En komplex dyk-för-mat uppgift för att undersöka social organisation och interaktioner hos råttor

Detta protokoll beskriver en metod för att undersöka social hierarki i en råttmodell. Alla råttor utför en komplex dykning för matuppgift där de bildar en distinkt hierarki enligt viljan att dyka under vatten och simma för att få en matpellet. Denna metod används för att förstå beslutsfattande och sociala relationer mellan mycket sociala djur i små grupper.

Välj vuxna manliga Sprague Dawley råttor som väger 300 till 350 gram. Ge råtta chow och vatten ad libitum. Utför alla experiment mellan 06:00 och 12:00.

Håll råttor vid rumstemperatur på 22 Celsius grader med 12 timmars ljus och 12 timmars mörka cykler. En tidslinje för experimentprotokollet. Slumpmässigt välja ut 120 råttor i en av tre försöksgrupper.

Grupp ett, N är lika med 60, kommer att användas som en kontrollgrupp. Grupp två, N är lika med 30, kommer att induceras med depression. Grupp tre, N är lika med 30, kommer också att induceras med depression och kommer därefter att behandlas med antidepressiva läkemedel.

Vissa korspreferenstester utförs före och efter induktion av kronisk oförutsägbar stress och efter komplex dykning för matuppgift. Följande stressfaktorer introduceras i slumpmässig ordning. Gruppboende genom att placera sex råttor per bur i 18 timmar.

Lutad burplacering i tre timmar 45 grader längs den vertikala axeln. Matbrist i 18 timmar. Vattendepravation i 18 timmar följt av omedelbar exponering för en tom vattenflaska.

Mjuk burplacering i åtta timmar bestående av 300 milliliter vatten som spillts ut i sängkläder. Kontinuerlig belysning och omvänd ljus mörk cykel i 48 timmar per vecka Och fem minuter varm miljö vid 40 grader Celsius. Råttor utsätts för två av de sju stressorerna dagligen i slumpmässig ordning.

En på dagtid, och den andra på natten i fem sekventiella veckor. Råttor från grupp tre administreras antidepressiv behandling med amicrom hydroflorid, trecykliskt antidepressivt medel 20 milligram per kilo intraperitoneally en gång per dag i tre veckor. Grupp två i kontrollgruppen administreras 0, 9% saltlösning placebo intraperitoneally en gång per dag i tre veckor med samma volym som antidepressiva behandlingsgruppen.

Förbered apparater och acklimatisera råttor. Anslut två burar 50 på 50 på 50 centimeter till ett akvarium 130 på 35 på 50 centimeter via tunnlar. Placera rör med matpellets, en matpellet i varje rör i ena änden av akvariet.

Markera alla sex råttor med olika färgad markör i början av experimentet för att tillåta individuell identifiering. Vid varje givet tillfälle deltog sex råttor i experimenten samtidigt. Tre av dem fungerade som kontrollgrupp ett och de andra tre var antingen depressiva grupp två, eller depressiva efter behandling, grupp tre.

På dag ett av experimentet, introducera varje grupp råttor till experimentell apparat utan vatten i tre timmars session. Returnera råttor till standardbur efter session. Videoinspela råttor i apparaten kontinuerligt under tre timmars session.

Upprepa dessa sessioner i dag två och tre. På dag fyra till 17, tillsätt vatten gradvis tills maximal vattennivå uppnås. På dag 17 till 21, håll maximal vattennivå.

Observera råttor som dyker för att komma åt pellets. Registrera följande parametrar. Frekvens av inträden i tunneln, dykning efter mat, mat som erhållits genom attack, mat som erhållits genom att bära och tid som spenderas i separata burar.

Under den mörka cykeln placera råttorna i enskilda burar i samma rum som huset. Placera en flaska med 100 milliliter 1%viktvolymer sackaroslösning i varje bur i 24 timmar och möjliggör anpassning. Ta bort flaskorna och beröva råttorna mat och vatten i 12 timmar.

Placera två flaskor, en innehållande 100 milliliter sackaroslösning, 1%viktvolym och den andra 100 milliliter kranvatten i varje enskilt fall i fyra timmar. Registrera volymen i milliliter av både den förbrukade sackaroslösningen och vattnet och beräkna deras affinitet till sackarospreferens enligt följande. Sackarospreferens i procent motsvarar sackarosförbrukningen i milliliter, dividerat med sackarosförbrukning och milliliter plus vattenförbrukning i milliliter.

Alla gånger 100%Kroppsviktsförändringar Ett enkel sätt Nova test visade inga skillnader i förändringar i kroppsvikt mellan experimentella grupper under de 21 dagarna av den komplexa dykning för mat uppgift. Från dagar till två till 21, det fanns förändringar i kroppsvikt för alla tre grupper, p-värde var mindre än 0,01. Råttor med depressiva som symtom var mer aktiva och aggressiva än kontrollråttor.

Råttor inducerade med det aggressiva ljusbeteendet visade en ökning av inträden i tunneln 130%plus minus 3,7 p värde mindre än 0,01. Dykning efter mat 141%plus minus sju, p värde mindre än 0,01. Mat som erhålls genom en parning, 168%plus minus 12, p värde mindre än 0,01.

Tid i separata burar 123%plus minus 7,9, p värde mindre än 0,01 och mat som erhålls genom attack, 232%plus minus 26, p värde mindre än 0,01. Jämfört med depressiva råttor som fick antidepressiv behandling, 67%plus minus 3,4, 54%plus minus fem, 53%plus minus sex, 55%plus minus 4,7, 44%plus minus sju respektive. Skillnaderna som råttorna framkallade med depressiva liknande symtom och deprimerade råttor som behandlades med antidepressiva var statistiskt större än skillnaderna mellan råttorna inducerade med depressiva liknande symtom och kontrollgruppen i alla fem parametrarna i den komplexa dykningen för livsmedelstester, p-värde mindre än 0, 05.

Det fanns ingen skillnad i sackaroskonsumtion i början av experimentet. Dag 35 av experimentet värderar depressionsgruppen p-värde mindre än 0,01. Och den depressionsgrupp som behandlades med antidepressiv behandling, p-värde mindre än 0,01 hade en betydligt lägre procent sackarospreferens än kontrollgruppen.

Dag 62 hade råttorna som inducerades med depressiva liknande symtom en lägre procent i förhållande till både kontrollen och depressionsgruppen som behandlades med antidepressiv behandling, p värderad mindre än 0,05.Slutsats. Den komplexa dykning för matuppgift kan göra det möjligt för oss att bedöma förhållandet mellan det breda utbudet av psykisk sjukdom och social organisation samt att studera effektiviteten av terapi och social dysfunktion. Tack så mycket för er uppmärksamhet.