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Schnelle In-vivo-Fixierung und Isolierung translationaler Komplexe aus eukaryotischen Zellen
 
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Schnelle In-vivo-Fixierung und Isolierung translationaler Komplexe aus eukaryotischen Zellen

Article DOI: 10.3791/62639-v 14:29 min December 25th, 2021
December 25th, 2021

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Wir stellen eine Technik zur schnellen Stabilisierung translationaler (Proteinbiosynthese) Komplexe mit Formaldehydvernetzung in lebenden Hefe- und Säugetierzellen vor. Der Ansatz ermöglicht die Sezierung transienter Zwischenprodukte und dynamischer RNA:Protein-Interaktionen. Die vernetzten Komplexe können in mehreren nachgelagerten Anwendungen eingesetzt werden, z. B. in Deep-Sequencing-basierten Profilierungsmethoden, Mikroskopie und Massenspektrometrie.

Tags

Biologie Ausgabe 178 Protein-Biosynthese-Snapshot-Erfassung Translation-Komplex-Stabilisierung schnelle Zellantworten zellulärer Stress ribosomale Komplexe Affinitätsreinigung von Translationszwischenprodukten translationale Kontrolle Translationskomplexprofilsequenzierung TCP-seq Ribosomenprofilierung (Translation) Ribo-seq Ribosomensedimentierung durch Ultrazentrifugation im Saccharosegradienten
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