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Fixation et isolement rapides in vivo de complexes translationnels à partir de cellules eucaryotes
 
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Fixation et isolement rapides in vivo de complexes translationnels à partir de cellules eucaryotes

Article DOI: 10.3791/62639-v 14:29 min December 25th, 2021
December 25th, 2021

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Nous présentons une technique pour stabiliser rapidement les complexes translationnels (biosynthèse des protéines) avec réticulation du formaldéhyde dans les cellules de levures et de mammifères vivantes. L’approche permet de disséquer les intermédiaires transitoires et les interactions dynamiques ARN:protéine. Les complexes réticulés peuvent être utilisés dans de multiples applications en aval telles que les méthodes de profilage basées sur le séquençage en profondeur, la microscopie et la spectrométrie de masse.

Tags

Biologie numéro 178 capture instantanée de biosynthèse des protéines stabilisation complexe de traduction réponses cellulaires rapides stress cellulaire complexes ribosomiques purification d’affinité des intermédiaires de traduction contrôle translationnel séquençage de profil complexe de traduction TCP-seq profilage de ribosome (traduction) ribo-seq sédimentation de ribosomes par ultracentrifugation dans le gradient de saccharose
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