Medicine
A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 2 minutes.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Herhaalde Orotracheale intubatie bij muizen
Chapters
Summary March 27th, 2020
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Het doel van dit artikel is het beschrijven van een verfijnde methode van intubatie van de laboratoriummuis. De methode is niet-invasief en daarom ideaal voor studies die seriële controle van de ademhalingsfunctie en/of instillatie van behandelingen in de long vereisen.
Transcript
Dit protocol stelt onderzoekers in staat om herhaalde metingen van de longfunctie in individuele muizen uit te voeren, waardoor de experimentele variabiliteit afneemt en het aantal muizen dat nodig is voor elk experiment wordt verminderd. Het belangrijkste voordeel van dit protocol is dat het geen visualisatie van de luchtpijp door de mondholte of traumatische dissectie van de nek voor intubatie vereist. Deze methode zal van bijzondere waarde zijn voor onderzoekers die chronische en progressieve longziekten bestuderen, zoals astma, COPD, emfyseem en longfibrose.
Visuele demonstratie van dit protocol is van cruciaal belang omdat het begrijpen van hoe de luchtpijp te identificeren door de huid van de ventrale nek centraal staat in de methode. Het aantonen van de techniek met Andrew Nelson zal Kate Nolan zijn, een dierenarts van mijn laboratorium. Om een intubatieplatform te creëren, vouwt u een lengte van 15 tot 20 centimeter van 3-0 zijde doormidden en plakt u de uiteinden van de draad naar de bovenkant van een drie-inch bindmiddel met drie ring.
Selecteer een canule van de juiste grootte en lengte en snijd een schuine kant op de distale punt van de katheter. Maak het snijoppervlak glad met schuurpapier om een afgeronde punt te creëren en maak voorzichtig een lichte bocht in de canule op ongeveer een centimeter van de schuine kant. Wanneer de materialen klaar zijn, bevestig dan een gebrek aan reactie op teen knijpen in een verdoofde muis en haak de bovenste snijtanden rond de zijden draad aan de bovenkant van het schuine oppervlak van het platform om de muis op te schorten in de supine positie.
Zodra de muis vierkant is geplaatst in rug recumbency, voorzichtig grijpen de basis van de staart en trek de staart in de richting van de tafel. Plaats een stuk tape over de basis van de staart om de muis te beveiligen en breng ontharingscrème aan op het ventrale cervicale gebied. Gebruik na 30 tot 45 seconden droog gaas om de room te verwijderen en spoel de huid grondig af met zout of gedestilleerd water.
Met behulp van tangen in de niet-dominante hand, trek voorzichtig de tong op een manier die voldoende opent de mond voor de invoering van de canule. Met de dominante hand, vooraf de canule in de mond, zodat het einde dat distaal is voor de lichte bocht is tegen het dak van de mond van het dier. Laat de tong los en schuif de vlakke rand van de gesloten tangen caudally langs de ventrale nek totdat het manubrium wordt bereikt om de speekselklieren lateraal te verplaatsen en de spier die de luchtpijp bedekt plat te maken.
De luchtpijp zal transcutanely verschijnen als een witte lijn. Draai indien nodig de tangen in craniodorsal richting terwijl de spanning op de huid in een staartrichting wordt gehandhaafd om de lateraal verplaatste speekselklieren te laten pieken en om meer contrast rond de luchtpijp te creëren. Supinating de dominante hand met gelijktijdige flexie van de pols, vooraf de canule terwijl tegelijkertijd vissen de distale punt van de cannula ventrally.
Als de canule goed is geplaatst, zal het worden waargenomen in de luchtpijp. Om een goede plaatsing te bevestigen, sluit u een longinflatielamp aan de canule en observeer thoracale expansie met gelijktijdige depressie van het apparaat. Zonder de canule te verplaatsen, de snijtanden van de muis voorzichtig los te koppelen van het intubatieplatform en de muis over te brengen op een horizontaal platform, bevestig vervolgens de canule aan de adapter op de ventilator en ventileer de muis na een diepe inflatie 60 seconden voordat de ademhalingsweerstand wordt gemeten.
Zodra de procedure is voltooid, breng je de muis over naar een opgewarmd platform en geef je constante stimulatie via lichte teen- of staartknijpers om spontane ademhaling aan te moedigen. Zodra spontane ademhaling is waargenomen, blijven visueel toezicht op het dier. Wanneer de ademhaling weer normaal is, grijpt u de canule op het niveau van de naaf en trekt u de buis voortdurend en weg van de muis totdat de canule volledig uit de mond van het dier is verwijderd.
Breng de muis eenmaal uit naar een schone herstelkooi met warmtesteun met controle tot ze volledig ambulant zijn. In dit representatieve experiment werd de ademhalingsweerstand gemeten op dagen 0, 3, 10 en 17, met behulp van de gedwongen oscillatietechniek na een diepe inflatie tot 25 centimeter water dat gedurende vijf en 60 seconden mechanische ventilatie werd vastgehouden. Er werden geen significante verschillen in de gemeten luchtwegweerstand waargenomen tussen een van de tijdstippen binnen elke stam, wat erop wijst dat het ontbreken van een toename van de luchtwegweerstand na verloop van tijd wijst op een gebrek aan functioneel significante intubatietrauma-geassocieerde ontsteking in het ademhalingssysteem gedurende vier opeenvolgende tijdstippen.
Deze intubatieprocedure kan worden gebruikt om toegang te bieden tot de luchtpijp voor de installatie van experimentele stoffen en de seriële bewaking van de ademhalingsfunctie. Deze techniek maakt de beoordeling van de longfunctie zonder invasieve tracheostomie mogelijk, waardoor de monitoring op meerdere tijdstippen bij chronische en progressieve ziekten binnen dezelfde muis wordt vergemakkelijkt.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.
