Journal
/
/
Caenorhabditis elegans ve Memeli Hücrelerinde Mitopajinin Organele Özgü Boyalar Kullanılarak Saptanması
Detection of Mitophagy in <em>Caenorhabditis elegans</em> and Mammalian Cells Using Organelle-Specific Dyes
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
Detection of Mitophagy in Caenorhabditis elegans and Mammalian Cells Using Organelle-Specific Dyes

Caenorhabditis elegans ve Memeli Hücrelerinde Mitopajinin Organele Özgü Boyalar Kullanılarak Saptanması

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

2,089 Views

11:59 min

May 19, 2023

DOI:

11:59 min
May 19, 2023

27 Views
,

Transcript

Automatically generated

Hasarlı mitokondrinin mitopaji ile parçalanması, mitokondriyal ağın işlevi için esastır. Ne yazık ki, bu süreç yaşla birlikte azalır. Mitofajiyi aktive eden ilaçlar geliştiriyor ve kullanıyoruz, böylece Alzheimer da dahil olmak üzere yaşlanma ve yaşa bağlı hastalıklarda mitopajinin işlevini anlamak için sağlıklı yaşlanmayı teşvik ediyoruz.

En büyük zorluklardan biri, mitofaji sürecini etkilemeden ölçmektir. Son zamanlarda yapılan çalışmalar, kas hücrelerinin mitokondrilerindeki GFP ekspresyonunun MT UPR olan stresi indüklediğini göstermiştir. Bu nedenle, transgenik olmayan hayvanlarda veya hücrelerde boyaların kullanılması esastır ve genetik teknolojileri tamamlar.

Protokolümüzün üç ana avantajı vardır. İlk olarak, mitopaji biyosensörlerini eksprese eden transgenik hayvanlar veya hücreler üretmeye gerek yoktur. İkincisi, elektron mikroskobu durumunda olduğu gibi pahalı altyapı ve uzmanlığa gerek yoktur.

Üçüncüsü, organelle boya kokteyli ticari olarak temin edilebilir ve protokol basit ve hızlıdır. Yeni mitopaji aktive edici bileşik VL-850, sağlam mitofajiyi indükler ve bu şekilde oksidatif stresten korur ve ömrünü uzatır. Şimdi asıl soru, altta yatan eylem mekanizmasını belirlemektir.

Mekanizmayı, C.elegans ve memeli hücrelerini kullanarak hücreselden organizmaya kadar birçok seviyede araştırdık.

Summary

Automatically generated

Mitofaji'yi elektron mikroskobu, genetik sensörler ve immünofloresan yoluyla keşfetmek, pahalı ekipman, yetenekli personel ve önemli bir zaman yatırımı gerektirir. Burada, ticari bir floresan boya kitinin hem Caenorhabditis elegans hem de bir karaciğer kanseri hücre hattındaki mitopaji sürecini ölçmedeki etkinliğini gösteriyoruz.

Related Videos

Read Article