Immunology and Infection
This content is Free Access.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Solunum Melioidozu Sırasında Akciğer Fonksiyonunu Karakterize Etmek için Basitleştirilmiş Tüm Vücut Pletismografisi
Chapters
Summary February 24th, 2023
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Bu protokol, bakteriyel solunum yolu hastalığının ilerlemesini invaziv olmayan bir şekilde izlemek için Basitleştirilmiş Tüm Vücut Pletismografi aparatının yapımını ve kullanımını sunar.
Transcript
Basitleştirilmiş Tüm Vücut Pletismografisinin kullanılması, araştırma hayvanlarında akciğer fonksiyonu ile hastalık ilerlemesi arasındaki ilişkiye ışık tutmaya yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, kısıtlanmamış hayvanlardan solunum verilerini toplama yeteneğidir. Örnekleme odasını sekiz pimli bir DIN konektörü kullanarak bir köprü amplifikatörüne ve köprü amplifikatörünü veri toplama cihazına bağlayarak sistem kurulumuyla başlayın.
Veri toplama cihazını fizyolojik veri analiz yazılımı ile bir güç kaynağına ve bilgisayara bağlayın. Bağlandığında, veri toplama sistemi ile arayüz oluşturmak için yazılımı başlatın. Yazılımdaki isteğe bağlı spirometri modülünü indirin ve ayarlar penceresinde varsayılan birim ayarlarını saniye başına litreden saniyede mikrolitreye değiştirmek için spirometri sekmesine gidin.
Sistemin kalibrasyonu için, yazılım içinde dört kanallı bir pencere oluşturun. Birinci kanalda, kaynak verileri saniyede 4.000 veri noktası örnekleme hızına ve bir milivolt aralığına ayarlayın. İkinci kanal, yüksek geçişli, bir hertz, otomatik ayarlama filtresi kullanan bir kanalın dijital filtresi olacaktır.
Ortalama 100 örnek alarak kanal iki verisinin yumuşatma sekmesinde üçüncü kanalı oluşturun. Ve kanal üç verilerinin spirometri akışında dördüncü kanalı oluşturun. Ardından, üç sütunlu dördüncü kanalın veri defteri analizini ayarlayın.
Birinci sütunda, tam yorum metnine erişmek üzere kanal dört veri ve yorumlarına gidin. Ardından, ortalama döngüsel frekansı seçmek için sütun iki ve kanal dört verilerini ve döngüsel ölçümleri ayarlayın Üçüncü sütun ve kanal dördüncü veriler için döngüsel ölçümleri ve ortalama döngüsel yüksekliği seçin. Grafik ekranının sağ alt köşesinde kare hızını 100 ila 1 olarak ayarlayın ve pencere yapılandırmasını gelecekteki etütler için şablon olarak kaydedin.
İşiniz bittiğinde, numune haznesi kapağını kapatın ve cazibe bölmesi konektörüne 25 mikrolitrelik gaz geçirmez bir şırınga takın. Ardından, şırıngaya 20 mikrolitre hava çekmek için Chaney adaptörünün derinlik durağını kullanmak üzere şırıngayı bir Chaney adaptörü ile takın. Ardından, yazılımdaki pleth'i sıfırlamak için, kurulum sekmesine erişin ve bir kayda başlamadan önce tüm girişleri sıfırla'yı seçin.
Kayıt sırasında, bir taban çizgisinin stabilize olmasını bekleyin ve ardından ölçülen 20 mikrolitrelik bir nefesle denek nefesini çoğaltmak için 10 tekrar için şırınga pistonunu hızla bastırın ve geri çekin. İşiniz bittiğinde, numaralandırılmış pleth kaydının başlangıcına sağ tıklayarak kaydı durdurun ve yorum ekle'ye tıklayarak ölçülen numunenin kimliğini etiketleyin. Şırıngayı sıfırlayın ve girişi sıfırlayın ve 20 mikrolitrelik darbelerin kayıt ölçümlerini iki kez tekrarlayın.
Tüm ölçümleri üç kayıt oturumunda tamamladıktan sonra, yapay 20 mikrolitrelik nefesleri doğru bir şekilde temsil eden solunum pletinin bir bölümünü seçmek için bilgisayar faresini kullanın. Ardından, ortalama döngüsel yükseklik için sütun üç verisini gözden geçirin ve üç kayıttan ortalama ölçülen nefes hacmini hesaplayın. Daha önce açıklandığı gibi özetlenen bir ana şablonu açın.
