Medicine
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पित्त वाहिनी TNBS जलसेक के माध्यम से क्रोनिक अग्नाशयशोथ के लिए एक माउस मॉडल
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Summary February 28th, 2021
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क्रोनिक अग्नाशयशोथ (सीपी) एक ऐसी बीमारी है जो अग्न्याशय की सूजन और फाइब्रोसिस की विशेषता है, जो अक्सर असभ्य पेट दर्द से जुड़ी होती है। यह लेख 2,4,6 -त्रिनीट्रोबेनजेन सल्फोनिक एसिड (टीएनबीएस) के साथ पित्त वाहिनी जलसेक के माध्यम से सीपी के माउस मॉडल को उत्पन्न करने की तकनीक को परिष्कृत करने पर केंद्रित है।
Transcript
क्रोनिक अग्नाशयशोथ एक जटिल बीमारी है जिसमें अग्नाशय की सूजन, फाइब्रोसिस, पेट दर्द और अन्य लक्षण शामिल हैं। पित्त वाहिनी TNBS जलसेक मॉडल क्रोनिक अग्नाशयशोथ रोगियों में मनाया न्यूरोपैथिक दर्द प्रतिकृति । चूहों में एक क्रोनिकल अग्नाशयशोथ मॉडल की पीढ़ी को प्रेरित करने के लिए इस पित्त वाहिनी टीएनबीएस जलसेक प्रोटोकॉल को अनुकूलित किया गया है।
चूहों में पित्त वाहिनी दवा संलयन तकनीकी रूप से चुनौतीपूर्ण है के रूप में, अपने दृश्य विधि के लिए नए शोधकर्ताओं के लिए उपयोगी हो जाएगा । सर्जरी से पहले और दो और तीन सप्ताह बाद, वॉन फ्रे मोनोफिलमेंट्स का उपयोग आठ से 10 सप्ताह पुराने, C57 काले छह माउस, प्रति आवेदन एक से दो सेकंड के लिए 10 बार के ऊपरी पेट क्षेत्र में आरोही क्रम में बल के विभिन्न स्तरों को लागू करने के लिए करें। एक सकारात्मक प्रतिक्रिया के रूप में पेट के पीछे हटने या चाट बढ़ाने पर विचार करें।
इसके बाद, एक इंसुलिन सिरिंज एक हौसले से तैयार 0.75 प्रतिशत TNBS समाधान के 50 माइक्रोलीटर के साथ एक 31 गेज सुई से लैस लोड करें। एक वाहन नियंत्रण के रूप में खारा में 10 प्रतिशत इथेनॉल के ५० माइक्रोलीटर के साथ एक दूसरी सिरिंज लोड और प्रकाश से संरक्षित बर्फ पर दोनों सिरिंज जगह है । पेडल पलटा के लिए प्रतिक्रिया की कमी की पुष्टि करने के बाद, शेविंग या बाल हटाने क्रीम लागू करने और एक विच्छेदन माइक्रोस्कोप के तहत एक गर्म सर्जिकल पैड पर माउस जगह द्वारा एनेस्थेटाइज्ड माउस के पेट क्षेत्र से बालों को हटा दें।
प्रत्येक आंख के लिए पशु चिकित्सा मरहम लागू करें, और तीन अनुक्रमिक दो प्रतिशत आयोडीन और ३ ७० प्रतिशत इथेनॉल पोंछे के साथ शल्य चिकित्सा साइट कीटाणुरहित एक सतत गति में एक ०.५ से एक सेंटीमीटर चीरा बनाने के लिए माइक्रो कैंची का उपयोग करें और कपास झाड़ू का उपयोग करने के लिए धीरे से duodenum बेनकाब और आम पित्त वाहिनी का पता लगाने के लिए । जिगर और पित्ताशय की थैली में उपचार के प्रवाह को रोकने के लिए, माइक्रोस्कोप का उपयोग करने के लिए समीपस्थ आम वाहिनी पर एक सीधे माइक्रो हीमोक्लिप जगह है, और अग्नाशय वाहिनी में vater के पैपिला के माध्यम से TNBS भरी हुई सिरिंज की सुई डालें । सुई को सुरक्षित करने के लिए एक घुमावदार माइक्रो हीमोक्लिप का उपयोग करें, और एक मिनट के दौरान अग्नाशय वाहिनी में समाधान को बढ़ावा दें।
