av fargepatcher er at denne metoden ikke påvirker utseendet til resten av dyret, eller endrer deres naturlige belysningsmiljø.
Vi viser hvordan undersøkelser kan bruke emaljemaling og sminke til hoppende edderkopper. De samme metodene fungerer også på en rekke andre små, fargerike og understuderte leddyr. Jeg vil råde først å forsøke å male en død prøve slik at det ikke haster med å oppnå den perfekte malingskonsistensen og mengden på mikrobørsten.
Visuell demonstrasjon av denne metoden er viktig fordi det er vanskelig å forklare hva riktig maling konsistens er, hvordan du bruker malingen, hvilken vinkel børsten ville ha, for eksempel. For å begynne, koble et dissekere mikroskop til et kamera og en datamaskin, for lettere å ta bilder av utfallet. Slå på alle tre enhetene, og start programvaren som behandler kamerainngangen.
Deretter velger du den relevante zoomen som det endelige bildet skal tas på. Stikk en insektmonteringspinne eller en liten spiker inn i en ball av ikke-herding modelleringsleire som er omtrent på størrelse med en drue. Plasser modelleringsleire og pin oppsett under mikroskopet og justere målene slik at de grovt fokuserer på hodet av pinnen der edderkoppen vil bli montert.
Deretter plasserer du en ekstra tynn insektmonteringspinne i en ny ball av ikke-herdingsmodelleringsleire, og legg denne ved siden av mikroskopet. Sett ut følgende materialer på en organisert måte ved siden av mikroskopet. Et lite stykke absorberende papir, Et stykke hvitt skriverpapir, malingen som påføres, separate beholdere med malingtynnere for hver farge som påføres, pluss en som skal holdes gjennomsiktig og ren, individuelle mikrobørster for hver farge, og en mikrobørste som bare skal brukes med ren tynnere.
Bruk en tannpirker, legg til en dråpe maling til en åpen plastrett. Tilsett malingtynnere og bruk tannpirken til å blande de to til riktig konsistens, hvor malingen er helt homogenisert, men ikke for rennende. Bruk en mikrobørste til å teste blandet maling på det hvite skriverpapiret.
Deretter legger du en ertestørrelsesdråpe vannbasert lim på et hjørne av skriverpapiret. Først legger du til en svært liten mengde lim på hodet på monteringspinnen eller spikeren som tidligere var forberedt og plassert under mikroskopet. Skyv forsiktig den bedøvede edderkoppen fra hetteglasset på bordet med ventral side opp, og pass på å ikke trykke eller slippe edderkoppen på bordet.
Hold modelleringsleire med begge hender, og pass på at begge hendene er jevnt festet mot bordet. Trykk deretter forsiktig på pinhead med lim på edderkoppens brystben, slik at edderkoppen vil sprette litt og forlenge beina under det lille trykket som påføres. Sett monteringsoppsettet under mikroskopet, slik at området som skal males, vender opp og i fokus.
Først tester vi malingskonsistensen, og justerer den igjen om nødvendig. Prøv alltid først å bruke malingen på skriverpapiret for å kontrollere malingskvaliteten i børstehårene. Før du berører edderkoppen, er det viktig å sørge for at malingen har riktig konsistens, og at det bare er riktig mengde maling på mikrobørsten.
Mens du ser gjennom mikroskopet, bruk den dominerende hånden til å bringe tuppen av børsten inn i synsfeltet, og sørg nok en gang at børstehårene ikke inneholder for mye maling. Hvis det er for mye maling på børsten, tørker du noe av den på skriverpapiret. Deretter berører du børsten til edderkoppen på det største området som må males over.
Dette vil avsløre om konsistensen og mengden av malingen er riktig, og det er når malingen litt og sakte soaks inn i edderkoppens hår eller skalaer. Hvis det ikke påføres maling, bløtlegg børsten i malingen og gjentar denne prosessen, og begynner med å teste malingen på skriverpapiret. Hvis malingen suges inn raskt og søler over i et område som ikke skal dekkes av maling, tørker du børsten på det absorberende papiret og gjentar prosessen fra begynnelsen, ved å teste malingen på skriverpapiret.
