A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 2 minutes.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Een complexe duik-voor-voedsel taak om sociale organisatie en interacties bij ratten te onderzoeken
Chapters
Summary May 8th, 2021
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Dit protocol beschrijft een methode om sociale hiërarchie in een rattenmodel te onderzoeken. Ratten voeren een complexe duik-voor-voedsel-taak uit waarin ze een aparte hiërarchie vormen op basis van hun bereidheid om onder water te duiken en te zwemmen om een voedselkorrel te verkrijgen. Deze methode wordt gebruikt om besluitvorming en sociale relaties tussen zeer sociale dieren in kleine groepen te begrijpen.
Transcript
Dit protocol beschrijft een methode om sociale hiërarchie in een rattenmodel te onderzoeken. Alle ratten voeren een complexe duik uit voor voedseltaak waarin ze een aparte hiërarchie vormen volgens de bereidheid om onder water te duiken en te zwemmen om een voedselkorrel te verkrijgen. Deze methode wordt gebruikt om de besluitvorming en sociale relatie tussen zeer sociale dieren in kleine groepen te begrijpen.
Selecteer volwassen mannelijke Sprague Dawley ratten met een gewicht van 300 tot 350 gram. Zorg voor rattenvoer en water ad libitum. Voer alle experimenten uit tussen 6:00 en 12:00 uur.
Houd ratten op kamertemperatuur van 22 Graden Celsius met 12 uur licht en 12 uur donkere cycli. Een tijdlijn van het experimentele protocol. Selecteer willekeurig 120 ratten in een van de drie experimentele groepen.
Groep één, N is gelijk aan 60, wordt gebruikt als controlegroep. Groep twee, N is gelijk aan 30, zal worden geïnduceerd met depressie. Groep drie, N is gelijk aan 30, zal ook worden geïnduceerd met depressie en zal vervolgens worden behandeld met antidepressiva.
Sommige kruisvoorkeurtests werden uitgevoerd voor en na inductie van chronische onvoorspelbare stress en na complex duiken voor voedseltaak. De volgende stressoren worden in willekeurige volgorde geïntroduceerd. Groepshuisvesting door zes ratten per kooi gedurende 18 uur te plaatsen.
Kantelbare kooiplaatsing gedurende drie uur 45 graden langs de verticale as. Voedseltekort gedurende 18 uur. Waterverdorvenheid gedurende 18 uur gevolgd door onmiddellijke blootstelling aan een lege waterfles.
Zachte kooiplaatsing gedurende acht uur bestaande uit 300 milliliter water dat in beddengoed is gemorst. Continue verlichting en omgekeerde licht donkere cyclus voor 48 uur per week en vijf minuten warme omgeving op 40 graden Celsius. Ratten worden dagelijks in willekeurige volgorde blootgesteld aan twee van de zeven stressoren.
Eén overdag en de tweede 's nachts gedurende vijf opeenvolgende weken. Ratten uit groep drie krijgen gedurende drie weken een antidepressivumbehandeling toegediend met amicrom hydrofloride, tricyclisch antidepressivum 20 milligram per kilo intraperitoneaal eenmaal per dag gedurende drie weken. Groep twee van de controlegroep wordt gedurende drie weken intraperitoneaal 0,9% zoutoplossing placebo intraperitoneaal toegediend in hetzelfde volume als de antidepressivagroep.
Bereid apparaten voor en acclimatiseren ratten. Verbind twee kooien 50 op 50 op 50 centimeter met een aquarium 130 op 35 op 50 centimeter via tunnels. Plaats buizen met voedselkorrels, één voedselkorrel in elke buis aan het ene uiteinde van het aquarium.
Markeer alle zes ratten met verschillende gekleurde markers aan het begin van het experiment om individuele identificatie mogelijk te maken. Op elk moment namen zes ratten tegelijkertijd deel aan de experimenten. Drie van hen dienden als controlegroep één en de andere drie waren ofwel depressieve groep twee, of depressief na behandeling, groep drie.
