Developmental Biology
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Changements de température progressifs pour la reproduction et le frai maximaux chez Astyanax mexicanus
Chapters
Summary February 14th, 2021
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Cet article décrit les conditions et les protocoles de laboratoire de base pour un régime de température incrémentale afin de stimuler le frai maximal dans le tétra mexicain Astyanax mexicanus,qui est un modèle émergent pour les études développementales et évolutives.
Transcript
Donc, comme l’Astyanax mexicanas est un petit poisson. Il est indigène au nord-est du Mexique et au sud du Texas. Ce qui est important, c’est qu’il existe sous deux formes.
Une forme est un poisson de surface qui a de grands yeux et une pigmentation, et l’autre forme est un poisson vivant dans les grottes qui a perdu ses yeux et a perdu sa pigmentation. Ils sont toujours capables de frayer, de s’hybrider les uns avec les autres, de sorte qu’ils peuvent être utilisés dans une analyse génétique prospective pour étudier la génétique et le développement. Ont également de gros embryons qui sont transparents, et ils peuvent être utilisés pour étudier la biologie comparative du développement.
Ils sont donc utilisés depuis de nombreuses années comme un système pour comprendre l’évolution du développement. Plusieurs jours avant que le frai ne soit souhaité, nous commençons à mieux nourrir les poissons. Nous augmentons également la température de manière progressive de sorte que, dans le temps que nous voulons qu’ils frayent, ils subiront ensuite environ deux ou trois jours de frai excessif, produisant un grand nombre d’embryons fécondés qui se développent bien et à travers les stades larvaires jusqu’aux adultes.
Après avoir nourri le poisson à 10h00.m. avec une pincée de flocons Tetra, vérifiez l’incubateur qui sera utilisé pour abriter des bols d’embryons en développement et changez l’eau si nécessaire. Vérifiez le niveau d’eau dans tous les réservoirs et ajoutez de l’eau au système à tous les réservoirs qui sont bas.
Réglez ensuite l’incubateur à 23 degrés Celsius Au moins 30 minutes après la première alimentation, nourrissez les poissons dans les bassins de reproduction avec une pincée de flocons de jaune d’œuf, suffisamment de grappes de vers noirs pour permettre à chaque poisson dans le réservoir de consommer environ cinq à 10 vers ou les deux. Au moins une heure après la deuxième alimentation, frottez les réservoirs de reproduction au besoin et configurez soigneusement des filets de reproduction sans interférer avec l’alimentation en air du réservoir. Le lendemain matin, retirez les filets de reproduction du fond des réservoirs du système pour adultes entre 9h00 et 10h00.m.
et utilisez le tuyau fixé à la pour rincer doucement les embryons dans un filet portatif. Inversez le filet dans un bol de doigts d’eau propre et transférez environ 100 embryons par bol de doigt dans 200 millilitres d’eau propre du système complétée par 0,00003% de bleu de méthylène. Étaison des embryons sous un microscope optique pour estimer le temps de fécondation selon le calendrier de développement A-mexicanas.
Après la mise en scène, placez les bols à doigts dans un incubateur pendant cinq à sept jours et nourrissez les cultures avec des crevettes saumure vivantes. Pour chaque réservoir qui a laissé tomber des embryons, notez la date et le numéro du réservoir et notez le nombre et la qualité des embryons tombés. Consigner le temps moyen de frai selon la table de rassemblement et consigner la température du système au moment où le poisson a frayé.
Surveillez les bols d’embryons tout au long de la journée, en utilisant une pipette de pâturage pour enlever les embryons et les débris morts ou déformés, tels que les aliments ou les matières fécales non consommés, et en changeant l’eau bleue au besoin. À 13h00.m nourrissez les poissons dans les bassins de reproduction comme démontré et réglez la température de l’eau à 24 degrés Celsius.
Ensuite, retirez tout excès de nourriture et de débris des réservoirs et frottez les réservoirs avant de réinitialiser les filets. Mercredi et jeudi, répétez la collecte et l’évaluation d’embryons comme démontré pour mardi. Nourrissez le poisson et réglez l’eau à la température appropriée.
Vérifiez les embryons dans l’incubateur et remplacez l’eau du bol à doigts par de l’eau fraîche du système traité au bleu de méthylène. Ensuite, nettoyez les réservoirs d’élevage au besoin et réinitialisez les filets. Vendredi, après avoir nourri les poissons, réglez la température de l’eau à 23 degrés Celsius et vérifiez les embryons dans l’incubateur.
Le samedi et le dimanche, nourrissez les poissons. Dans cette figure, les données de reproduction de juillet 2017 à mars 2020 pour les poissons de surface de Rio Choy et du Texas et les poissons des cavernes los Sabinos, Tinaha et Pachon sont présentées. Les données ont été analysées par semaine de reproduction et par nombre moyen d’embryons collectés par jour au cours d’une seule semaine de reproduction.
Les données indiquent que la reproduction a été continue tout au long de l’année chez les poissons de surface de Rio Choy et du Texas et chez les poissons des cavernes de Pachon. La quantité et la qualité de la plupart des poissons de surface de Rio Choy se sont déroulées entre faible et élevée, tandis que la quantité et la qualité de la plupart des poissons de surface du Texas et des poissons des cavernes pachons se sont déroulées entre faible et moyenne. L’occurrence du frai n’était pas continue chez les poissons des cavernes de Tinaja ou de Los Sabinos, le frai étant faible ou inexistant de la fin de l’été à l’automne chez ces poissons.
Bien que les niveaux les plus bas de frai aient été enregistrés pour les poissons des cavernes de Los Sabinos, la qualité des embryons était la meilleure. Dans l’ensemble, ce poisson de surface présentait une meilleure quantité et une meilleure qualité de frai que le poisson des cavernes. En utilisant ce système, nous pouvons engendrer des centaines, en fait des milliers d’œufs tous les deux mois, et ces œufs sont ensuite utilisés, ces embryons sont ensuite utilisés à de nombreuses fins différentes.
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