Journal
/
/
Het opzetten van gemengde neuronale en gliale celculturen van embryonale muizenhersenen om infectie en aangeboren immuniteit te bestuderen
Establishing Mixed Neuronal and Glial Cell Cultures from Embryonic Mouse Brains to Study Infection and Innate Immunity
JoVE Journal
Neuroscience
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Neuroscience
Establishing Mixed Neuronal and Glial Cell Cultures from Embryonic Mouse Brains to Study Infection and Innate Immunity

Het opzetten van gemengde neuronale en gliale celculturen van embryonale muizenhersenen om infectie en aangeboren immuniteit te bestuderen

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

2,591 Views

07:41 min

June 30, 2023

DOI:

07:41 min
June 30, 2023

12 Views
, , , , , , ,

Transcript

Automatically generated

De ultieme onderzoeksvraag van mijn project is om erachter te komen hoe we de aangeboren immuunreacties van het centrale zenuwstelsel kunnen manipuleren om te beschermen tegen virale infecties. Momenteel onderzoeken we hun reactie op het diep antivirale eiwit interferon bèta. Een experimentele uitdaging is het genereren van voldoende cellen om gedetailleerd onderzoek mogelijk te maken.

Elk resultaat moet worden gevalideerd met behulp van meerdere technieken en dit kan er helaas toe leiden dat veel dieren worden geruimd. Vanwege het grote aantal cellen dat door deze nieuwe kweektechniek wordt gegenereerd, kunnen veel verschillende experimentele omstandigheden van één zwangere muis worden onderzocht. Daarnaast vermindert het gebruik van in vitro alternatieven, waar mogelijk, ook het dierenleed sterk.

Deze methode vermindert en verfijnt het gebruik van dieren, nauwgezet volgens de principes van de drie V’s.Deze kweekmethode kan worden gebruikt om veel verschillende onderzoeksvragen aan te pakken met behulp van een verscheidenheid aan uitleesmethoden zoals ELISA, qPCR, microscopie en flowcytometrie. Deze techniek kan andere onderzoekers helpen om hun diergebruik te verminderen en te verfijnen. We hopen ons begrip van de aangeboren antivirale respons te verbeteren door deze te moduleren om te beschermen tegen opportunistische virussen zoals humaan polyomavirus 2, of John Cunningham-virus, zoals het algemeen bekend is, het primaire agens van PML dat een ernstige bijwerking kan zijn van immuunonderdrukkende geneesmiddelen die worden gebruikt om MS en andere ziekten te behandelen.

Summary

Automatically generated

Dit protocol presenteert een unieke manier om celculturen van het centrale zenuwstelsel te genereren uit embryonale dag 17 muizenhersenen voor neuro(immuno)logisch onderzoek. Dit model kan worden geanalyseerd met behulp van verschillende experimentele technieken, waaronder RT-qPCR, microscopie, ELISA en flowcytometrie.

Related Videos

Read Article