Обнаружение митофагии в клетках Caenorhabditis elegans и млекопитающих с использованием органеллоспецифических красителей

Деградация поврежденных митохондрий митофагией имеет важное значение для функционирования митохондриальной сети. К сожалению, с возрастом этот процесс снижается. Мы разрабатываем и используем препараты, которые активируют митофагию, тем самым способствуя здоровому старению, чтобы понять функцию митофагии при старении и возрастных заболеваниях, включая болезнь Альцгеймера.

Одна из самых больших проблем заключается в том, чтобы измерить процесс митофагии, не влияя на него. Недавние исследования показали, что экспрессия GFP в митохондриях мышечных клеток индуцирует стресс, который является MT UPR. Поэтому использование красителей у нетрансгенных животных или клеток имеет важное значение и дополняет генетические технологии.

Наш протокол имеет три основных преимущества. Во-первых, нет необходимости генерировать трансгенных животных или клетки, экспрессирующие биосенсоры митофагии. Во-вторых, нет необходимости в дорогостоящей инфраструктуре и опыте, как в случае электронной микроскопии.

И в-третьих, коктейль из органелл-красителя коммерчески доступен, а протокол прост и быстр. Новое соединение, активирующее митофагию, VL-850 индуцирует надежную митофагию и, таким образом, защищает от окислительного стресса и увеличивает продолжительность жизни. Теперь большой вопрос заключается в том, чтобы определить основной механизм действия.

Мы исследовали механизм на нескольких уровнях, от клеточного до организменного, используя клетки C.elegans и млекопитающих.