Ardından, örnekleme odasına bilinçli bir 4-12 haftalık, dişi, albino C57 siyah 6J fare yerleştirin ve kapağı kilitleyin. Odadaki atmosferik basıncı eşitlemek için cazibe bölmesi kapağını kısaca gevşetin ve kapağı tekrar sıkın. Tüm girişleri sıfırlamadan ve bir kayıt başlatmadan önce nesnenin örnekleme odasında aktif olarak hareket etmediğini gözlemleyin.
Numaralandırılmış pleth kaydının başlangıcına sağ tıklayıp yorum ekle'ye tıklayarak konunun kimliğini etiketleyin. Ardından fareyi kafese geri getirin. Nefes alma işleminin öznenin nefes almasını doğru bir şekilde temsil eden bir bölümünü seçin.
Veri pedi modülünde, veriler önizleme başlığında görünür ve nefes alma hızı ve nefes hacminin geçici olarak okunmasını sağlar. Veri önizlemesi, veri pedine ekle simgesi kullanılarak veri defterine kaydedilebilir. Bir denek faresinin parametrelerini teker teker ölçmeye ve nefes alma işleminin temsili bölümlerini veri defterine kaydetmeye devam edin.
Veri kaydından sonra, veri defteri verilerini Excel'e aktarın ve dakika hacmini hesaplayın. Tüm vücut pletismografisinin klinik kullanımında, deneğin kendi vücut ısısı ve ortam sıcaklığı ve nem, karmaşık solunum hesaplamalarını etkiler. Çalışmada, Basitleştirilmiş Tüm Vücut pletismografisi veya SWBP yaklaşımı, çevresel sıcaklık ve nem değişimini kontrol eder ve konakçının kendisinin sıcaklık ve neme katkısının, 20 mikrolitrelik bir kalibrasyon hacminin nefes ölçümlerinin doğruluğunu önemli ölçüde etkilemediği gözlenmiştir.
Solunan anesteziklerin farelerin nefes alması üzerindeki etkisi araştırıldı. Anestezi öncesi temel solunum ve fare anesteziden kurtulurken alınan nefes burada gösterilmiştir. Tercih edilen anestezi ile tedavi, farelerin büyük bir gelgit hacmi ile yavaş bir nefes hızı göstermesine neden oldu.
Fareler sedasyondan kurtuldukça, nefes hızı arttı ve nefes hacmi kademeli olarak azaldı. Benzer şekilde, nefes hızı, temel solunum anesteziden çıkarıldıktan sonra 2 ila 2.5 dakikaya geri yüklenene kadar istikrarlı bir şekilde artmıştır. Dakika hacmi, anesteziden çıkarıldıktan sonra 2,5 dakika boyunca başlangıç dakika hacmine ulaşan nefes hızının etkilerini yakından takip etti.
Respiratuar melioidoz enfeksiyonları sırasındaki nefes değişiklikleri konakçı farelerde izlendi. Farelerin nefes alma hızı ve toplam ilham verici havası, enfeksiyonun ilk gününde hızla azaldı ve hastalığın seyrinin geri kalanında düşük kaldı. Buna karşılık, nefes hacmi ilk 24 saat boyunca dik bir şekilde düşmez ve bunun yerine hastalığın üç günlük seyrine göre sürekli bir düşüşe sahiptir.
Bu veriler, nefes hacminin farelerde solunum yolu hastalığı şiddetinin biyometrik bir okumasını sağlayabileceğini düşündürmektedir. Bu prosedürü denerken hatırlanması gereken en önemli şey, kayda başlamadan önce farenin hareket etmemesini beklemektir. Bazen meraklı bir fare örnekleme odasını keşfederken sabırlı olmanız gerekir.
Bu teknik, bakteriyel mutantların değiştirilmiş hastalık süreçleri sırasında konakçı akciğer fonksiyonu üzerinde nasıl farklı etkiler sergilediklerini ve terapötik müdahalenin enfekte farelerde normal akciğer fonksiyonunun restorasyonunu nasıl hızlandırabileceğini keşfetmenin yolunu açacaktır.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.
