Neuroscience
A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 2 minutes.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Modelleringsslag hos möss: Fokala kortikala lesioner genom fotokrobtik
Chapters
Summary May 6th, 2021
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Beskrivs här är den fototrobiska stroke modellen, där en stroke produceras genom den intakta skallen genom att inducera permanent mikrovaskulär ocklusion med laser belysning efter administrering av ett ljuskänsligt färgämne.
Transcript
Fotothrombosis stroke modell strategi kan genom lämpliga för cellulära och molekylära studier av när plasticitet på grund av de begränsade gränserna och flexibilitet att inducera skada i olika delar av cortex. Tre principfördelar skiljer fotothrombosismodellen från andra strokemodeller, möjligheten att rikta lesionen till önskad region, det är hög reproducerbarhet och låg dödlighet. Korrekt rosbengal dosering är avgörande för framgången och för stabiliteten i modellen.
Resultaten beror på teknisk specifikation som laserkraft, korsapplikationstidpunkt och optisk shilling av den opåverkade cortex. Börja med att lösa upp rosbengal i 0,9%saltlösning för en slutlig koncentration på 10 milligram per milliliter. Sterilisera noggrant alla instrument med en varm blysterilisering och desinficera alla ytor före och efter operationen med en mikrobiell desinfektionsspray.
Förbered en spruta fylld med saltlösning för att bibehålla operationsområdet hydratiserat och förbereda anestesigasen. Mät musens kroppsvikt för att justera dosen av rosenbengal som ska injiceras. Ställ in den tillhörande återkopplingsstyrda värmedynan för att bibehålla muskroppens temperatur.
När musen är helt sövd och fixerad i stereotaktisk ram, sätt försiktigt in rektalsonden för att övervaka musens kroppstemperatur under hela det kirurgiska ingreppet. Applicera Dex panthenol ögonsalva på båda ögonen och rengör huden och den omgivande pälsen med desinfektionsmedel. Använd sax för att göra ett enda två till två och en halv centimeter längsgående snitt och dra tillbaka för att exponera skallen.
Använd bomull för att försiktigt ta bort periosteum och lokalisera koronan suturer. Använd skyddsglasögon medan du slår på 561 nanometerslasern och markera plus tre millimeter till vänster, stäng sedan av lasern och haka klistermärket med fyra millimeters diameterhål i de markerade koordinaterna. Injicera musen intraparietal med rosenbengal.
Placera laserstrålen på ett avstånd av fyra till fem centimeter från skallen. Slå på lasern och tänd skallen i 20 minuter. Rehydrera skallen genom att applicera två droppar på 0,9% saltlösning.
Efter att ha suturing såret, placera musen i en återhämtningskammare på 37 grader Celsius för att återhämta sig från anestesi. Efter en timme placerar du musen tillbaka i buret i ett temperaturkontrollerat rum. Kristall violett fläck till seriell koronona hjärnsektioner användes för infarct volym ingång analys efter 24 timmar av stroke induktion.
Variationen i denna stroke modell var låg, och den genomsnittliga infarkt volymen var 29,3 kubik millimeter, vilket motsvarar 23%av en hjärna halvklotet. Phototrombosis lesion orsakade en måttlig och långsiktig sensorisk motorisk nedskrivning anges av sammansatta neuro poäng. Stroke djur hade en betydande förändring i neuro poäng 24 timmar efter operationen.
Även om skillnaderna kvarstod förbättrades strokemössen med tiden. Hos möss som utsätts för rosenbengal plus belysning minskade kroppsvikten och kroppstemperaturen 24 timmar efter operationen. Men inom tre dagar efter operationen observerades återhämtning.
Skandinaviska förändringar bekräftades med laser imaging. Resultaten anges att rosen bengal eller laser belysning ensam inte producerar en lesion medan samtidig tillämpning av båda genererade ett runt hypoperfused område omgiven av den smala oligomeric zonen. Kristall violett och tunnel färgning för bedömning av infarct volym 24 timmar efter kirurgi visade inga vävnad skador varken i rosen bengal eller laser belysning operationer.
Å andra sidan genererade rosenbengal plus laserbelysning en väl avgränsad lesion. Det är viktigt att mäta djurets kroppsvikt för att justera rosenbengalinjektionen. Rätt tillstånd hos coroner switchers är viktigt för att inducera en konsekvent lesion mellan djur.
Eftersom detta protokoll lämnar skallen intakt och kan även utföras genom hjärnskålen fönster, Det kan kombineras med brett fält eller flera foton in vivo imaging.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.
