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Insertion co-translationnelle de protéines membranaires dans des nanodisques préformés
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Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
Co-Translational Insertion of Membrane Proteins into Preformed Nanodiscs
DOI:

08:24 min

November 19, 2020

, , ,

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:45S30 Ribosomal Protein Lysate Preparation
  • 02:17Membrane Scaffold Protein 1E3D1 (MSP1E3D1) Nanodisc Assembly
  • 03:243-mL Continuous Exchange Cell-Free (CECF) Reaction Setup
  • 04:1060-Microliter CECF Reaction Setup
  • 06:07Results: Representative Preformed Nanodisc-Modified Membrane Protein Characterization
  • 07:40Conclusion

Summary

Automatic Translation

L’insertion co-translationnelle dans des nanodisques préformés permet d’étudier des protéines membranaires synthétisées acellulaires dans des environnements lipidiques définis sans contact avec des détergents. Ce protocole décrit la préparation des composants essentiels du système et les paramètres critiques pour améliorer l’efficacité de l’expression et la qualité de l’échantillon.

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