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May 6th, 2021
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这里描述的是光血栓中风模型，其中中风通过完整的头骨产生，在施用光敏染料后，使用激光照明诱导永久微血管闭塞。
Transcript
光血栓中风模型方法可能适合细胞和分子研究皮质可塑性，因为边界有限，在皮层的不同区域诱导损伤的灵活性有限。光血栓形成模型与其他中风模型有三大优势，即将病变引向所需区域的可能性、高可重复性和低死亡率。适当的玫瑰孟加拉剂量是关键的成功和模型的稳定性。
结果取决于技术规范，如激光功率、交叉应用正时和未受影响皮层的光学先令。首先溶解玫瑰孟加拉在0.9%盐溶液的最终浓度为每毫升10毫克。使用热铅消毒器对所有仪器进行细致消毒，并在手术前后使用微生物消毒喷雾对所有表面进行消毒。
准备一个装满盐水溶液的注射器，以保持操作区域水分和准备麻醉气体。测量小鼠的体重，以调整要注射的玫瑰孟加拉的剂量。设置相关反馈控制加热垫，以保持鼠标体温。
一旦小鼠完全麻醉并固定在立体定向框架中，轻轻插入直肠探头，在整个外科手术过程中监测小鼠的体温。将 Dex 泛酚眼药膏涂抹在眼睛上，用消毒剂清洁皮肤和周围毛皮。用剪刀做一个两到两厘米半厘米的纵向切口，并缩回暴露头骨。
使用棉花轻轻取出腹膜并定位冠状缝合线。打开 561 纳米激光时戴上防护眼镜，在左侧标记加号 3 毫米，然后关闭激光，在标记的坐标上挂上直径为 4 毫米的孔的贴纸。将鼠标内注射玫瑰孟加拉。
将激光束置于距离头骨四到五厘米的地方。打开激光并照亮头骨 20 分钟。通过涂抹两滴0.9%的盐水来补充头骨水分。
在缝注伤口后，将鼠标置于37摄氏度的恢复室中，以便从麻醉中恢复过来。一小时后，将鼠标放回笼子里，放在温度控制室。连续冠心病脑部段的晶体紫罗兰色在中风诱导24小时后用于梗塞体积进入分析。
这种中风模型的变异性较低，平均梗塞量为29.3立方毫米，占一个脑半球的23%。光粒体病变导致复合神经评分所示的中度和长期感觉运动损伤。手术后24小时，中风动物的神经评分发生了显著变化。
尽管差异仍然存在，但中风小鼠会随着时间而改善。在受玫瑰孟加拉加照明的老鼠中，手术后24小时体重和体温下降。然而，在手术后的三天内，观察到了恢复情况。
利用激光成像证实了缺血变化。结果表明，仅由玫瑰孟加拉或激光照明不会产生病变，而两者同时应用则产生一个圆形低沉灌水区，周围环绕着狭窄的寡头区域。手术后24小时评估梗塞体积的水晶紫罗兰色和隧道染色表明，玫瑰孟加拉或激光照明手术均未造成组织损伤。
另一方面，玫瑰孟加拉加激光照明产生了一个划好分界病变。重要的是要测量动物的体重来调整玫瑰孟加拉注射。验尸官切换器的正确状态对于诱导动物之间一致的病变非常重要。
由于此协议使头骨完好无损，甚至可以通过颅窗执行，因此可以与宽场或多光子在体内成像相结合。
