A baixa solubilidade e o maior debriefing celular são as principais dificuldades de dissociação do tecido vascular. Nosso método de digestão em duas etapas é muito adequado para dissociação do tecido carotídeo e pode ser usado para preparar suspeitas de célula única para outros vasos com pequenas modificações, tornando-o muito útil na pesquisa cardiovascular. Este protocolo é adequado para a obtenção de múltiplos tipos celulares na artéria carótida, podendo ser facilmente repetido sem equipamentos especiais.
No futuro, pretendemos usar subclasses celulares descobertas por sequenciamento iônico de célula única para terapia-alvo de doença cardiovascular.
Summary
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Aqui descrevemos um protocolo de digestão celular em duas etapas para o preparo de uma suspensão unicelular de artérias carótidas de camundongos.
Li, F., Zhu, Z., Du, Y., Zhu, L., Tang, C. Preparation of a Single-Cell Suspension from Mouse Carotid Arteries for Single-Cell Sequencing. J. Vis. Exp. (203), e65863, doi:10.3791/65863 (2024).