Chronische stress verschuivingen inspanning-gerelateerde keuze gedrag in een Y-Maze Barrier Taak in muizen

Dit protocol stelt onderzoekers in staat om de effecten van chronische stress op inspanningsmatig reageren bij zowel mannelijke als vrouwelijke muizen te onderzoeken. Een voordeel van deze techniek is dat zowel mannelijke als vrouwelijke muizen tegelijkertijd een gevalideerd chronisch sociaal nederlaagparadigma kunnen ondergaan waardoor beloningsgedrag direct kan worden vergeleken. Historisch, preklinisch onderzoek naar stemmingsstoornissen heeft gebruik gemaakt van gedragstaken die het vermijden van bedreigende omgevingen te betrekken.

Belonings- en motivatietaken, zoals inspanningsgerelateerde keuze, kunnen echter meer vertaalrele relevantie bieden. Los 3,375 gram bèta-cyclodextrine op in 750 milliliter kraanwater in een glazen container van één liter schroef. Los 3.375 gram bètacycdextrine op in 750 milliliter kraanwater, gevolgd door de toevoeging van 26,25 milligram corticosteron.

Los de corticosteron op in oplossing in een ultrasoon reinigerwaterbad gedurende ongeveer 30 minuten op 40 kilohertz totdat de vloeistof een duidelijk uiterlijk vertoont, vul vervolgens de waterflessen van het voertuig en de corticosteronmuisgroep met de juiste oplossingen en registreert het volume vloeistof dat twee keer per week wordt verbruikt. Om de muizen te wennen aan het Y-doolhof, de dag na voedselontbering, plaats een groot aantal 20 milligram graan gebaseerde voedsel pellets in de doppen van twee 50 milliliter centrifuge buizen en plaats een dop aan het einde van elke arm van de Y-doolhof, plaats dan een muis in de startdoos van de Y-doolhof met de startdoos verdeler op zijn plaats voor een paar seconden voor het verwijderen van de verdeler en waardoor de muis om de Y-doolhof te verkennen voor 15 Minuten. Na twee dagen van Y-doolhof gewenning, plaats voor pellets in een dop voor de hoge beloning arm en plaats twee pellets in een dop voor de lage beloning arm.

Voor een proef met een hoge beloningsvrijheid blokkeert u de toegang tot de lage beloningsarm en plaatst u de muis enkele seconden in het startvak voordat u de scheidingslijn verwijdert, waardoor de muis 60 seconden in de hoge beloningsarm kan komen om de beschikbare pellets te consumeren. Voor een lage beloning gedwongen keuze proef, blokkeren toegang tot de hoge beloning arm. Voor vrije keuze training, begin elke sessie met een hoge en een lage arm gedwongen keuze proef voor het voltooien van 10 vrije keuze proeven.

Laat de muis een doolhofarm selecteren. Zodra de muis heeft gereisd naar het einde van de arm aan de dop van pellets, plaats een arm verdeler achter de muis, vergrendeling in het dier totdat het heeft verbruikt de pellets. Not welke arm wordt geselecteerd voor alle 10 vrije keuze proeven per dag.

Zodra een muis de hoge beloningsarm heeft geselecteerd voor 7 van de 10 proeven in een vrije keuze trainingsdag, plaats een barrière van 10 centimeter halverwege de hoge beloningsarm in het Y-doolhof en voer ten minste twee hoge en lage arm gedwongen keuzeproeven uit met de barrière op zijn plaats. Na het voltooien van alle vier de proeven, plaats de muis in het startvak en laat de muis om een arm te selecteren voor 10 vrije keuze proeven met de 10 centimeter barrière om de hoge beloning arm op zijn plaats. Op de volgende dag, habituate en test de muis zoals aangetoond, maar gebruik een 15 centimeter barrière in de hoge beloning arm.

De volgende dag, test de muis met een 20 centimeter barrière zoals aangetoond. Voor chronische niet-discriminerende sociale nederlaag stress testen, lijn de kooien van CD1 mannetjes met C57BL/6J mannetjes en vrouwtjes met CD1 kooien aan de voorkant en C57BL/6J kooien grenzend aan de CD1 mannelijke muizen in de sociale nederlaag kamer. Om het proces te beginnen, plaats een volwassen mannelijke en een volwassen vrouwelijke experimentele C57BL/6J muis in de thuiskooi van elke CD1 agressor man voor een vijf minuten durende sociale nederlaag sessie en record de aanval latentie en frequentie van de aanval voor zowel mannelijke als vrouwelijke proefdieren.

Breng aan het einde van de sessie de mannelijke C57BL/6J-muis over in de kooi van co-housed CD1-mannetjes gescheiden door een duidelijke geperforeerde plexiglasbarrière. Scheid de aanvallende CD1 en vrouwelijke C57BL/6 muizen met een soortgelijke duidelijke geperforeerde plexiglas barrière. Voor een controlesessie plaatst u een vrouwelijke muis in de thuiskooi van één controlemannetje C57BL/6-muis.

Plaats na vijf minuten een duidelijke geperforeerde plexiglasverdeler tussen de dieren. Aan het einde van het eerste experiment, draai de muizen voor de resterende negen nederlaag sessies, zodanig dat elke C57BL/6 mannelijke en vrouwelijke paar is gedraaid een kooi aan de linkerkant om een nieuwe interactie met nieuwe CD1 muizen voor elke sessie. Chronische corticosteron en chronische niet-discriminerende sociale nederlaag stress muizen vertonen beide een verminderd gemiddelde lichaamsgewicht in vergelijking met voertuig en controle dieren.

Deze muizen verbruikten ook minder gemiddelde huiskooi lab chow. Voertuig en corticosteron toegediende muizen consumeren een vergelijkbaar volume van vloeistof gedurende vier weken van de behandeling en drie weken van het testen van gedrag. Chronische niet-discriminerende sociale nederlaag stress produceert een onaangepaste fenotype in gevoelige muizen in vergelijking met veerkrachtige of controle muizen niet blootgesteld aan chronische niet-discriminerende sociale nederlaag stress tonen een vermindering van de tijd doorgebracht in de interactie zone met een nieuwe CD1 muis.

Zowel chronische corticosteron en chronische niet-discriminerende sociale nederlaag stress muizen produceren een verschuiving in inspanningvolle reageren wanneer de barrière hoogte toeneemt tot 15 en 20 centimeter. Hoge en lage beloning arm latency met de 15 centimeter barrière wordt niet beïnvloed door corticosteron administratie en is vergelijkbaar voor beide groepen met zowel lage als hoge beloning armen. Belangrijk, als chronische corticosteron of chronische niet-discriminerende sociale nederlaag stress schaadt het leren van de Y-doolhof barrière taak, kunnen deze muizen niet aan het criterium te bereiken in de vrije keuze trainingen, van invloed op latere barrière resultaat interpretatie.

Bovendien kan de sociale interactietaak worden gebruikt om de muizen te stratificeren in veerkrachtige en gevoelige populaties, evenals door seks. Bij het uitvoeren van de Y-doolhof barrière taak, is het van cruciaal belang om zowel de geselecteerde arm en de latentie op te nemen om de voedselpellet beloning te bereiken in elke individuele proef. Andere belangrijke en vertalingallly relevante beloning-gerelateerde gedrag, zoals resultaat devaluatie of progressieve verhouding, kan worden uitgevoerd na de chronische corticosteron sociale nederlaag of chronische niet-discriminerende sociale nederlaag protocollen.