Medicine
A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 2 minutes.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
וחזר אורוקנה אל בעכברים
Chapters
Summary March 27th, 2020
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
המטרה של מאמר זה היא לתאר שיטה מעודנת של צנרור העכבר המעבדה. השיטה אינה פולשנית, ולכן אידיאלית למחקרים הדורשים ניטור סדרתי של תפקודי הנשימה ו/או הערכת טיפולים בריאה.
Transcript
פרוטוקול זה יאפשר לחוקרים לבצע מדידות חוזרות של תפקוד הריאות בעכברים בודדים, הפחתת השונות הניסיונית והפחתת מספר העכברים הדרושים לכל ניסוי. היתרון העיקרי של פרוטוקול זה הוא שהוא אינו דורש הדמיה של קנה הנשימה דרך חלל הפה או ניתוח טראומטי של הצוואר לצנרור. שיטה זו תהיה בעל ערך מיוחד לחוקרים החוקרים מחלות ריאה כרוניות ומתקדמים כגון אסטמה, COPD, נפחת ופיברוזיס ריאתי.
הדגמה חזותית של פרוטוקול זה היא קריטית, כי הבנה כיצד לזהות את קנה הנשימה דרך העור של הצוואר הגחוני הוא מרכזי בשיטה. הפגנת הטכניקה עם אנדרו נלסון תהיה קייט נולאן, וטרינרית מהמעבדה שלי. כדי ליצור פלטפורמת צנרור, קפל אורך של 15 עד 20 ס"מ של משי 3-0 לשניים והקלט את קצות החוט לראש קלסר שלוש טבעות בגודל 3 אינץ'.
בחר cannula של הגודל והאורך המתאימים לחתוך שיפה בקצה הדיסטלי של הקטטר. מחליקים את המשטח החתוך בנייר שוחק כדי ליצור קצה מעוגל ולעשות בעדינות עיקול קל ב cannula כ סנטימטר אחד מן השיפוע. כאשר החומרים מוכנים, לאשר חוסר תגובה קמצוץ בוהן בעכבר הרדמה וו החותכים העליונים סביב חוט המשי בחלק העליון של המשטח הזוויתי של הפלטפורמה כדי להשעות את העכבר במצב סופין.
ברגע שהעכבר ממוקם בריבוע בהפוגה הגבית, תופסים בעדינות את בסיס הזנב ומסוגלים את הזנב לכיוון השולחן. מניחים פיסת סרט על בסיס הזנב כדי לאבטח את העכבר ולהחיל קרם depilatory על אזור צוואר הרחם הגחוני. לאחר 30 עד 45 שניות, השתמש גזה יבשה כדי להסיר את השמנת ולשטוף ביסודיות את העור עם מלוחים או מים מזוקקים.
באמצעות מדפים ביד הלא דומיננטית, בעדינות לסגת הלשון באופן שפותח את הפה מספיק כדי להציג את cannula. עם היד הדומיננטית, לקדם את cannula לתוך הפה, כך הסוף כי הוא דיסטלי לעיקול קל הוא על גג הפה של החיה. שחררו את הלשון והחליקו את הקצה השטוח של המדחפים הסגורים באופן סיבתי לאורך צוואר הגחון עד להגעה למנובריום כדי לעקור באופן כללי את בלוטות הרוק ולשטח את השריר המכסה את קנה הנשימה.
קנה הנשימה יופיע באופן טרנס-עורי כקו לבן. במידת הצורך, לסובב את המטלפים בכיוון craniodorsal תוך שמירה על מתח על העור בכיוון caudal כדי לגרום בלוטות הרוק עקורים מאוחר לשיא וליצור ניגודיות יותר סביב קנה הנשימה. לתבוע את היד הדומיננטית עם כיפוף בו זמנית של פרק כף היד, לקדם את cannula בעת ובעונה אחת לדוג את הקצה הדיסטלי של cannula ventrally.
אם cannula כבר ממוקם כראוי, זה יצפה בתוך קנה הנשימה. כדי לאשר מיקום תקין, לחבר נורת אינפלציה ריאות לתרבולת ולצפות התרחבות בית החזה עם דיכאון בו זמנית של המכשיר. מבלי לעקור את ה cannula, בזהירות להסיר את החותכים של העכבר מפלטפורמת הצנרור ולהעביר את העכבר על פלטפורמה אופקית, ולאחר מכן לחבר את cannula למתאם על מכונת ההנשמה, בעקבות אינפלציה עמוקה, לאוורר את העכבר במשך 60 שניות לפני מדידת ההתנגדות הנשימתית.
לאחר השלמת ההליך, מעבירים את העכבר לפלטפורמה מחוממת ומספקים גירוי מתמיד באמצעות קמצוץ קל או זנב כדי לעודד נשימה ספונטנית. לאחר הנשימה הספונטנית הוא ציין, להמשיך לפקח חזותית על החיה. כאשר קצב הנשימה חוזר לנורמלי, לתפוס את הצינורית ברמה של הרכזת בעדינות למשוך את הצינור בקרניאלית הרחק מהעכבר עד הצינור מוסר לחלוטין מפיו של החיה.
לאחר ההתרגשות, מעבירים את העכבר לכלוב התאוששות נקי עם תמיכה בחום עם ניטור עד אמבולטורי לחלוטין. בניסוי מייצג זה נמדדה ההתנגדות הנשימתית בימים 0, 3, 10 ו-17, תוך שימוש בטכניקת התנודות הכפויה לאחר אינפלציה עמוקה ל-25 ס"מ מים שהוחזקו במשך חמש ו-60 שניות של אוורור מכני. לא נצפו הבדלים משמעותיים בהתנגדות הנשימתית הנמדדת בין נקודות הזמן בתוך כל זן, דבר המצביע על כך שהיעדר עלייה בהתנגדות הנשימה לאורך זמן מצביע על היעדר דלקת משמעותית מבחינה תפקודית הקשורה לטראומה במערכת הנשימה במשך ארבע נקודות זמן רצופות.
הליך צנרור זה יכול לשמש כדי לספק גישה קנה הנשימה להתקנת חומרים ניסיוניים ניטור סדרתי של תפקוד הנשימה. טכניקה זו מאפשרת הערכה של תפקוד הריאות ללא tracheostomy פולשנית, להקל על ניטור בנקודות זמן מרובות במחלות כרוניות ומתקדמות בתוך אותו עכבר.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.
