Process Development for the Production and Purification of Adeno-Associated Virus (AAV)2 Vector using Baculovirus-Insect Cell Culture System

Md Nasimuzzaman; Sophia Villaveces; Johannes C. M. van der Loo; Sivani Alla

doi:10.3791/62829

/

Baculovirus-Insect Hücre Kültürü Sistemi Kullanılarak Adeno-İlişkili Virüsün (AAV)2 Vektörün Üretimi ve Saflaştırılması için Süreç Geliştirme

Process Development for the Production and Purification of Adeno-Associated Virus (AAV)2 Vector using Baculovirus-Insect Cell Culture System

JoVE Journal
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biology

Process Development for the Production and Purification of Adeno-Associated Virus (AAV)2 Vector using Baculovirus-Insect Cell Culture System

Baculovirus-Insect Hücre Kültürü Sistemi Kullanılarak Adeno-İlişkili Virüsün (AAV)2 Vektörün Üretimi ve Saflaştırılması için Süreç Geliştirme

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

9,253 Views

•

10:31 min

•

January 13, 2022

DOI:

10.3791/62829-v

DOI:

10.3791/62829-v

•

10:31 min

January 13, 2022

•

9211 Views

Md Nasimuzzaman^1,2, Sophia Villaveces¹, Johannes C. M. van der Loo^1,2,3, Sivani Alla¹

¹Division of Experimental Hematology and Cancer Biology,Cincinnati Children’s Hospital Medical Center ²University of Cincinnati College of Medicine ³Raymond G. Perelman Center for Cellular and Molecular Therapeutics,The Children’s Hospital of Philadelphia

Summary

Bu protokolde AAV2 vektörü, süspansiyon kültüründe baculovirüs (BV)-AAV2-yeşil floresan protein (GFP) veya terapötik gen ve BV-AAV2-rep-cap enfekte Sf9 hücreleri ile Spodoptera frugiperda (Sf9) böcek hücrelerinin birlikte kült haline sokulmasıyla üretilmektedir. AAV parçacıkları deterjan kullanılarak hücrelerden salınır, netleştirilir, benzeşim kolonu kromatografisi ile saflaştırılır ve teğetsel akış filtrasyonu ile konsantre edilir.