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Biochemistry

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JoVE Journal Biochemistry
Absolute Quantifizierung des zellfreien Proteinsynthesestoffwechsels durch Reversed-Phase Liquid Chromatography-Mass Spectrometry
High-Throughput Total Internal Reflection Fluorescence and Direct Stochastic Optical Reconstruction Microscopy Using a Photonic Chip
Journal (Biochemistry)
High-Throughput Total Internal Reflection Fluorescence and Direct Stochastic Optical Reconstruction Microscopy Using a Photonic Chip
Using Three-color Single-molecule FRET to Study the Correlation of Protein Interactions
Journal (Biochemistry)
Using Three-color Single-molecule FRET to Study the Correlation of Protein Interactions
 
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Absolute Quantifizierung des zellfreien Proteinsynthesestoffwechsels durch Reversed-Phase Liquid Chromatography-Mass Spectrometry

Article DOI: 10.3791/60329-v • 08:06 min • October 25th, 2019
October 25th, 2019 •
1, 1, *1, *1, 1
1Robert Frederick Smith School of Chemical and Biomolecular Engineering, Cornell University
* These authors contributed equally

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Hier präsentieren wir ein robustes Protokoll zur Quantifizierung von 40 Verbindungen, die am zentralen Kohlenstoff- und Energiestoffwechsel in zellfreien Proteinsynthesereaktionen beteiligt sind. Das zellfreie Synthesegemisch wird mit Anilin zur effektiven Trennung mittels umgekehrter Flüssigchromatographie abgeführt und dann durch Massenspektrometrie unter isotopisch gekennzeichneten internen Standards quantifiziert.

Tags

Biochemie Ausgabe 152 zellfreie Proteinsynthese Flüssigchromatographie-Massenspektrometrie Anilin-Tagging zentraler Kohlenstoff Energiestoffwechsel interner Standard stoffwechselmetabolisches Netzwerk Isotopenkennzeichnung
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