Medicine
A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 2 minutes.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Gentagen Orotracheal Intubation hos mus
Chapters
Summary March 27th, 2020
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Målet med denne artikel er at beskrive en raffineret metode til intubation af laboratoriemusen. Metoden er noninvasive og derfor ideel til undersøgelser, der kræver seriel overvågning af respiratorisk funktion og/ eller inddrypning af behandlinger i lungerne.
Transcript
Denne protokol vil gøre det muligt for forskere at udføre gentagne målinger af lungefunktionen hos individuelle mus, mindske eksperimentel variation og reducere antallet af mus, der er nødvendige for hvert eksperiment. Den største fordel ved denne protokol er, at det ikke kræver visualisering af luftrøret gennem mundhulen eller traumatisk dissektion af halsen for intubation. Denne metode vil være af særlig værdi for forskere, der studerer kroniske og progressive lungesygdomme som astma, KOL, emfysem, og lungefibrose.
Visuel demonstration af denne protokol er kritisk, fordi forstå, hvordan man identificerer luftrøret gennem huden på den ventrale hals er centralt for metoden. Demonstrere teknikken med Andrew Nelson vil være Kate Nolan, en dyrlæge fra mit laboratorium. For at skabe en intubation platform, fold en 15 til 20-centimeter længde på 3-0 silke i halve og tape enderne af tråden til toppen af en tre-tommer tre-ring bindemiddel.
Vælg en kanyle af passende størrelse og længde og skær en facet på kateterets distale spids. Glat den afskårne overflade med slibende papir for at skabe en afrundet spids og lav forsigtigt en lille bøjning i kanylen ca. en centimeter fra facett. Når materialerne er klar, bekræfte en manglende reaktion på tå knivspids i en bedøvet mus og krog de øverste fortænder omkring silketråd øverst på den vinklede overflade af platformen til at suspendere musen i liggende position.
Når musen er placeret firkantet i dorsal recumbency, forsigtigt gribe bunden af halen og trække halen mod bordet. Placer et stykke tape over bunden af halen for at sikre musen og anvende depilatory creme til ventral-livmoderhalskræft region. Efter 30 til 45 sekunder, bruge tør gaze til at fjerne cremen og grundigt skylle huden med saltvand eller destilleret vand.
Brug af snøre i den ikke-dominerende hånd, forsigtigt trække tungen på en måde, der tilstrækkeligt åbner munden for indførelse af kanylen. Med den dominerende hånd, fremme kanylen ind i munden, således at enden, der er distalt for den lille bøje er mod taget af dyrets mund. Slip tungen og skub den flade kant af de lukkede stænt caudally langs ventrale hals, indtil manubrium er nået til sideværts fortrænge spytkirtlerne og til at flade musklen dækker luftrøret.
Luftrøret vises transkutanely som en hvid linje. Om nødvendigt rotere stænt i en kraniodorsal retning og samtidig opretholde spændinger på huden i en kaudal retning at forårsage sideomtholdte spytkirtler til at toppe og skabe mere kontrast omkring luftrøret. Supinating den dominerende hånd med samtidig fleksion af håndleddet, fremme kanylen, mens samtidig lystfiskeri den distale spids af kanylen ventrally.
Hvis kanylen er korrekt placeret, vil det blive observeret i luftrøret. For at bekræfte en korrekt placering skal du tilslutte en lungeinflationspære til kanylen og observere brystkasseudvidelsen med samtidig depression af enheden. Uden at fortrænge kanylen skal du forsigtigt løsne musens fortænder fra intubationsplatformen og overføre musen til en vandret platform, derefter fastgøres kanylen til adapteren på ventilatoren, og efter en dyb oppustning ventileres musen i 60 sekunder, før respirationsmodstanden måles.
Når proceduren er færdig, overføre musen til en opvarmet platform og give konstant stimulation via lys tå eller hale klemmer at tilskynde spontan respiration. Når spontan respiration er observeret, fortsætte med at visuelt overvåge dyret. Når respirationshastigheden vender tilbage til normal, skal du gribe kanylen på hubben og forsigtigt trække røret kranielt og væk fra musen, indtil kanylen er helt fjernet fra dyrets mund.
Når den er ekstuberet, overføres musen til et rent genvindingsbur med varmestøtte med overvågning, indtil den er helt ambulant. I dette repræsentative eksperiment blev åndedrætsmodstanden målt på dag 0, 3, 10 og 17 ved hjælp af den tvungne svingningsteknik efter en dyb oppustning til 25 centimeter vand, der blev holdt i fem og 60 sekunders mekanisk ventilation. Der blev ikke observeret signifikante forskelle i den målte respiratoriske resistens mellem nogen af tidspunkterne inden for hver stamme, hvilket tyder på, at fraværet af en stigning i respiratorisk resistens over tid indikerer en mangel på funktionelt signifikant intubation traumerelateret inflammation i åndedrætssystemet over fire på hinanden følgende tidspunkter.
Denne intubation procedure kan bruges til at give adgang til luftrøret til installation af eksperimentelle stoffer og seriel overvågning af respiratoriske funktion. Denne teknik gør det muligt at vurdere lungefunktion uden invasiv tracheostomi, hvilket letter overvågningen på flere tidspunkter i kroniske og progressive sygdomme inden for samme mus.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.
