Immunology and Infection
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श्वसन मेलियोइडोसिस के दौरान फेफड़ों के कार्य को चिह्नित करने के लिए सरलीकृत पूरे शरीर प्लेथिस्मोग्राफी
Chapters
Summary February 24th, 2023
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यह प्रोटोकॉल जीवाणु श्वसन रोग की प्रगति की गैर-आक्रामक रूप से निगरानी करने के लिए एक सरलीकृत पूरे शरीर प्लेथिस्मोग्राफी तंत्र के निर्माण और उपयोग को प्रस्तुत करता है।
Transcript
सरलीकृत पूरे शरीर प्लेथिस्मोग्राफी का उपयोग अनुसंधान जानवरों में फेफड़ों के कार्य और रोग की प्रगति के बीच संबंधों पर प्रकाश डालने में मदद कर सकता है। इस तकनीक का मुख्य लाभ गैर-संयमित जानवरों से श्वसन डेटा एकत्र करने की क्षमता है। आठ-पिन डीआईएन कनेक्टर और ब्रिज एम्पलीफायर को डेटा अधिग्रहण डिवाइस का उपयोग करके नमूना कक्ष को पुल एम्पलीफायर से जोड़कर सिस्टम सेटअप से शुरू करें।
डेटा अधिग्रहण डिवाइस को बिजली की आपूर्ति और शारीरिक डेटा विश्लेषण सॉफ्टवेयर के साथ एक कंप्यूटर से कनेक्ट करें। कनेक्ट होने पर, डेटा अधिग्रहण प्रणाली के साथ इंटरफ़ेस करने के लिए सॉफ़्टवेयर शुरू करें। सॉफ्टवेयर में वैकल्पिक स्पिरोमेट्री मॉड्यूल डाउनलोड करें और सेटिंग्स विंडो में डिफ़ॉल्ट यूनिट सेटिंग्स को लीटर प्रति सेकंड से माइक्रोलीटर प्रति सेकंड में संशोधित करने के लिए स्पिरोमेट्री टैब पर जाएं।
सिस्टम के अंशांकन के लिए, सॉफ्टवेयर के भीतर एक चार-चैनल विंडो बनाएं। चैनल एक में, स्रोत डेटा को 4,000 डेटा बिंदु प्रति सेकंड नमूना दर और एक मिलीवोल्ट रेंज पर सेट करें। चैनल दो एक उच्च-पास, एक-हर्ट्ज, ऑटो-एडजस्ट फिल्टर का उपयोग करके चैनल का डिजिटल फ़िल्टर होगा।
100 नमूनों के औसत से चैनल दो डेटा के स्मूथिंग टैब में चैनल तीन बनाएं। और चैनल तीन डेटा के स्पिरोमेट्री प्रवाह में चैनल चार बनाएं। इसके बाद, तीन कॉलम के साथ चैनल चार का डेटा पैड विश्लेषण सेट करें।
कॉलम एक के लिए, पूर्ण टिप्पणी पाठ तक पहुंचने के लिए चैनल चार डेटा और टिप्पणियों पर जाएं। फिर कॉलम दो और चैनल चार डेटा और चक्रीय माप सेट करें ताकि औसत चक्रीय आवृत्ति का चयन किया जा सके कॉलम तीन और चैनल चार डेटा के लिए, चक्रीय माप और औसत चक्रीय ऊंचाई का चयन करें। चार्ट डिस्प्ले के निचले दाएं कोने पर फ्रेम दर को 100 से 1 पर सेट करें और विंडो कॉन्फ़िगरेशन को भविष्य के अध्ययनों के लिए टेम्पलेट के रूप में सहेजें।
जब ऐसा किया जाता है, तो नमूना कक्ष ढक्कन बंद करें और लालच बल्कहेड कनेक्टर में 25-माइक्रोलीटर गैस-तंग सिरिंज संलग्न करें। फिर सिरिंज को चानी एडाप्टर के साथ फिट करें ताकि सिरिंज में 20 माइक्रोलीटर हवा खींचने के लिए चानी एडाप्टर के गहराई स्टॉप का उपयोग किया जा सके। इसके बाद, सॉफ़्टवेयर में प्लेथ को शून्य करने के लिए, सेटअप टैब एक्सेस करें और रिकॉर्डिंग शुरू करने से पहले शून्य सभी इनपुट का चयन करें।
रिकॉर्डिंग करते समय, बेसलाइन को स्थिर करने के लिए प्रतीक्षा करें और फिर सिरिंज प्लंजर को 10 पुनरावृत्तियों के लिए तेजी से दबाएं और वापस लें ताकि मापा 20-माइक्रोलीटर सांस के साथ विषय श्वास को दोहराया जा सके। एक बार पूरा हो जाने के बाद, क्रमांकित प्लेथ रिकॉर्डिंग की शुरुआत पर राइट क्लिक करके रिकॉर्डिंग बंद करें और टिप्पणी जोड़ें पर क्लिक करके मापा नमूना की पहचान लेबल करें। सिरिंज को रीसेट करें और इनपुट को शून्य करें, और 20-माइक्रोलीटर दालों के रिकॉर्डिंग माप को दो बार दोहराएं।
तीन रिकॉर्डिंग सत्रों में सभी मापों को पूरा करने के बाद, श्वास प्लेथ के एक हिस्से का चयन करने के लिए कंप्यूटर माउस का उपयोग करें जो कृत्रिम 20-माइक्रोलीटर सांसों का सटीक प्रतिनिधित्व करता है। इसके बाद, औसत चक्रीय ऊंचाई के लिए कॉलम तीन डेटा की समीक्षा करें और तीन रिकॉर्डिंग से औसत मापा सांस की मात्रा की गणना करें। पहले वर्णित के रूप में उल्लिखित एक मास्टर टेम्पलेट खोलें।
