De reikwijdte van ons onderzoek omvat het meten van telomeerlengteverschillen tussen verschillende studiegroepen. De vragen die we proberen te beantwoorden, draaien om ziekten van fysiologische aandoeningen en hoe deze de telomeerlengte kunnen beïnvloeden en vice versa. De technologie wordt momenteel gebruikt om onderzoek te bevorderen op het gebied van telomeerlengtebiologie, nanoporiënsequencing en meer recent crispr cas-gebaseerde metingen.
De huidige experimentele uitdagingen zijn het nauwkeurig meten van de absolute telomeerlengte en de veranderingen daarin. Hetzelfde monster kan verschillende resultaten opleveren wanneer verschillende methoden voor het meten van de telomeerlengte worden gebruikt. De onderzoekskloof die we aanpakken, is het ontbreken van een standaardmethode om de telomeerlengte te meten.
Telomere restriction fragment analysis of TRF, is nog steeds de standaard waartegen alle nieuwe technieken worden beoordeeld. Ook helpen onze geoptimaliseerde protocollen bij het verwerken van een groter aantal monsters met beperkte middelen. Onze bevindingen zullen het onderzoek op het gebied van telomeerlengte biologisch helpen bevorderen door een betrouwbare en relatief economische manier te bieden om nieuwere methoden te vergelijken met de gouden standaard, die TRF is.
Ons laboratorium zal zich richten op de effecten van kleine molecuulremmers op de telomeerlengte. We zullen ook de impact bestuderen die leefstijlziekten en telomeerlengte op elkaar hebben.
Summary
Automatically generated
Hier beschrijven we in detail het protocol voor het kwantificeren van de telomeerlengte met behulp van niet-radioactieve chemiluminescente detectie, met een focus op de optimalisatie van verschillende prestatieparameters van de TAGGG-telomeerlengtetestkit, zoals bufferhoeveelheden en sondeconcentraties.
Jain, M., Madeka, S., Khattar, E. Optimization of Performance Parameters of the TAGGG Telomere Length Assay. J. Vis. Exp. (194), e65288, doi:10.3791/65288 (2023).