8,360 Views
•
06:14 min
•
May 09, 2020
DOI:
Traumatisch hersenletsel is een van de belangrijkste oorzaken dood en invaliditeit. Diffuus axonaal hersenletsel is een wijdverspreide axonale schade te ontwikkelen na TBI. In dit onderzoek wil ik ons model presenteren over inductie diffuse axale hersenletsel op basis van rotatieversnellingsmechanisme resultaat TBI.
Selecteer volwassen mannelijke Sprague-Dawley ratten met een gewicht van 300 tot 350 gram. Zorg voor rat chow en water ad libitum. Voer alle experimenten uit tussen 06:00 en 12:00 uur. Het apparaat werd op een zware, stabiele laboratoriumtafel geplaatst.
Het apparaat bestaat uit de volgende componenten: een cilinder, een ijzergewicht, een rotatiemechanisme bestaande uit een cilindrische buis en kopfixatiepennen. Het gewicht is bevestigd aan een string en verhoogd tot de hoogte van 120 centimeter. Het vrij dalende gewicht raakt de bout die het rotatiemechanisme activeert.
De rat laterale hoofd rotatie apparaat werd gebruikt om het hoofd snel draaien van nul tot 90 graden. Na inductie, diffuus axonaal hersenletsel, werd de rat verplaatst naar de herstelkamer. F is de kracht die in kilogram op het hoofd van het dier wordt uitgeoefend.
Capital M is het moment van de kracht, K voor kinetische energie. Weinig m is de massa van het dalende gewicht, g voor gravitatieversnelling, h voor hoogte in centimeters, en D is de afstand tussen de oorspelden in centimeters. Voor de beoordeling van neurologisch tekort en cijfermodeltekorten, gebruikten we Neurologische Ernst Score bij ratten.
We evalueren mobiliteit, hemiplegie, balk lopen taak, falen in balk lopen taak. Storing van balk balanceren taak breed 1,5 centimeter. Stabiliteit en bundel balanceren, inspanning op bundel balans 1,5 centimeter breed en reflexen.
48 uur na letsel, alle ratten, letsel en controlegroep, waren diep verdoofd en transcardieel geperfuseerd met 0,9% heparinized zoutoplossing gevolgd door 500 milliliter van 4% formaldehyde in 0,1 M fosfaatbuffer zoutoplossing. Na perfusie werd onthoofding geproduceerd en werden de hersenen onmiddellijk verwijderd, vervolgens gedurende 48 uur in een 4% formaldehydeoplossing bevestigd. De hersenen werden vervolgens geblokkeerd in vijf millimeter coronale secties van de olfactorische bol gezicht naar de visuele cortex, terwijl het cerebellum en hersenstam werden ontleed.
Na paraffine inbedding, coronale en sagittale secties werden gemaakt van de thalamus. Produceren van de immunochemische kleuring van bèta-amyloïde precursor eiwit. De verschillende groepen ratten op verschillende tijdstippen worden op de regeling weergegeven.
Diffuus axonaal hersenletsel aan het begin van het experiment. Op het moment 48 uur, Neurologische Ernst Score werd onderzocht. Op het moment 48 uur, immunochemische kleuring van beta-APP werd uitgevoerd op alle twee groepen.
Geïllustreerd neurologisch tekort 48 uur na diffuus axonaal hersenletsel voor twee studiegroepen. Een Mann-Whitney test gaf aan dat neurologisch tekort aanzienlijk groter was voor 15 diffuse axonale hersenletsel ratten in vergelijking met 15 naïeve ratten op 48 uur na interventie. Representatieve fotomicrografen die axonale en neuronale immunoreactiviteit onthullen na geïsoleerde diffuse axale hersenletsel bij ratten 48 uur na het letsel.
Kleinere cellulaire snaren worden gedetecteerd met bèta-amyloïde precursor eiwit. In sham group, werd het niet gedetecteerd. In ons werk ontwikkelden we een eenvoudig, reproduceerbaar en betrouwbaar nieuw model voor diffuus axonaal hersenletsel op basis van rotatieversnellingsmechanisme.
Een dergelijk model zal een beter begrip van pathofysiologie van diffuus axonaal hersenletsel en de ontwikkeling van effectievere behandelingen mogelijk maken. Hartelijk dank voor uw aandacht.
Dit protocol valideert een betrouwbaar, gemakkelijk uit te voeren en reproduceerbaar knaagdiermodel van diffuus axonaal letsel (DAI) dat wijdverspreide schade aan witte stof veroorzaakt zonder schedelbreuken of kneuzingen.
04:41
Preparation of Oligomeric β-amyloid1-42 and Induction of Synaptic Plasticity Impairment on Hippocampal Slices
Related Videos
23099 Views
09:41
Chromatin Immunoprecipitation from Dorsal Root Ganglia Tissue following Axonal Injury
Related Videos
16073 Views
16:01
Multi-electrode Array Recordings of Neuronal Avalanches in Organotypic Cultures
Related Videos
26352 Views
11:18
An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time
Related Videos
10804 Views
12:15
In Vivo Functional Brain Imaging Approach Based on Bioluminescent Calcium Indicator GFP-aequorin
Related Videos
12195 Views
08:21
Effects of Blast-induced Neurotrauma on Pressurized Rodent Middle Cerebral Arteries
Related Videos
7119 Views
06:40
Activity-based Training on a Treadmill with Spinal Cord Injured Wistar Rats
Related Videos
7955 Views
09:10
Generation of 3-D Collagen-based Hydrogels to Analyze Axonal Growth and Behavior During Nervous System Development
Related Videos
5620 Views
09:30
Assessment of Long-term Depression Induction in Adult Cerebellar Slices
Related Videos
6883 Views
10:33
Advanced Diffusion Imaging in The Hippocampus of Rats with Mild Traumatic Brain Injury
Related Videos
8352 Views
Read Article
Cite this Article
Frank, D., Melamed, I., Gruenbaum, B. F., Grinshpun, J., Kuts, R., Shvartsur, R., Azab, A. N., Assadi, M. H., Vinokur, M., Boyko, M. Induction of Diffuse Axonal Brain Injury in Rats Based on Rotational Acceleration. J. Vis. Exp. (159), e61198, doi:10.3791/61198 (2020).
Copy