Biology
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माउस प्रजनन पथ सहज गतिशीलता और डेटा विश्लेषण के लिए एक MATLAB आधारित गर्भाशय मोशन ट्रैकिंग एल्गोरिथ्म का आकलन करने के लिए पूर्व Vivo विधि
Summary September 1st, 2019
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गर्भाशय संकुचन महिलाओं की भलाई के लिए महत्वपूर्ण हैं। हालांकि, रोग रूप से बढ़ी हुई संकुचन के परिणामस्वरूप डिस्मेनोरिया हो सकता है, विशेष रूप से युवा महिलाओं में। यहाँ, हम चिकनी मांसपेशियों relaxants कि dysmenorrhea के इलाज के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है की प्रभावकारिता के त्वरित मूल्यांकन की अनुमति एक सरल पूर्व vivo तैयारी का वर्णन.
Transcript
हमारा प्रोटोकॉल महत्वपूर्ण है क्योंकि यह एक अक्षुण्ण गर्भाशय की सहज गतिशीलता का आकलन करने के लिए पहली मात्रात्मक पूर्व वीवो विधि प्रदान करता है। यह उपन्यास दृष्टिकोण सिंथेटिक यौगिकों में स्वाभाविक रूप से होने वाले उपचार की आराम की क्षमता का परीक्षण करने के लिए एक आसान और कम खर्चीला विकल्प प्रदान करता है। इस तकनीक का एक बड़ा फायदा यह है कि पूरे प्रयोग में सभी इंट्रा-गर्भाशय सेलुलर इंटरैक्शन बरकरार रहते हैं।
गर्भाशय की संकुचन से अधिक डिस्मेनोरिया से जुड़ी हुई है, जिसके लिए गर्भाशय आराम उपचार के लिए उपयोगी हो सकता है। यह विधि नए आराम का परीक्षण करने का एक आसान तरीका प्रदान करती है। एस्ट्रोस चक्र चरण की पुष्टि करने के बाद, माउस को रीढ़ की स्थिति में रखें, और पेट के श्रोणि क्षेत्र को उजागर करने के लिए चरम हिस्सों को फैलाएं।
70% इथेनॉल के साथ पेट को गीला करें, और त्वचा को क्लिटोरिस से बेहतर बनाने के लिए संदंश का उपयोग करें। पेरिटोनम को बेनकाब करने के लिए निचले पेट के निचले हिस्से तक के पार्श्व पहलुओं पर छोटे ट्रांसवर्स चीरे बनाएं। गर्भाशय के सींग को नुकसान पहुंचाए बिना गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल ट्रैक्ट को बेनकाब करने के लिए पेरिटोनम के माध्यम से सावधानी से काटें, और गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल ट्रैक्ट को कवर करने वाले प्रावरणी और एडीपोज ऊतक को हटाने के लिए संदंश का उपयोग करें।
डुओडेनम, जेजुनम, इलियम, सेकम, और आरोही और ट्रांसवर्स कोलन निकालें। मूत्राशय के नीचे सीधे पाया जाता है जो योनि का पता लगाने के लिए मूत्राशय का पता लगाएं। जघन हड्डियों के संगम पर जघन सिम्फिसिस का पता लगाएं, मूत्राशय के लिए कौडल, और कैंची का उपयोग करने के लिए ध्यान से इंटरपुबिक फाइब्रोकार्टिलाजिनस ऊतक के माध्यम से जघन सिम्फिसिस के पार्श्व पक्षों पर एक चीरा बनाने के लिए पहुंच प्राप्त करने के लिए और योनि निष्कर्षण के लिए एक मार्ग प्रदान करने के लिए ।
गुदा के गुदा और निचले हिस्से के बीच स्थित परिणीति के माध्यम से काटें, और मलाशय के धीमे एक्ससेशन की अनुमति देने के लिए योनि को उठाने के लिए संदंश का उपयोग करें। उन दो गर्भाशय सींगों की पहचान करें जो योनि में एक कांटा में विभाजित होते हैं और प्रत्येक सींग के अंत में एक जटिल ओविडक्ट और अंडाशय का पता लगाते हैं। सही ढंग से गर्भाशय सींग की पहचान करने के लिए प्रक्रिया के लिए महत्वपूर्ण है सुनिश्चित करने के लिए ऊतकों को क्षतिग्रस्त नहीं कर रहे हैं ।
