Medicine
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静脈移植を用いた血管形成術を模したウサギ静脈間位置モデルによる動脈血圧下の内膜過形成の評価
Chapters
Summary May 15th, 2020
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本プロトコルは、静脈移植片を用いた血管形成手術後の静脈内膜過形成を減衰させる戦略を開発するための動脈血圧に静脈を与えることによって、静脈内膜過形成を実験的に作り出すことを目的とする。
Transcript
当社のプロトコルは、静脈内膜過形成の分野の研究者に、簡単で費用対効果の高い、再現性のある臨床関連モデルを提供します。当社のプロトコルは、経済的、臨床的、技術的にバランスが取れています。したがって、インビボ設定にインビトロの結果を適用したい研究者に強くお勧めします。
私たちは、虚血性心疾患および下肢疾患における新しい治療戦略の開発のために、より大きな動物モデルにプロトコルを適用できると考えています。私たちのプロトコルは、主に心血管外科の分野に関連しています。しかし、末期腎疾患の患者における動静脈瘻の変性変化に対処するためにも使用され得る。
局所麻酔薬、および予防用抗生物質鎮痛投与後、10%ポビトンヨウ素で手術部位を消毒する。そして、麻酔を受けた雄の日本の白いウサギの頸部領域に外科メスで50〜60ミリメートルの切開を行います。皮下組織と筋膜を鈍く解剖し、頸静脈の20〜30ミリメートルのセグメントを露出させる。
そして、露出した静脈のすべての枝をリゲートするために4-0シルク縫合糸を使用してください。内側と外部の頸静脈の周りに2-0シルク縫合糸を置き、静脈の遠位側の静脈壁に1ミリメートルの切開を行います。切り傷から静脈の近位側に向かって2フランス風のバルーンカテーテルを挿入します。
そして、頸静脈の遠位部位に2-0シルク縫合糸をリゲートします。気球を200マイクロリットルの空気で膨らませる。そして、バルーンを使用して、内皮剥離のために静脈のインティマを3回否定します。
3回目の通過後、静脈の近位端をリゲートし、遠位部位で静脈を切断する。次に、遠位から近位方向に収穫された静脈に20ゲージの静脈内カテーテルを挿入し、近位部位で静脈を切断する。頸動脈を収穫頸静脈と介在させるために、20〜30ミリメートルの周頸動脈のセグメントを露出させる。
そして、近くの静脈と神経から慎重に動脈を分離します。露出した静脈のすべての枝を4-0シルク縫合糸でリゲートします。そして、静脈内投与 200 ヘパリンナトリウムのキログラム当たり国際単位.
外科用ゴムクランプで動脈の近位および遠位端を締め付けます。そして、クランプ間の動脈を切断します。切開頸動脈に正常な生理液を近位に注入し、遠位で動脈を遠位に注入する。
そして、逆エンドツーエンドの方法で血管を吻合するために動脈の近くに収穫静脈を置きます。静脈の近位端を動脈の遠位端まで吻合するには、8-0のアンカーステッチを2つ置きます。サイトと反対側のサイトでポリプロピレン。アンカーステッチの間の吻合線の上側をステッチします。
動脈と静脈の移植片を逆さまにします。そして、吻合ラインの残りの部分にステッチを追加します。次に静脈から静脈内カテーテルを取り出し、静脈移植片を近位にクランプする。
頸動脈を遠位に落とす。そして、静脈移植片が徐々に拡大するかどうかを観察する。8-0 を使用するポリプロピレンは縫合糸を中断し、動脈の近位端まで静脈の遠位端を吻合する。
そして、吻鼻炎部位からの出血をチェックするために動脈を取り除く。最後に、4-0シルク縫合糸で内部頸動脈をリゲートして、不十分な流出状態をシミュレートし、内耳肥大症を促進します。その後、生理死して傷をきれいにします。
3-0ポリグラクチン910で層を切開します。そして、ウサギは、その家のケージに動物を返す前に、監視で完全に回復することができます。この代表的な画像では、静脈間位置手術後2週間で正常な内膜過形成が観察できる。
ここで、インティマル過形成形態に対するマイクロRNA-145装填ポリ(乳酸-コグリコール酸)ナノ粒子の治療効果が観察できる。実際、多発性(乳酸-コグリコール酸)ナノ粒子を装填したマイクロRNAによる治療は、内膜過形成の著しい減衰をもたらす。さらに、細胞増殖マーカーであるKi-67の免疫染色は、未熟な増殖状態から成熟した収縮状態への血管平滑筋細胞の表現型変化を示すmicroRNA-145処置群内のKi-67陽性細胞の数が少ないことを明らかにしている。
私たちのプロトコルの主な目標は、移植された移植片の愛を達成することです。また、頸動脈を脱クランプした後に移植片が膨張することを確認することも重要である。
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