Neuroscience
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विद्युत उत्तेजना द्वारा चूहों में तीव्र पोंटिन इंफार्क्शन की स्थापना
Chapters
Summary August 27th, 2020
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यहां प्रस्तुत एक नाड़ी के साथ विद्युत उत्तेजना के माध्यम से एक चूहा मॉडल में तीव्र पोंटिन इंफार्क्शन स्थापित करने के लिए एक प्रोटोकॉल है।
Transcript
हम चूहे के एक पोन में इंफेक्शन स्थापित करने के लिए एक प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं। इस पोंटिन इंफार्क्शन चूहा मॉडल को आसानी से, आसानी से पुन: पेश किया गया था, और अत्यधिक सफल मॉडल था। विद्युत उत्तेजना का उपयोग थैलेसीमिया जैसे किसी अन्य मस्तिष्क क्षेत्र में इंफेक्शन बनाने के लिए किया जा सकता है।
जो लोग इस मॉडल को करना चाहते हैं, उन्हें प्रयोग से पहले पोंटिन स्वायत्तता सीखनी चाहिए । सर्जरी से पहले, चूहों का वजन करें और साथ में वर्णित पाठ में वर्णित व्यवहार परीक्षणों के अनुसार उनके न्यूरोलॉजिकल प्रदर्शन का आकलन करें। संज्ञाहरण से तुरंत पहले हीटिंग पैड को 37 डिग्री सेल्सियस तक प्रीहीट करें और स्टीरियोटैक्सिक फ्रेम पर धारक को खोपड़ी ड्रिल संलग्न करें।
पहले एनेस्थेटाइज्ड चूहे में पेडल पलटा के जवाब की कमी की पुष्टि करें और हीटिंग पैड पर प्रवण स्थिति में स्टीरियोटैक्सिक फ्रेम पर चूहे को माउंट करें। सिर को सुरक्षित करने के लिए कान नहर के ऊपर कान की सलाखों की स्थिति, ध्यान रखना कि खोपड़ी को इंजेक्शन के किसी भी तिरछा से बचने के लिए क्षैतिज रखा जाता है। जानवर की आंखों पर मरहम लगाएं और खोपड़ी से बालों को निकालने के लिए माइक्रो शेवर का इस्तेमाल करें।
द्विपक्षीय पार्श्व कैंथस की रेखा से पीछे के फॉन्टेनसेल के पीछे 0.5 सेंटीमीटर तक खोपड़ी के मिडलाइन के साथ तीन सेंटीमीटर लाइन खींचने के लिए एक मार्कर का उपयोग करें और चिह्नित लाइन के साथ मिडलाइन चीरा बनाने के लिए एक स्केलपेल का उपयोग करें। किसी भी खून को हटाने के लिए एक कपास झाड़ू का प्रयोग करें और खोपड़ी का पर्दाफाश करने के लिए त्वचा फ्लैप के प्रत्येक पक्ष पर सर्जिकल टेप का एक टुकड़ा रखें। खोपड़ी से किसी भी कनेक्टिव ऊतक को धीरे से हटाने और ब्रेग्मा का पता लगाने के लिए 0.9% सोडियम क्लोराइड के साथ भिगोए गए एक नए स्वाब का उपयोग करें।
एक ठीक टिप मार्कर कलम का प्रयोग मूल बिंदु के रूप में ब्रेग्मा के केंद्रीय बिंदु को इंगित करने के लिए, छह मिलीमीटर पूर्वकाल पीछे, दो मिलीमीटर मध्याढि़ पार्श्व पर ड्रिल जगह है । एक मिलीमीटर व्यास क्रैनिओटॉमी को ध्यान से करने के लिए ड्रिल का उपयोग करें। इसके बाद, एक 22 गेज जांच के साथ ड्रिल की जगह टिप के साथ एक अछूता म्यान के साथ म्यान के समीपस्थ अंत के ऊपर दो मिलीमीटर रखा ।
शीट मस्तिष्क में सात मिलीमीटर डालें और जांच के शीर्ष तक म्यान के साथ जांच को आगे बढ़ाएं जब तक कि मस्तिष्क की सतह से नौ मिलीमीटर नीचे न हो जाए। इलेक्ट्रोड को विद्युत उत्तेजक से कनेक्ट करें और एनोड को जांच से जोड़ें। फिर चूहे के कान से कैथोड से कनेक्ट करें।
इसके बाद, विद्युत उत्तेजक को चालू करें और एकल पल्स चौड़ाई को 4, 050 मिलीसेकंड, वोल्टेज को 50 वोल्ट और करंट को चार मिलीप्स में सेट करें। मस्तिष्क से डिवाइस को हटाने से पहले उत्तेजना के बाद पांच मिनट के लिए स्थिति में जांच छोड़ दें। बोन सीमेंट के साथ क्रेनियोटॉमी को कवर करें और घाव को बंद करने के लिए 4.0 पॉलीमाइड सीवन फिलामेंट्स का उपयोग करने से पहले सीमेंट को सूखने दें।
तीन या चार टांके के बाद, 2-1-1 मानक सर्जिकल नॉट टाई करें। फिर इंट्रापेरिटोनेली रूप से पेनिसिलिन के 250 माइक्रोलीटर के साथ चूहे को इंजेक्ट करें और जानवर को अपने पिंजरे में लौटने से पहले पूरी तरह से जागने तक हर 15 मिनट में चूहे की निगरानी करें। इस विश्लेषण में, छह जानवरों को सर्जरी के अधीन किया गया था के रूप में प्रदर्शन किया और छह जानवरों को नियंत्रण के रूप में इलाज किया गया ।
इन छवियों में मस्तिष्क के स्लाइस प्रति समूह एक चूहे से प्राप्त किए गए थे। एमआरआई स्कैनिंग से पता चला कि इंफार्केशन मानव रोगियों में एंटेरोलेटरल इंफार्क्शन की नकल करने वाले पोन्स के आधार पर स्थित था । क्योंकि एक अछूता म्यान का उपयोग किया गया था, कॉर्टेक्स, सेरिबैलम या मिडब्रेन में इंफार्क्शन नहीं देखा गया था।
प्रसार भारित छवियों ने तीव्र पोंटिन इंफार्क्शन का भी खुलासा किया। सर्जरी के बाद 24 घंटे इंफार्क्शन की पुष्टि के लिए टीटीसी स्टेनिंग का इस्तेमाल किया गया । जैसा कि उम्मीद थी, नियंत्रण समूह की तुलना में सर्जरी समूह में इंफार्क्शन की मात्रा काफी अधिक थी।
व्यवहार स्कोर से पहले और सर्जरी के बाद मापा गया । नियंत्रण समूह की तुलना में, एक पोंटिन इंफार्क्शन वाले चूहों ने बाईं ओर परिक्रमा की। लोंगा, बर्डसन, अंग प्लेसमेंट, बीम बैलेंस, और चिपकने वाले हटाने सोमाटोसेंसरी परीक्षण स्कोर में पोंटिन इंफार्क्शन और नियंत्रण समूह चूहों के साथ रैंट के बीच महत्वपूर्ण अंतर देखे गए।
किसी भी विशिष्ट मस्तिष्क क्षेत्र विद्युत उत्तेजना से नष्ट होने जा रहे हैं।
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