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Induction de lésion diffuse du cerveau axonal chez les rats basés sur l’accélération rotationnelle
Chapters
Summary May 9th, 2020
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Ce protocole valide un modèle de rongeur fiable, facile à exécuter et reproductible de lésions axonales diffuses cérébrales (DAI) qui induit des dommages à la matière blanche généralisée sans fractures du crâne ou contusions.
Transcript
Les lésions cérébrales traumatiques sont l’une des principales causes de décès et d’invalidité. Les lésions cérébrales axonales diffuses sont un dommage axonal répandu se développent après TBI. Dans cette recherche, je voudrais présenter notre modèle sur les lésions cérébrales axonales diffuses d’induction basées sur le résultat de mécanisme d’accélération rotationnelle TBI.
Choisissez des rats Sprague-Dawley mâles adultes pesant de 300 à 350 grammes. Fournir chow rat et ad libitum d’eau. Effectuez toutes les expériences entre 6h00 et 12h00. L’appareil a été placé sur une lourde table de laboratoire stable.
L’appareil se compose des composants suivants : un cylindre, un poids de fer, un mécanisme de rotation composé d’un tube cylindrique, et des broches de fixation de tête. Le poids est fixé à une corde et élevé à la hauteur de 120 centimètres. Le poids qui tombe librement frappe le boulon activant le mécanisme de rotation.
Le dispositif latéral de rotation de tête de rat a été employé pour tourner la tête rapidement de zéro à 90 degrés. Après induction, lésion cérébrale axonale diffuse, rat a été déplacé à la salle de récupération. F est la force appliquée sur la tête de l’animal en kilogrammes.
Capital M est le moment de la force, K pour l’énergie cinétique. Little m est la masse du poids qui tombe, g pour l’accélération gravitationnelle, h pour la hauteur en centimètres, et D est la distance entre les épingles à oreille en centimètres. Pour l’évaluation du déficit neurologique et des déficits de modèle de catégorie, nous avons employé le score neurologique de sévérité chez les rats.
Nous évaluons la mobilité, l’hémiplégie, la tâche de marche de faisceau, l’échec dans la tâche de marche de faisceau. Défaillance de la tâche d’équilibrage du faisceau large de 1,5 centimètres. Stabilité et équilibre du faisceau, effort sur l’équilibre du faisceau de 1,5 centimètre de large et réflexes.
48 heures après blessure, tous les rats, les dommages et le groupe témoin, ont été profondément anesthésiés et transcardiaquement perfusés avec la solution saline héparinée de 0,9%, suivie de 500 millilitres de formaldéhyde de 4% dans la solution saline tampon de phosphate de 0,1 M. Après perfusion, la décapitation a été produite et les cerveaux ont été immédiatement enlevés, puis fixés dans une solution de formaldéhyde de 4% pendant 48 heures. Les cerveaux ont ensuite été bloqués en sections coronaires de cinq millimètres de la face de l’ampoule olfactive au cortex visuel tandis que le cervelet et les tiges cérébrales ont été disséqués.
Après l’intégration de paraffine, des sections coronal et sagittale ont été faites du thalamus. Produire la coloration immunochimique de la protéine précurseur bêta-amyloïde. Les différents groupes de rats à différents moments sont montrés sur le schéma.
Lésion cérébrale axonale diffuse au début de l’expérience. À l’heure 48 heures, le score neurologique de sévérité a été examiné. À l’heure 48 heures, la coloration immunochimique de bêta-APP a été exécutée aux deux groupes.
Déficit neurologique illustré 48 heures suivant la lésion cérébrale axonale diffuse pour deux groupes d’étude. Un essai de Mann-Whitney a indiqué que le déficit neurologique était sensiblement plus grand pour 15 rats diffus de dommages axonal de cerveau comparés à 15 rats naïfs à 48 heures après intervention. Photomicrogrammes représentatifs révélant des immunoréactivités axonales et neuronales suivant des lésions cérébrales axonales diffuses isolées chez les rats 48 heures après la blessure.
De plus petites chaînes cellulaires sont détectées avec la protéine précurseur bêta-amyloïde. En groupe factice, il n’a pas été détecté. Dans nos travaux, nous avons développé un nouveau modèle simple, reproductible et fiable pour les lésions cérébrales axonales diffuses basées sur le mécanisme d’accélération rotationnelle.
Un tel modèle permettra une meilleure compréhension de la pathophysiologie des lésions cérébrales axonales diffuses et le développement de traitements plus efficaces. Merci beaucoup pour votre attention.
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