A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 2 minutes.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
تحريض من منتشر إصابة الدماغ أكسونال في الفئران على أساس تسارع التناوب
Chapters
Summary May 9th, 2020
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
هذا البروتوكول بالتحقق من صحة موثوق بها وسهلة الأداء واستنساخ نموذج القوارض من الدماغ منتشر إصابة المحور (DAI) الذي يسبب تلف المادة البيضاء على نطاق واسع دون كسور الجمجمة أو كدمات.
Transcript
إصابات الدماغ الرضحية هي واحدة من الأسباب الرئيسية للوفاة والعجز. إصابة الدماغ المحوري المنتشرة هو ضرر عصبي على نطاق واسع بعد تطور TBI. في هذا البحث، وأود أن أقدم نموذجنا حول تحريض منتشر إصابات الدماغ المحورية استناداً إلى نتيجة آلية تسريع التناوب TBI.
حدد الذكور البالغين الجرذان Sprague-Dawley وزنها 300 إلى 350 غرام. توفير فئران تشاو والمياه الإعلانية libitum. تنفيذ كافة التجارب بين 6:00 صباحاً و12:00 ظهراً. وقد وضع الجهاز على طاولة مختبرية ثقيلة ومستقرة.
يتكون الجهاز من المكونات التالية: اسطوانة ، وزن حديدي ، آلية دورانية تتكون من أنبوب أسطواني ، ودبابيس تثبيت الرأس. يتم إرفاق الوزن إلى سلسلة وارتفاعها إلى ارتفاع 120 سم. الوزن السقوط بحرية يضرب الترباس تفعيل آلية التناوب.
تم استخدام جهاز دوران الرأس الجانبي الفئران لتحويل الرأس بسرعة من صفر إلى 90 درجة. بعد التعريفي، وإصابة الدماغ المحوري المنتشر، تم نقل الفئران إلى غرفة الإنعاش. F هي القوة المطبقة على رأس الحيوان بالكيلوغرامات.
رأس المال M هو لحظة القوة، ك للطاقة الحركية. م قليلا هو كتلة الوزن المتساقط، ز لتسارع الجاذبية، ح للطول في السنتيمتر، وD هو المسافة بين دبابيس الأذن في السنتيمترات. لتقييم العجز العصبي والعجز نموذج الصف، استخدمنا درجة الخطورة العصبية في الفئران.
نحن تقييم التنقل، hemiplegia، مهمة المشي شعاع، فشل في مهمة المشي شعاع. فشل شعاع موازنة مهمة واسعة 1.5 سم. الاستقرار والحزم موازنة، والجهد على توازن شعاع 1.5 سم واسعة وردود الفعل.
48 ساعة بعد الإصابة، وجميع الفئران، والإصابات ومجموعة التحكم، كانت تخدير عميق وعبر القلب مع 0.9٪ heparinized المالحة تليها 500 ملليلتر من 4٪ الفورمالديهايد في 0.1 M الفوسفات العازلة المالحة. بعد التسريب، تم إنتاج قطع الرأس وأزيلت على الفور العقول، ثم ثابتة في محلول الفورمالديهايد 4٪لمدة 48 ساعة. ثم تم حجب الأدمغة في خمسة أقسام إكللية ملليمتر من وجه المصباح الشمي إلى القشرة البصرية في حين تم تشريح الدماغ وينبع الدماغ.
بعد تضمين البارافين ، تم إجراء أقسام الإكلالي والقوس من المهاد. إنتاج تلطيخ مناعية الكيميائية من بيتا اميلويد السلائف البروتين. يتم عرض مجموعات مختلفة من الفئران في أوقات مختلفة على المخطط.
منتشر إصابات الدماغ المحوري في بداية التجربة. في الوقت 48 ساعة، تم فحص نقاط شدة العصبية. في الوقت 48 ساعة، تم تنفيذ التلطيخ الكيميائي المناعي من بيتا-APP في جميع المجموعتين.
العجز العصبي المصور 48 ساعة بعد إصابة الدماغ المحوري منتشر لمجموعتين دراسيتين. وأشار اختبار مان ويتني إلى أن العجز العصبي كان أكبر بكثير بالنسبة لـ 15 جرذان من إصابات الدماغ المحورية المنتشرة مقارنة بـ 15 جرذذ ساذجا في 48 ساعة بعد التدخل. التصوير الضوئي التمثيلي الذي يكشف عن نشاطات مناعية محورية و العصبونية بعد إصابة الدماغ المحورية المنتشرة المعزولة في الفئران 48 ساعة بعد الإصابة.
يتم الكشف عن سلاسل خلوية أصغر مع بروتين السلائف بيتا اميلويد. في مجموعة صورية، لم يتم اكتشافه. في عملنا، قمنا بتطوير نموذج جديد بسيط، قابل للاستنساخ، وموثوق به لإصابة الدماغ المحورية المنتشرة على أساس آلية تسريع التناوب.
هذا النموذج سوف تمكن من فهم أفضل للفيزيولوجيا المرضية من إصابات الدماغ المحوري منتشر وتطوير علاجات أكثر فعالية. شكرا جزيلا على اهتمامكم.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.