जब सभी समाधान वितरित किए गए हैं, तो सावधानी से माइक्रो क्लैंप को हटा दें और पुष्टि करें कि डुओडेनम अपनी मूल स्थिति में लौट आया है। पेट की गुहा के बंद होने से पहले, डुओडेनम को अपनी मूल स्थिति में लौटने में मदद करने और पेरिस्टलसिस की वसूली में सहायता करने के लिए 36 से 37 डिग्री सेल्सियस बाँझ खारा के 500 माइक्रोलीटर जोड़ें। मांसपेशियों की परत में चीरा बंद करने के लिए पांच-ओ सिलाई के साथ एक निरंतर सीवन का उपयोग करें, और चार-ओ सिलाई के साथ एक बाधित सीवन का उपयोग करके त्वचा को बंद करें।
फिर माउस को पूर्ण अनुष् का होने तक निगरानी के साथ हीटिंग पैड पर एक वसूली पिंजरे में रखें। संकट के संकेतों के लिए पहले सप्ताह के बाद सर्जरी के दौरान माउस स्वास्थ्य और व्यवहार की निगरानी करें, जैसे कि मुखर, एक कूबड़ वापस मुद्रा या लोकोमोशन को कम करना और हर दूसरे दिन शरीर के वजन को मापना। जैसा कि देखा गया, स्याही के 50 माइक्रोलीटर के इंजेक्शन ने पूरे अग्न्याशय की घुसपैठ में परिणाम दिया, जिससे अधिक समरूप रोग फेनोटाइप को शामिल करने की अनुमति मिली।
इस प्रतिनिधि विश्लेषण में, सर्जरी के बाद पहले तीन दिनों में, नियंत्रण समूह में चूहों धीरे से ठीक होने से पहले अपने मूल शरीर के वजन का लगभग छह प्रतिशत खो दिया है और 21 दिन से अपने मूल शरीर के वजन का १००% से अधिक प्राप्त । इसके विपरीत, चूहों कि TNBS प्राप्त सर्जरी के बाद पहले पांच दिनों के दौरान अपने मूल शरीर के वजन का लगभग 15 प्रतिशत खो दिया है और 21 दिन से अपने मूल शरीर के वजन का सिर्फ १०० प्रतिशत के तहत आ गया । चूहों को नियंत्रित करने की तुलना में, TNBS इंजेक्शन जानवरों सर्जरी के बाद दूसरे और तीसरे सप्ताह के दौरान एक वृद्धि हुई पेट यांत्रिक अतिसंवेदनशीलता दिखाया ।
अग्न्याशय के शरीर के वजन के प्रति आकार और वजन, नियंत्रण जानवरों से काटे गए अग्न्याशय की तुलना में TNBS चूहों में काफी कम हो गया था, टीएनबीएस में एक चिह्नित अग्नाशय शोष का सुझाव-गंभीर और दीर्घकालिक क्रोनिक अग्नाशयशोथ वाले मनुष्यों में निष्कर्षों के अनुरूप जानवरों का इलाज किया गया। नियंत्रण इथेनॉल-इलाज चूहों से अग्नाशय के ऊतक वर्गों के हिस्टोलॉजिकल विश्लेषण ने एक सामान्य आकृति विज्ञान दिखाया जबकि टीएनबीएस-इलाज चूहों के ऊतक वर्गों ने वसा कोशिका घुसपैठ और फाइब्रोसिस द्वारा प्रतिस्थापित किए गए acinar कोशिकाओं के भारी नुकसान के साथ अस्पष्ट बोध का प्रदर्शन किया। इंजेक्शन TNBS को लड़की मूत्राशय में प्रवेश करने से रोकना और आंत महत्वपूर्ण है क्योंकि एक TNBS ऊतक हानिकारक प्रभाव है ।
जलसेक के दौरान, हाथ को पंक्चर-अभिनय से बचने के लिए जितना संभव हो उतना स्थिर रखें। क्रोनिक अग्नाशयशोथ विकास को प्रेरित करने के अलावा, इस पित्त वाहिनी जलसेक चूहों कला का उपयोग अन्य अग्नाशय रोग मॉडल के विकास के लिए किया जा सकता है। इस TNBS क्रोनिक अग्नाशयशोथ माउस मॉडल का उपयोग रोगजनन और क्रोनिक अग्नाशयशोथ के उपचार के साथ-साथ अन्य अग्नाशय के रोगों दोनों का अध्ययन करने के लिए किया जा सकता है।
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