पेट की गुहा के भीतर सींग, अंडाशय और अंडाशय से जुड़ने और समर्थन करने वाले किसी भी स्नायुओं को हटाने के लिए छोटे विच्छेदन कैंची का उपयोग करें, और योनि, गर्भाशय, अंडाशय और अंडाशय को हटा दें। पूरे अलग प्रजनन पथ को 100 मिलीमीटर पेट्री डिश में स्थानांतरित करें जिसमें डल्बेको के पीबीएस के 10 मिलीलीटर होते हैं। गर्भाशय सींग और योनि के साथ-साथ जघन क्षेत्र में किसी भी फर के आसपास के किसी भी संयोजी और एडीपोज ऊतक को हटाने के लिए संदंश और सर्जिकल कैंची का उपयोग करें जो छवि की गुणवत्ता में बाधा डाल सकता है।
गर्भाशय सींग की गतिशीलता की अनुमति देने के लिए व्यापक स्नायु को हटा दें और अलग-अलग प्रजनन पथ को 35 मिलीमीटर पेट्री डिश में स्थानांतरित करने से पहले ताजा डल्बेको के पीबीएस प्रति धोने के साथ दो बार ऊतक को धोएं जिसमें तीन मिलीलीटर ऑक्सीजनयुक्त क्रेब्स समाधान होते हैं। सहज गतिशीलता इमेजिंग के लिए, पेट्री डिश को कमरे के तापमान पर एक काली सतह पर रखें, और सहज संकुचन शुरू करने के लिए 15 से 30 मिनट की अनुमति दें। जब आंदोलन देखा जा सकता है, तो किसी भी प्रकार के डिजिटल वीडियो उपकरण का उपयोग करके अक्षीय विमान से 10 मिनट के लिए सहज गर्भाशय गतिशीलता रिकॉर्ड करें।
इसके बाद, तैयारी को एक पेट्री डिश में स्थानांतरित करें जिसमें परीक्षण यौगिक के साथ ऑक्सीजनयुक्त क्रेब्स बफर पूरक होता है और उसी तरीके से अतिरिक्त 10 मिनट के लिए सहज गर्भाशय गतिशीलता रिकॉर्ड करता है। रिकॉर्डिंग अवधि के अंत में, 100 मिलीमीटर पेट्री डिश में दुलबेक्को के पीबीएस के 10 मिलीलीटर में पूरे प्रजनन पथ को धोएं, और उपचार की रिवर्सिबिलिटी का आकलन करने के लिए नमूने को हौसले से ऑक्सीजनयुक्त क्रेब्स बफर के एक नए पेट्री डिश में स्थानांतरित करें। लगभग 10 मिनट के लिए सहज गर्भाशय गतिशीलता को उसी तरीके से रिकॉर्ड करें, जैसा कि पिछले दो रिकॉर्डिंग के लिए है।
फिर तैयारी को एक और 35 मिलीमीटर पेट्री डिश में स्थानांतरित करें जो परीक्षण यौगिक के लिए वाहन के साथ पूरक ऑक्सीजनयुक्त क्रेब्स बफर से भरा हुआ है ताकि यह सुनिश्चित किया जा सके कि सहज गर्भाशय गतिशीलता में कोई यांत्रिक रूप से प्रेरित परिवर्तन नहीं हैं। प्रजनन पथ तैयारी ने एपिनेफ्रीन की अनुपस्थिति में पैनल ए और सी में उच्च गतिशीलता का प्रदर्शन किया। लेकिन यह फेनोटाइप एक माइक्रो मूलर एपिनेफ्रीन की उपस्थिति के साथ पैनल बी में निष्क्रिय है।
यहां, एपिनेफ्रीन प्रशासन और सहज गतिशीलता वसूली का एक नमूना डेटा विश्लेषण दिखाया गया है, जिसमें यह दर्शाया गया है कि प्रजनन पथ पर हार्मोन के प्रभाव सहज गतिशीलता को परीक्षण यौगिक उपचार के दौरान और परीक्षण के बाद लिए गए ऊतक की रिकॉर्डिंग से कैसे निर्धारित किया जा सकता है। गर्भाशय सींगों को संकुचित या अधिक फैलाने से बचना महत्वपूर्ण है अन्यथा कोई सहज संकुचन नहीं देखा जाएगा। हमारी विधि का उपयोग यौगिकों के परीक्षण के लिए भी किया जा सकता है जो गर्भाशय की संकुचनता को बढ़ा सकते हैं।
यह प्रक्रिया गर्भावस्था के पहले चरणों में गर्भवती माउस गर्भाशय पर लागू की जा सकती है। इस प्रयोग में थ्रूपुट दवा स्क्रीनिंग के लिए छह वेल प्लेट प्रारूप में अपग्रेड करने की क्षमता है ।
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