Op de eerste dag van het experiment, introduceer elke groep ratten in experimentele apparaten zonder water gedurende drie uur sessie. Breng ratten terug naar de standaardkooi na de sessie. Video-opname ratten in het apparaat continu tijdens de drie uur durende sessie.
Herhaal deze sessies gedurende dag twee en drie. Voeg op dag vier tot en met 17 geleidelijk water toe totdat het maximale waterniveau is bereikt. Houd op dag 17 tot en met 21 het maximale waterpeil aan.
Observeer ratten duiken om toegang te krijgen tot pellets. Noteer de volgende parameters. Frequentie van binnenkomsten in tunnel, duiken naar voedsel, voedsel verkregen door aanval, voedsel verkregen door dragen en tijd doorgebracht in afzonderlijke kooien.
Plaats de ratten tijdens de donkere cyclus in individuele kooien in dezelfde kamer als de behuizing. Plaats een fles van 100 milliliter 1% gewicht volume sacharose oplossing in elke kooi gedurende 24 uur en laat aanpassing toe. Verwijder de flessen en ontneem de ratten gedurende 12 uur voedsel en water.
Plaats twee flessen, één met 100 milliliter sacharoseoplossing, 1% gewichtsvolume en de andere 100 milliliter leidingwater in elk geval gedurende vier uur. Noteer het volume in milliliters van zowel de verbruikte sacharoseoplossing als het water en bereken hun affiniteit met sacharosevoorkeur als volgt. De sucrosevoorkeur in procenten is gelijk aan het sacharoseverbruik in milliliter, gedeeld door het sacharoseverbruik en de milliliter plus het waterverbruik in milliliters.
Alle keren 100% veranderingen in lichaamsgewicht Een eenrichtings Nova-test toonde geen verschillen in veranderingen in lichaamsgewicht tussen experimentele groepen gedurende de 21 dagen van het complexe duiken voor voedseltaak. Van dagen tot twee tot 21 waren er veranderingen in lichaamsgewicht voor alle drie de groepen, p-waarde was minder dan 0,01. Ratten met depressieve symptomen waren actiever en agressiever dan controleratten.
Ratten geïnduceerd met het agressieve lichtgedrag vertoonden een toename van de inzendingen in de tunnel met 130% plus min 3,7 p waarde minder dan 0,01. Duiken voor voedsel 141%plus min zeven, p waarde minder dan 0,01. Voedsel verkregen door een koppeling, 168%plus min 12, p waarde minder dan 0,01.
Tijd doorgebracht in afzonderlijke kooien 123%plus min 7,9, p waarde minder dan 0,01, en voedsel verkregen door aanval, 232%plus min 26, p waarde minder dan 0,01. Vergeleken met depressieve ratten die antidepressiva kregen, respectievelijk 67% plus min 3,4, 54% plus min vijf, 53% plus min zes, 55% plus min 4,7, 44% plus min zeven. De verschillen die de ratten veroorzaakten met depressieve symptomen en depressieve ratten behandeld met antidepressivum waren statistisch groter dan de verschillen tussen de ratten geïnduceerd met depressieve achtige symptomen en de controlegroep in alle vijf parameters van het complexe duiken voor voedseltests, p-waarde minder dan 0,05.
Er was geen verschil in sacharoseconsumptie aan het begin van het experiment. Op dag 35 van het experiment had de depressiegroep een p-waarde van minder dan 0,01. En de depressiegroep behandeld met antidepressivatherapie, p-waarde minder dan 0,01 had een significant lagere procent sucrose voorkeur dan de controlegroep.
Op dag 62 hadden de ratten geïnduceerd met depressieve symptomen een lager percentage over de voorkeur in vergelijking met zowel de controlegroep als de depressiegroep die werd behandeld met antidepressiva, p gewaardeerd minder dan 0,05.Conclusie. Het complexe duiken voor voedseltaak kan ons in staat stellen om de relatie tussen het brede scala aan psychische aandoeningen en sociale organisatie te beoordelen en om de effectiviteit van therapie en sociale disfunctie te bestuderen. Hartelijk dank voor uw aandacht.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.