इसके बाद, नमूना कक्ष में एक सचेत 4-से-12 सप्ताह, महिला, अल्बिनो सी 57 ब्लैक 6 जे माउस रखें और ढक्कन को कुंडी लगाएं। कक्ष में वायुमंडलीय दबाव को बराबर करने के लिए लालच बल्कहेड कैप को संक्षेप में ढीला करें और टोपी को फिर से कस दें। ध्यान दें कि सभी इनपुट को शून्य करने और रिकॉर्डिंग शुरू करने से पहले विषय सक्रिय रूप से नमूना कक्ष के भीतर आगे नहीं बढ़ रहा है।
क्रमांकित प्लेथ रिकॉर्डिंग की शुरुआत पर राइट-क्लिक करके और टिप्पणी जोड़ें पर क्लिक करके विषय की पहचान को लेबल करें। फिर माउस को पिंजरे में वापस कर दें। श्वास प्लेथ के एक हिस्से का चयन करें जो श्वास विषय का सटीक प्रतिनिधित्व करता है।
डेटा पैड मॉड्यूल में, डेटा पूर्वावलोकन हेडर में दिखाई देगा जो सांस की दर और सांस की मात्रा का अस्थायी रीडआउट प्रदान करता है। डेटा पूर्वावलोकन को डेटा पैड आइकन में जोड़ें का उपयोग करके डेटा पैड में दर्ज किया जा सकता है। एक समय में एक विषय माउस के लिए मापदंडों को मापना जारी रखें, और डेटा पैड पर श्वास प्लेथ के प्रतिनिधि वर्गों को रिकॉर्ड करें।
डेटा रिकॉर्डिंग के बाद, डेटा पैड डेटा को एक्सेल में निर्यात करें और मिनट वॉल्यूम की गणना करें। पूरे शरीर के प्लेथिस्मोग्राफी के नैदानिक उपयोग में, विषय के अपने शरीर का तापमान और पर्यावरणीय तापमान, और आर्द्रता जटिल श्वसन गणना को प्रभावित करते हैं। अध्ययन में, एक सरलीकृत पूरे शरीर प्लेथिस्मोग्राफी या एसडब्ल्यूबीपी दृष्टिकोण पर्यावरणीय तापमान और आर्द्रता भिन्नता के लिए नियंत्रण करता है, और यह देखा गया कि मेजबान के तापमान और आर्द्रता में योगदान 20-माइक्रोलीटर अंशांकन मात्रा के सांस माप की सटीकता को महत्वपूर्ण रूप से प्रभावित नहीं करता है।
चूहों की सांस लेने पर इनहेल्ड एनेस्थेटिक्स के प्रभाव की जांच की गई। एनेस्थीसिया से पहले बेसलाइन श्वास और एनेस्थीसिया से माउस के ठीक होने के दौरान श्वास को यहां दिखाया गया है। पसंदीदा एनेस्थेटिक के साथ उपचार ने चूहों को हवा की एक बड़ी ज्वारीय मात्रा के साथ धीमी सांस की दर का प्रदर्शन किया।
जैसे-जैसे चूहे बेहोश करने की क्रिया से उबरते हैं, सांस की दर बढ़ जाती है और सांस की मात्रा धीरे-धीरे कम हो जाती है। इसी तरह, एनेस्थीसिया से हटाने के बाद बेसलाइन श्वास को 2 से 2.5 मिनट तक बहाल करने तक सांस की दर लगातार बढ़ी। एनेस्थीसिया से हटाने के बाद 2.5 मिनट तक बेसलाइन मिनट वॉल्यूम तक पहुंचने वाली सांस की दर के प्रभावों का बारीकी से पालन किया गया।
मेजबान चूहों में श्वसन मेलियोइडोसिस संक्रमण के दौरान सांस में परिवर्तन की निगरानी की गई थी। संक्रमण के पहले दिन के दौरान चूहों की सांस की दर और कुल प्रेरित हवा तेजी से कम हो गई और बीमारी के बाकी हिस्सों के लिए कम रही। इसके विपरीत, पहले 24 घंटों के दौरान सांस की मात्रा तेजी से नहीं गिरती है और इसके बजाय बीमारी के तीन-दिवसीय पाठ्यक्रम में लगातार कमी आती है।
इन आंकड़ों से पता चलता है कि सांस की मात्रा चूहों में श्वसन रोग की गंभीरता का बायोमेट्रिक रीडआउट प्रदान कर सकती है। इस प्रक्रिया का प्रयास करते समय याद रखने वाली सबसे महत्वपूर्ण बात यह है कि रिकॉर्डिंग शुरू करने से पहले माउस के हिलने तक प्रतीक्षा करें। कभी-कभी आपको धैर्य रखना चाहिए जबकि एक उत्सुक माउस नमूना कक्ष की पड़ताल करता है।
यह तकनीक यह पता लगाने का मार्ग प्रशस्त करेगी कि बैक्टीरियल म्यूटेंट अपनी परिवर्तित बीमारी प्रक्रिया के दौरान मेजबान फेफड़ों के कार्य पर अलग-अलग प्रभाव कैसे प्रदर्शित करते हैं, और कैसे चिकित्सीय हस्तक्षेप संक्रमित चूहों में सामान्य फेफड़ों के कार्य की बहाली में तेजी ला सकता है।
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