Hvis du maler edderkoppens ansikt, bruk den ekstra tynne pinnen i den ikke-dominerende hånden, for å holde nede forbena og pedipalper. Avhengig av børster og maling, bør du vurdere å male begge sider av ansiktet før du prøver å male det sentrale området mellom øynene, da maleriet på sideområdene kan slås sammen ved å holde børsten parallelt med edderkoppens ansikt og indusere kapillærhandling. Når du maler pedipalps eller ben, sørg for å ikke berøre noen sammenføyninger med en herding maling, og sørg for å ikke bruke maling på de mannlige sperm levering organer på undersiden av det distale segmentet av pedipalps.
Etter å ha malt den ene siden av edderkoppens ansikt, er det nyttig å rotere edderkoppen under mikroskopet, slik at den andre siden av ansiktet kan males med samme dominerende hånd. Maleri må gjøres både nøye og raskt, før edderkoppen våkner fra anestesi. Til slutt zoomer du ut med mikroskopet for å inspisere den generelle fargemanipulasjonen og forberede seg på å ta et fotografi.
Bytt først målet til kameramodus. Bruk dataprogramvaren til å ta et bilde mens du kontrollerer at den valgte zoomen er den som er valgt på mikroskopet, slik at en skaleringslinje legges til. Når edderkoppen begynner å bevege seg, hold pinnen slik at edderkoppens forben berører edderkoppens hetteglass.
Om nødvendig, hell forsiktig pinnen for å hjelpe edderkoppen trekke seg bort fra det tørkede limet og la edderkoppen frigjøre seg selv. I denne studien er de små ansiktene til Habronattus pyrrithrix menn fargemanipulert. Ved hjelp av teknikkene som er demonstrert her, er ulike grader av fargemanipulasjoner effektive.
Inkludert helt skjule farger, eller redusere eller forbedre intensiteten. For mennene som vises her, er målet å øke eller redusere antall røde flekker som vises av menn under frieri. Noen menn har sine naturlige røde ansikter skjult med grå emalje maling, mens andre har sine farger vedlikeholdt ved å male over den naturlige røde med rød emalje maling som en kontroll.
På samme måte, siden noen edderkopper har røde flekker lagt til pedipalpsene for å øke mengden røde fargeflekker som vises, brukes grå maling til å dekke pedipalpen til de andre mennene, slik at alle menn har maling påført det følsomme området. Men å ha edderkopper fra forskjellige grupper malt på nøyaktig samme områder, for å kontrollere for enhver mulig negativ effekt av malingen, er ikke alltid mulig. I en annen studie fjernes den røde fargen ved hjelp av en svart eyeliner som har de samme spektrale egenskapene som den underliggende skjellaget til hannen, mens de andre mannlige fargene forblir intakte og naturlige.
For de naturlige menn påføres samme mengde eyeliner på området på toppen av karapace, like bak de fremre median øynene, for å kontrollere for potensiell lukt eller generell toksisitet av produktet. Oppførselen til begge typer menn sammenlignes i en gitt sammenheng for å vurdere eventuelle subtile forskjeller som kan tyde på toksisitet eller utilsiktede effekter av malingen. Sham behandlet menn og menn hvis ansikter er malt med eyeliner, blir satt to av to i nærvær av en kvinne, og spesifikk mannlig oppførsel observeres.
I dette tilfellet avslører alle sammenligninger ingen forskjeller mellom behandlinger. Derfor kan det konkluderes med at ingen skjevhet er innført for noen av behandlingskategoriene. Likeledes, når introdusert enkeltvis til en kvinnelig bur, menn malt med grå eller rød emalje maling og ikke manipulerte menn, presentere ingen forskjeller i atferd.
Derfor kan det konkluderes med at de malte hannene handlet naturlig. For ikke å handikap edderkoppen på noen måte, er det viktig å helt unngå å legge maling på munndelen eller spermleveringsorganene. Man bør heller ikke legge til eller la noen maling på edderkoppens øyne eller ledd.
Fargemanipulerte edderkopper eller andre leddyr kan brukes i atferdseksperimenter for å forstå fargens rolle i en rekke sammenhenger, alt fra frieri, til mannlige, mannlige interaksjoner, for å unngå rovdyr. Feltet av dyrefarging drives hovedsakelig av arbeid på større virveldyr, for eksempel fugler. Med skalert ned fargemanipulasjon teknikker, kan vi nå stille flere spørsmål om farge i små dyr.
Please enter your institutional email to check if you have access to this content
has access to
BackLogin to access JoVE
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
To receive a free trial, please fill out the form below.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You
Thank You
Thank You
